蛋白質(zhì)分離和鑒定技術(shù)
蛋白質(zhì)的分離和鑒定是蛋白質(zhì)組學研究中的重要內(nèi)容,蛋白質(zhì)分離是獲得蛋白樣本的重要來源,蛋白鑒定即對蛋白質(zhì)進行定性或定量等鑒定,兩者通常是前后相繼進行的。
理想的蛋白質(zhì)分離方法首先要具備超高的分辨率,能夠?qū)⒊汕先f種蛋白質(zhì)包括他們的修飾物同時分離并與后續(xù)的鑒定技術(shù)有效銜接,還應(yīng)對不同類型的蛋白質(zhì),包括酸性的、堿性的、疏水的、親水的等,均能有效的分離。常用的蛋白質(zhì)分離技術(shù)包括電泳技術(shù)(一維電泳、雙向電泳、熒光差異顯示凝膠電泳和毛細管電泳等)和色譜分離技術(shù)(液相色譜、離子交換色譜、親和色譜、反相色譜、尺寸排阻色譜等)。分離后的蛋白質(zhì)樣本可以進行后續(xù)鑒定,如分子質(zhì)量、氨基酸序列含量以及翻譯后修飾鑒定等,目前最常用的蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)是高分辨率、高靈敏度和高準確度的質(zhì)譜技術(shù)??傊鞍踪|(zhì)的分離和鑒定技術(shù)各不相同,蛋白質(zhì)分離技術(shù)在實
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