T7 RNA聚合酶/T7 RNA Polymerase的適用范圍
T7 RNA聚合酶是一種高度特異識(shí)別T7啟動(dòng)子序列的DNA依賴(lài)的5'→3' RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化單鏈或雙鏈DNA T7啟動(dòng)子下游NTP的摻入,合成與T7啟動(dòng)子下游的模板DNA互補(bǔ)的RNA。
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T7 RNA?聚合酶可以識(shí)別修飾的NTP,例如生物素標(biāo)記、地高辛標(biāo)記、熒光素標(biāo)記的NTP,可以用于各種標(biāo)記RNA的合成。同時(shí)對(duì)于T7啟動(dòng)子有高度的特異性。
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艾美捷T7 RNA聚合酶:
英文名字:T7 RNA Polymerase
貨號(hào):C-BSM0124
規(guī)格:5000 U / 25000 U
組成:T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer
純度:SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果大于95%。
核內(nèi)殘留物:將20 U T7 RNA聚合酶與超螺旋質(zhì)粒DNA在37°C下孵育4小時(shí),DNA電泳未檢測(cè)到質(zhì)粒的變化
殘留DNA酶:將T7 RNA聚合酶與雙鏈DNA在37°C下孵育16小時(shí),DNA電泳未檢測(cè)到DNA變化。
RNase殘基:將T7 RNA聚合酶與RNA在37°C下孵育1小時(shí),電泳中未檢測(cè)到RNA降解
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T7 RNA聚合酶適用范圍:
1.?合成單鏈?RNA,包括?mRNA,siRNA,gRNA?等各類(lèi)?RNA?的前體。
2.?合成標(biāo)記或未標(biāo)記的高特異性?RNA?探針。
3.?利用帽子類(lèi)似物合成加帽的?mRNA。
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T7 RNA聚合酶可分為:常規(guī)型和耐熱型。常規(guī)型T7 RNA聚合酶可在37℃對(duì)模板進(jìn)行高效體外轉(zhuǎn)錄,而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下(37-52℃)進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。
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T7 RNA聚合酶使用方法:

推薦的反應(yīng)條件:
在37°C下培養(yǎng)1小時(shí)。如果轉(zhuǎn)錄物長(zhǎng)度小于300nt,反應(yīng)時(shí)間可以延長(zhǎng)至2-16小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后,在上述20μl反應(yīng)混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶,并在37°C下孵育15分鐘以移動(dòng)DNA模板