摘要

藥物制劑經(jīng)非口服途徑給藥，對(duì)給藥局部產(chǎn)生的毒性、刺激性和／或?qū)θ懋a(chǎn)生過敏性和溶血性等均屬于制劑安全性的范疇，是藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)的重要組成部分。藥物制劑安全性評(píng)價(jià)中經(jīng)常出現(xiàn)不規(guī)范或不符合指導(dǎo)原則等科學(xué)規(guī)范問題，無法為臨床試驗(yàn)和用藥提供足夠的非臨床安全性信息。本文結(jié)合審評(píng)工作中發(fā)現(xiàn)的相關(guān)問題進(jìn)行討論，以期為申請(qǐng)人及安評(píng)機(jī)構(gòu)在開展藥物制劑安全性評(píng)價(jià)時(shí)提供借鑒。

藥物制劑安全性試驗(yàn)又稱特殊安全性試驗(yàn)或局部安全性試驗(yàn)， 包括刺激性、過敏性及溶血性等試驗(yàn)，評(píng)價(jià)藥物在經(jīng)非口服給藥途徑下對(duì)用藥局部產(chǎn)生的毒性和／或?qū)θ懋a(chǎn)生的毒性，如眼、耳、鼻、舌 下、呼吸道、關(guān)節(jié)腔、皮膚、直腸、陰道、血管、肌肉、皮下和髓鞘等。藥物毒性來源主要包括藥物活性成分及其代謝物、輔料、雜質(zhì)及 pH 值、 滲透壓等制劑理化性質(zhì)，這些因素可引起刺激性和／或過敏性和／或溶血性的發(fā)生，因此藥物在臨床應(yīng)用前應(yīng)研究制劑在給藥部位使用后引起的局部和／或全身毒性，以提示臨床應(yīng)用時(shí)可能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)、毒性靶器官和安全范圍。

目前，藥物制劑安全性的研究指南主要為《 藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》(2014 年）[1] , 根據(jù)國外藥物研究評(píng)價(jià)的經(jīng)驗(yàn)積累，參考了國外相關(guān)技術(shù)指南，如美國國家食品藥品監(jiān)督管理局針對(duì)仿制透皮制劑產(chǎn)品皮膚刺激性及致敏性研究指南[2] 、光安全測(cè)試指南[3] 、新藥免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)指南[4] 、歐洲藥品管理局藥品非臨床局部測(cè)試指南[5] , 此外還參考了國際標(biāo)準(zhǔn)化組織關(guān)于醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)[6] 中關(guān)于刺激性和遲發(fā)過敏性反應(yīng)試驗(yàn)的相關(guān)研究策略 。同時(shí)，需要指出的是，該指導(dǎo)原則收載了試驗(yàn)方法的一般原則，具體評(píng)價(jià)中應(yīng)根據(jù)受試物的特點(diǎn)進(jìn)行合理設(shè)計(jì)。制劑安全性試驗(yàn)的評(píng)價(jià)工作或?qū)徳u(píng)過程，既有強(qiáng)制性要求，如藥物非臨床研究 質(zhì)量管理規(guī)范 ( good laboratory practice , GLP) [7] 的遵從性，也需要對(duì)一般試驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則的遵循，如試驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)施應(yīng)當(dāng)遵從試驗(yàn)研究的“ 隨機(jī)、對(duì)照、可重復(fù)”原則，根據(jù)受試物的特點(diǎn)，充分考慮和結(jié)合藥學(xué)、藥效學(xué)、其他毒理學(xué)及臨床擬定用法用量等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，體現(xiàn)整體性、綜合性的原則 。本文結(jié)合審評(píng)工作中發(fā)現(xiàn)的相關(guān)問題進(jìn)行討論，以期為申請(qǐng)人及安評(píng)機(jī)構(gòu)在開展藥物制劑安全性評(píng)價(jià)時(shí)提供借鑒。

