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擬靶向質(zhì)譜定量技術(shù)小分子含量檢測

2023-03-09 11:29 作者:如期生物  | 我要投稿

一、實驗原理

靶向蛋白組學(xué)定量技術(shù)主要包括MRM(multiple reaction monitoring)和PRM(parallel reaction monitoring)。MRM也稱為SRM(selected reaction monitoring),使用三重四級桿質(zhì)譜(QQQ-MS)對符合目標(biāo)離子規(guī)則的信號進行采集,從而實現(xiàn)目標(biāo)蛋白質(zhì)的相對或絕對定量。PRM衍生于MRM,結(jié)合了四級桿的高選擇性以及Orbitrap的高分辨和高精度的特性,在對選定的母離子進行裂解后會測量所有的碎片離子,具有更好的檢測靈敏度和抗干擾能力。


靶向方法包檢測EIC圖


二、實驗介紹

一種高度靈敏的方法,能夠以高定量準(zhǔn)確度、精確度和特異性對復(fù)雜基質(zhì)中的數(shù)百個蛋白質(zhì)靶標(biāo)進行定量。通過LC-ESI-QQQ儀器檢測特定指標(biāo)的絕對、相對含量。其相比于高分辨率質(zhì)譜有更高的靈敏度及更好的重復(fù)性。

三、樣品要求

常見樣品包括細(xì)胞樣品、組織樣品和體液樣品。細(xì)胞樣品包括動物細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌、細(xì)菌等微生物細(xì)胞,組織樣品包括動物組織和植物組織,體液樣品包括血清、血漿和尿液等。此外,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的樣品可以是來自蛋白質(zhì)膠點、膠條、IP或Co-IP樣品、石蠟包埋樣品、外泌體、亞細(xì)胞等等。

四、檢測項目

常見檢測項目


五、注意事項

代謝檢測樣品收集過程非常關(guān)鍵,請按照公司樣品收樣建議收樣。特殊樣品及樣品量不足情況請?zhí)崆奥?lián)系公司技術(shù)咨詢??蛻魴z測特定指標(biāo),需要提供指標(biāo)的CAS號,以防止檢測錯誤。

六、實驗圖示例


定量譜圖



定量檢測標(biāo)曲


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