自身免疫性神經(jīng)炎動物模型(動物實驗代做)
【模型機制】將制備的家兔坐骨神經(jīng)勻漿抗原加弗氏完全佐劑(CFA),注于大鼠足墊下,進行基礎(chǔ)免疫和加強免疫,致使坐骨神經(jīng)呈現(xiàn)大量炎癥細胞浸潤和脫髓鞘改變,神經(jīng)纖維和神經(jīng)外膜中均可見炎癥細胞浸潤灶。
【造模方法】
1.動物和制備抗原?選用雄性SD大鼠,體重170~190g。主要儀器:OLYMPUS熒光多功能顯微鏡(BX60,日本OLYMPUS公司)。制備抗原:取健康家兔坐骨神經(jīng)2g,剪碎,用超聲勻漿機制成勻漿,調(diào)整濃度為150g/L,置于一30℃冰箱備用。
2.EAN模型誘導(dǎo)?取大鼠,每只足墊下注射神經(jīng)勻漿與等量弗氏完全佐劑共0.5ml。基礎(chǔ)免疫后7天,用同樣方法及劑量加強免疫1次,連續(xù)觀察30天。
3.大鼠坐骨神經(jīng)病理學(xué)檢查?4組動物觀察30天后處死,速取其右側(cè)坐骨神經(jīng),放人10%甲醛溶液中固定。常規(guī)石蠟包埋切片,片厚6μm。再經(jīng)常規(guī)HE染色后,鏡檢并攝片。
【模型特點】
1.呈現(xiàn)大量炎癥細胞浸潤和脫髓鞘改變?神經(jīng)纖維和神經(jīng)外膜中均可見炎癥細胞浸潤灶,主要是淋巴細胞和巨噬細胞。
2.神經(jīng)纖維中見片狀分布的神經(jīng)纖維脫髓鞘病變?髓鞘呈節(jié)段性的腫脹、空泡化。有的部位可見裸露的軸索存在。
【注意事項】
1.基礎(chǔ)免疫后7天,必須用同樣方法及劑量再加強免疫1次。
2.模型成功的標準是神經(jīng)病理組織學(xué)檢查,重點檢查神經(jīng)纖維和外膜中炎癥細胞浸潤和脫髓鞘改變。
【應(yīng)用范圍】適用于EAN的發(fā)病機制,臨床表現(xiàn)、神經(jīng)病理學(xué)改變及電生理等研究。探討針刺、皮質(zhì)類激素對 EAN的治療作用,TNF、IL-4及Th1、Th2、Th3 細胞因子在 EAN發(fā)病中的作用。
【模型評估】該模型造模方法簡單易行,神經(jīng)病理學(xué)改變典型,建立的病理模型與人類吉蘭-巴雷綜合征(Guillain Barre syndrome,GES)的病理特征相類似,是世界公認的用于研究GBS的典型動物模型。
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