一?制劑安全性研究開展的必要性

非口服給藥途徑的藥物一般均需獲得足夠的非臨床制劑安全性信息 。目前，仍有申請(qǐng)人忽視產(chǎn)品制劑安全性研究的重要性，審評(píng)中遇到未按照相關(guān)要求開展制劑安全性研究，或者未按指導(dǎo)原則的要求完成規(guī)范的制劑安全性研究，無法為后續(xù)的臨床試驗(yàn)或上市提供充分的制劑安全性風(fēng)險(xiǎn)提示，導(dǎo)致臨床試驗(yàn)申請(qǐng)或上市申請(qǐng)進(jìn)度受影響 。常忽視開展制劑安全性試驗(yàn)的藥物劑型包括陰道栓劑、直腸栓劑、舌下透皮吸收制劑、皮膚外用制劑等 。應(yīng)當(dāng)根據(jù)擬開發(fā)藥物制劑的自身特點(diǎn)考慮開展相關(guān)研究的必要性。

【 案例 1】 鹽酸多塞平口頰膜按化藥注冊(cè)分類 “ 2. 2 ”申報(bào)，系在美國批準(zhǔn)的低劑量鹽酸多塞平片基礎(chǔ)上的改良型藥物，將片劑改為口頰膜，申請(qǐng)適應(yīng)證相同，為用于治療睡眠維持困難的失眠癥 。申請(qǐng)人未開展制劑安全性研究，而口頰膜作為一種經(jīng)口腔給藥和吸收的制劑，具有潛在的口腔黏膜刺激性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)進(jìn)行口腔黏膜刺激性試驗(yàn)，為臨床試驗(yàn)提示相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)。

【 案例 2】 他達(dá)拉非口溶膜按化藥注冊(cè)分類 “2. 2 ”申報(bào)，口溶膜制劑學(xué)特性類似于口腔崩解片，不同于口含片、舌下含片，口腔局部存留時(shí)間較短，口腔黏膜幾乎不吸收，類似于口服制劑經(jīng)胃腸道吸收，故審評(píng)考慮可不要求提供該制劑口腔黏膜給藥的制劑安全性研究數(shù)據(jù)。

二?GLP 遵從性

《 中華人民共和國藥品管理法》(2019 年版）[8] 規(guī) 定“藥物的非臨床安全性評(píng)價(jià)研究機(jī)構(gòu)必須執(zhí)行藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范”。最新修訂的《 藥品注冊(cè)管理辦法》(2020 年版）[9] 也明確規(guī)定：藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究應(yīng)當(dāng)在經(jīng)過藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范認(rèn)證的機(jī)構(gòu)開展，并遵守 GLP 。藥物非臨床制劑安全性作為非臨床安全性的一部分，應(yīng)當(dāng)執(zhí)行 GLP 規(guī)范 [10] 。 目前，仍有少數(shù)制劑安全性試驗(yàn)在非 GLP 條 件下開展，不符合相關(guān)法律法規(guī)要求，也不利于試驗(yàn)質(zhì)量的保障。

三?制劑安全性評(píng)價(jià)關(guān)注點(diǎn)

3. 1 供試品分析

供試品分析揭示受試品的質(zhì)量和配制的準(zhǔn)確性， 為臨床前安全評(píng)價(jià)中發(fā)現(xiàn)的問題（ 如毒性與劑量關(guān)系等）提供可靠的科學(xué)參考 。如果供試品存在問題，安評(píng)的結(jié)果可能失去了技術(shù)評(píng)價(jià)的價(jià)值，甚至可能誤導(dǎo)新藥的后期開發(fā) 。因此，供試品檢測(cè)對(duì)于新藥安全性評(píng)價(jià)具有重要意義，應(yīng)該在安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)中進(jìn)行科學(xué)的供試品檢測(cè) 。例如，注射劑濃溶液或注射用粉針劑在使用前，應(yīng)當(dāng)根據(jù)臨床擬用的真實(shí)情況進(jìn)行配制，配制后需要開展供試品分析，以便在非臨床試驗(yàn)中正確使用 。若臨床擬用樣品為制劑原液，往往企業(yè)會(huì)向安評(píng)機(jī)構(gòu)提供其質(zhì)量檢驗(yàn)合格報(bào)告，表明相關(guān)供試品的檢測(cè)信息，不需要在安評(píng)機(jī)構(gòu)重新開展供試品分析 。一般來說，應(yīng)根據(jù)供試品的特性及具體毒理試驗(yàn)的要求在試驗(yàn)方案中確定誤差范圍，化學(xué)藥物配制后的溶液及混懸濃度與理論可接受誤差范圍為：溶液為 ± 10% , 混懸液為 ± 15% [11] 。生物技術(shù)藥物供試品分析的方法選擇和技術(shù)要求一般應(yīng)遵從 Case by case 的原則開展，如根據(jù)生物活性分析等方法進(jìn)行含量檢測(cè)。

