放射性和非放射性探針之間的區(qū)別
放射性和非放射性探針之間的區(qū)別
放射性探針和非放射性探針之間的主要區(qū)別在于,放射性探針是用放射性同位素標(biāo)記的單鏈 DNA 或 RNA 序列,而非放射性探針是用化學(xué)標(biāo)簽或熒光標(biāo)簽標(biāo)記的單鏈 DNA 或 RNA 序列。
核酸雜交是分子生物學(xué),尤其是微生物診斷中的一項(xiàng)重要技術(shù)。 它有助于識別或檢測特定的核酸序列。 在該技術(shù)中,核酸被固定到固體表面并與探針雜交。 如果樣品中存在目標(biāo)序列,則探針將與其雜交并使其可檢測。常用的探針有兩種類型,即:放射性和非放射性探針。 因此,我們可以用放射性標(biāo)簽或熒光標(biāo)簽來標(biāo)記探針。
什么是放射性探針?
放射性探針是帶有放射性標(biāo)簽的單鏈 DNA 或 RNA 片段。放射性同位素用于制備放射性探針。放射性同位素 32P、33P 和 35S 常用于標(biāo)記探針。此外,放射性同位素 3H 和1251也較少用于探針標(biāo)記。但它們用于特定應(yīng)用中。在不同的放射性同位素中,32P 是標(biāo)記放射性探針最常用的同位素。
放射性探針提供更高程度的可靠性和具有特異性。因此,它們提供了最大的靈敏度并允許對目標(biāo)序列進(jìn)行準(zhǔn)確的量化。然而,放射性探針有相應(yīng)的缺點(diǎn)。它們的半衰期很短。此外,它們是危險(xiǎn)的并且在處理時(shí)生產(chǎn)、使用和處置是有問題的。此外,放射性探針的制備是一個(gè)昂貴的過程。因此,由于安全問題和成本的原因,放射性探針現(xiàn)在不被用作非放射性探針。
什么是非放射性探針?
非放射性探針是化學(xué)標(biāo)記的第二種探針。 Digoxigenin是一種非放射性探針,是一種基于抗體的標(biāo)記物。Digoxigenin探針具有特異性和敏感性。 生物素是另一種用于非放射性探針制備的標(biāo)記。 生物素/鏈霉親和素和Digoxigenin/抗體檢測系統(tǒng)是雜交中最常用的非放射性探針。 此外,辣根過氧化物酶系統(tǒng)是另一種非放射性探針系統(tǒng)。 一旦這些非放射性探針與靶序列雜交,它們就可以通過放射自顯影或其他成像技術(shù)進(jìn)行檢測。
在核酸雜交中,非放射性探針比放射性探針更常用。是因?yàn)榉欠派湫蕴筋^沒有危險(xiǎn)性和放射性。此外,非放射性檢測只需更短的暴露時(shí)間就可以檢測雜交信號。然而,用非放射性探針進(jìn)行DNA雜交的步驟通常是繁瑣和耗時(shí)的。當(dāng)然,商用國成中檢測方案價(jià)格昂貴。
放射性和非放射性探針之間有什么相似之處?
※ 放射性和非放射性探針是用于核酸雜交的兩種探針。
※ 它們有助于檢測樣本中的目標(biāo)序列。
※ 這兩種類型的探針都具有同等的靈敏度和特異性。
射性和非放射性探針有什么區(qū)別?
1. 放射性探針是用放射性同位素標(biāo)記的單鏈DNA或RNA序列,而非放射性探針是使用化學(xué)標(biāo)簽標(biāo)記的單線DNA或RNA順序。所以,這是放射性和非放射性探針之間的關(guān)鍵區(qū)別。此外,放射性同位素是具有危險(xiǎn)性放射性元素。因此,放射性探針有危險(xiǎn),而非放射性探針則不危險(xiǎn)。
2. 放射性和非放射性探針的另一個(gè)區(qū)別是它們的缺點(diǎn)。使用放射性探針的缺點(diǎn)是半衰期短以及與生產(chǎn)、使用和處置相關(guān)的危險(xiǎn)。另一方面,用非放射性探針進(jìn)行DNA雜交所涉及的步驟通常是冗長和耗時(shí)的。
下面的信息圖顯示了放射性和非放射性探針之間差異的更多比較。
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