除了供試品分析之外，用于非臨床安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的供試品質(zhì)量信息提供方面也存在一些影響安全性評(píng)估的問題，如供試品的重要信息缺失，供試品濃度和含量分析的方法學(xué)驗(yàn)證資料和配制后供試品質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果等 。另外，試驗(yàn)樣品制備工藝不成熟，可能導(dǎo)致不同批次的樣品質(zhì)量（ 含量、純度、雜質(zhì)、晶型等）不一致，進(jìn)而影響安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確、可靠 。更有甚者，試驗(yàn)單位未開展或未提供供試品分析報(bào)告，或者供試品分析報(bào)告顯示“不合格”，仍采用該試劑開展制劑安全性研究。

【 案例 3】 某氨茶堿注射液申報(bào)仿制藥一致性評(píng)價(jià)，用色譜法對(duì)配制的供試品及原研制劑低濃度制劑（ 質(zhì)量濃度 6. 25 mg · mL - 1 ) 進(jìn)行分析，無水茶堿測(cè)定濃度為理論濃度的 77 . 87% ~ 81 . 36% , 供試品配制 可能存在較大誤差，不符合供試品分析的相關(guān)要求 ( ± 10% ) 。

3. 2 試驗(yàn)動(dòng)物種屬選擇

動(dòng)物種屬的選擇應(yīng)當(dāng)根據(jù)解剖學(xué)、生理學(xué)、代謝反應(yīng)、遺傳學(xué)和免疫反應(yīng)來選擇特定研究需要的最合適的模型，同時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮觀察指標(biāo)和模型合理性確定，如皮膚刺激性試驗(yàn)應(yīng)選擇與人類皮膚結(jié)構(gòu)比較相近的動(dòng)物，如兔、小型豬等 。在涉及皮膚給藥途徑的藥物制劑安全性研究中，小型豬可能比任何其他動(dòng)物 模型更接近地模擬人類反應(yīng)，主要原因是其與人類在皮膚解剖學(xué)、生理學(xué)和生物化學(xué)方面具有相似性，具有大量人類共有的膜轉(zhuǎn)運(yùn)和酶蛋白質(zhì)，使得小型豬是理想的皮膚外用途徑生物醫(yī)學(xué)研究與開發(fā)中的轉(zhuǎn)化模型[12] 。

3. 3 制劑安全性研究的常見問題

制劑安全性研究的內(nèi)容一般包括刺激性、過敏性及溶血性試驗(yàn)，應(yīng)當(dāng)根據(jù)藥物臨床擬用情況合理設(shè)計(jì)試驗(yàn)中的給藥劑量、給藥濃度及給藥體積等關(guān)鍵性指標(biāo) 。例如，臨床使用中涉及不同藥物濃度的情況時(shí)， 應(yīng)當(dāng)采用臨床擬用最高濃度開展刺激性研究；多品規(guī)同時(shí)申報(bào)，應(yīng)當(dāng)考慮不同規(guī)格之間濃度一致性、是否僅為裝量的差異、輔料是否等比例等因素，針對(duì)多濃 度規(guī)格品種應(yīng)當(dāng)至少采用臨床使用最大濃度開展制劑安全性評(píng)價(jià)；對(duì)于一致性評(píng)價(jià)品種，還應(yīng)當(dāng)選擇相同品規(guī)的參比制劑平行開展對(duì)照研究，且參比制劑應(yīng)當(dāng)被國家局公布的《參比制劑目錄》收錄 ?，F(xiàn)以案例的形式，對(duì)申報(bào)資料中常見的具體試驗(yàn)問題進(jìn)行梳理。

3. 3. 1 試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量不足

在試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，動(dòng)物數(shù)量的確定需要考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物倫理“3R”原則( replacement , reduction , refinement ) , 同時(shí)也需要滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

【案例 4】 某葡萄糖酸鈣注射液的仿制品種，用 兔開展靜脈注射刺激性試驗(yàn)，試驗(yàn)選用健康日本大耳白兔 4 只(2 雌 2 雄），用同體左右側(cè)自身對(duì)照法，每只動(dòng)物右側(cè)耳緣靜脈給予供試品，左側(cè)耳緣靜脈給予同體積 5% 葡萄糖注射液，連續(xù)給藥，試驗(yàn)設(shè)置給藥期末及恢復(fù)期末剖檢時(shí)間點(diǎn)（ 各 1 雌 1 雄）。本試驗(yàn)設(shè)置動(dòng)物數(shù)量偏少，無法滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，在后續(xù)的觀察中可能存在對(duì)陽性結(jié)果分析的難度 。此類試驗(yàn)，一般應(yīng)當(dāng)考慮到給藥期末及恢復(fù)期末的 2 個(gè)解剖觀察時(shí)間點(diǎn)，應(yīng)保證每個(gè)剖檢時(shí)間點(diǎn)的動(dòng)物數(shù)據(jù)至少支持統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。

3. 3. 2 刺激性試驗(yàn)問題

刺激性是指非口服給藥制劑給藥后對(duì)給藥部位產(chǎn)生的可逆性炎癥反應(yīng)，一般應(yīng)選擇與臨床給藥相似的給藥部位，并觀察對(duì)可能接觸到受試物的周圍組織的影響，例如考察血管刺激性試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)對(duì)進(jìn)針點(diǎn)血管的近段、中段及遠(yuǎn)段的刺激性，同時(shí)可附帶肌肉刺激性考察；給藥濃度、劑量與體積的設(shè)置應(yīng)至少包括臨床擬用最高濃度，臨床靜脈滴注給藥刺激性試驗(yàn)可采用泵給藥；給藥頻率與周期應(yīng)根據(jù)臨床用藥情況，一般刺激性試驗(yàn)的給藥周期最長不超過 4 周，其中血管刺激性試驗(yàn)最長不超過 7 d;當(dāng)出現(xiàn)陽性結(jié)果時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)造成陽性結(jié)果的可能原因進(jìn)行分析。

制劑刺激性研究中常見的問題包括：未按照臨床擬用給藥方式、給藥頻率設(shè)計(jì)試驗(yàn)；臨床用法中存在多種給藥方式，未針對(duì)所有可能的給藥方式開展研究 。制劑安全性評(píng)價(jià)中，部分臨床擬用給藥方式在動(dòng)物中無法模擬或操作困難，如脊髓鞘內(nèi)、口腔黏膜、腦內(nèi)給藥等，可以考慮替代性研究方式 。對(duì)于給藥期末及恢復(fù)期的刺激性評(píng)估，需進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，檢查結(jié)果盡可能轉(zhuǎn)化為可量化指標(biāo)，如病變分級(jí)等，通常采用病變程度和發(fā)生率進(jìn)行評(píng)估 。 比較特殊的眼用制劑刺激性研究應(yīng)遵照相關(guān)指導(dǎo)原則的要求開展裂隙燈檢查。

【案例 5】 某一致性評(píng)價(jià)品種硫酸阿米卡星注射液，僅用參比制劑國外說明書臨床用法用量情況［ 在靜脈滴注的情況下，通常以 100 ~ 200 mg（ 效價(jià)） 的速度溶解在補(bǔ)液 100 ~ 500 mL 中，并在 30 ~ 60 min 內(nèi)給藥］擬定刺激性試驗(yàn)給藥濃度為 2 mg ·mL - 1 , 而參比制劑國內(nèi)現(xiàn)行說明書（ 肌內(nèi)注射或靜脈滴注給藥：當(dāng)靜脈內(nèi)給予時(shí)可以按每 500 mg 加入無菌稀釋劑 100 或 200 mL 來配制，如 0. 9% NaCl 或 5% 的葡萄糖注射液或其他合適的溶液）中臨床擬用最高濃度為 5 mg ·mL - 1 , 不符合指導(dǎo)原則的要求。

吸入方式給藥的制劑，包括粉霧劑、噴霧劑等劑 型，應(yīng)根據(jù)制劑自身的特點(diǎn)，盡可能模擬臨床給藥方式 。試驗(yàn)中應(yīng)采用符合試驗(yàn)動(dòng)物自身特點(diǎn)的吸入裝置或霧化裝置，并進(jìn)行充分的試驗(yàn)條件系統(tǒng)性驗(yàn)證（ 如氣溶膠質(zhì)量濃度、氣溶膠粒徑分布等），以獲取穩(wěn)定的氣溶膠或粉霧氣流，一般通過改變通氣時(shí)間的方法完成不同劑量組給藥，組織病理學(xué)檢查應(yīng)根據(jù)制劑藥效及藥代動(dòng)力學(xué)特征，選取呼吸道不同部位組織器官進(jìn)行病理學(xué)檢查。

【案例 6】 某噻托溴銨吸入粉霧劑，采用了經(jīng)口噴霧給藥的方式開展了制劑安全性試驗(yàn)，用兔經(jīng)口腔噴霧給藥方式，每天1 次，連續(xù)給藥 28 d , 未見對(duì)呼吸道給藥局部組織的刺激作用，審評(píng)認(rèn)為申請(qǐng)人所提供的局部安全性試驗(yàn)都不是吸入給藥，試驗(yàn)結(jié)果不能體現(xiàn)臨床擬給藥方式的制劑安全性特征，需補(bǔ)充吸入給藥途徑的制劑安全性試驗(yàn)資料。

【 案例 7】 某富馬酸福莫特羅吸入氣霧劑（混懸型），與已上市富馬酸福莫特羅吸入制劑（溶液型）相比，規(guī)格相當(dāng)，給藥途徑相同且作用機(jī)制一致，按化藥注冊(cè)分類“2. 2”申請(qǐng)臨床試驗(yàn)，制劑安全性試驗(yàn)用大鼠全身暴露給藥裝置，經(jīng)霧化吸入給藥 。申請(qǐng)人在分析該品種刺激性試驗(yàn)中，結(jié)合供試品在呼吸道局部及肺組織的暴露情況，并采用機(jī)構(gòu)歷史研究數(shù)據(jù)分析霧化吸入給藥與直接撳壓閥門吸入 2 種給藥途徑在呼吸道局部及肺組織的暴露差異較小，基本支持該品種橋接已上市制劑的藥理毒理數(shù)據(jù)。

3. 3. 3 過敏性試驗(yàn)問題

過敏性又稱超敏反應(yīng)，系機(jī)體受同一抗原再刺激后產(chǎn)生的一種表現(xiàn)為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反應(yīng) 。通常局部給藥發(fā)揮全身作用的藥物（如注射劑和透皮吸收劑等）需考察Ⅰ型過敏反應(yīng)，如phylaxis , ASA) 和被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)( passive cutaneous anaphylaxis , PCA) , 透皮吸收劑需進(jìn)行主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)( active cutaneous anaphylaxis , ACA) , 吸入途徑藥物用豚鼠吸入誘導(dǎo)和刺激試驗(yàn)，黏膜給藥應(yīng)結(jié)合受試物的特點(diǎn)參照經(jīng)皮給藥過敏性試驗(yàn)方法進(jìn)行 。因此，選擇開展何種過敏性試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)藥物特點(diǎn)、臨床適應(yīng)證、給藥方式、過敏反應(yīng)發(fā)生機(jī)制、影響因素等確定。

結(jié)合最常開展的主動(dòng)全身過敏反應(yīng)，試驗(yàn)結(jié)果與給予的致敏劑劑量，特別是激發(fā)劑量有較大關(guān)系，也與致敏的時(shí)間有一定關(guān)系，而與制劑的致敏濃度相關(guān)性略低。

值得關(guān)注的是，過敏性試驗(yàn)研究中常出現(xiàn)由于供試品毒性或特殊藥理作用較強(qiáng)而導(dǎo)致動(dòng)物死亡或其他嚴(yán)重異常表現(xiàn)，容易與過敏反應(yīng)混淆發(fā)生，無法清晰地識(shí)別過敏反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn) 。針對(duì)此類特殊情況，制劑過敏性試驗(yàn)的評(píng)價(jià)應(yīng)當(dāng)采用更為靈活的試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

【 案例 8】 某注射用頭孢替安仿制品，由于豚鼠對(duì)頭孢類藥物較為敏感，易產(chǎn)生消化道出血、壞死等毒性，在致敏期間動(dòng)物即因消化道毒性全部死亡，可考慮結(jié)合大鼠被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)進(jìn)一步評(píng)估過敏性。 此外，針對(duì)常見的細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物，也存在過敏試驗(yàn)中動(dòng)物死亡的問題，此類動(dòng)物死亡一般也可歸因于動(dòng)物對(duì)制劑毒性的不耐受，可能與過敏反應(yīng)相關(guān)性不大，但該類試驗(yàn)應(yīng)采用設(shè)置參比制劑平行對(duì)照試驗(yàn)的方法開展研究，同時(shí)申報(bào)資料中應(yīng)當(dāng)包括預(yù)試驗(yàn)研究信息，以支持劑量選擇的合理性。

另外，雖然動(dòng)物試驗(yàn)中的吸入給藥裝置難以完全模擬人體吸入給藥的暴露情況，但吸入制劑作為變應(yīng)原可能會(huì)激發(fā)機(jī)體呼吸道黏膜免疫，進(jìn)而由免疫球蛋白E( immunoglobulin E , IgE) 介導(dǎo)的Ⅰ型超敏反應(yīng)發(fā)生，易引起安全性風(fēng)險(xiǎn)，因此吸入制劑采用吸入給藥途徑進(jìn)行過敏性評(píng)估仍然具有必要性。

3. 3. 4 溶血性試驗(yàn)問題

溶血性是指藥物制劑引起的溶血和紅細(xì)胞凝聚等反應(yīng)，凡是注射劑和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反應(yīng)的其他局部用藥制劑均應(yīng)進(jìn)行溶血性試驗(yàn) 。溶血試驗(yàn)包括體外試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)，常規(guī)采用體外試管法評(píng)價(jià)藥物的溶血性，采用人血或兔血紅細(xì)胞懸液試驗(yàn)體系，供試品應(yīng)達(dá)到臨床擬用最高濃度，仿制藥一般應(yīng)采用參比制劑對(duì)照開展研究，對(duì)于試驗(yàn)陽性結(jié)果，應(yīng)當(dāng)結(jié)合動(dòng)物體內(nèi)毒理學(xué)研究觀察溶血反應(yīng)的有關(guān)指標(biāo)（ 如網(wǎng)織紅細(xì)胞、紅細(xì)胞數(shù)、膽紅素、尿蛋 白，腎、脾、肝繼發(fā)性改變等），如出現(xiàn)體內(nèi)溶血時(shí)，應(yīng)對(duì)制劑的溶血風(fēng)險(xiǎn)開展進(jìn)一步研究，與相同給藥途徑的上市制劑進(jìn)行比較研究，必要時(shí)進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)或結(jié)合重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)，應(yīng)對(duì)相關(guān)機(jī)制進(jìn)行探究， 并推斷與人體的相關(guān)性，以提示臨床風(fēng)險(xiǎn)。

3. 3. 5 制劑安全性研究結(jié)果分析與評(píng)價(jià)

制劑安全性研究結(jié)果分析中，應(yīng)詳細(xì)說明不同組別用藥情況、毒性反應(yīng)、持續(xù)時(shí)間、恢復(fù)情況及時(shí)間、死亡動(dòng)物數(shù)等關(guān)鍵信息，對(duì)不同劑量（ 或濃度）下某種反應(yīng)發(fā)生情況及嚴(yán)重程度進(jìn)行表述，分析毒性反應(yīng)的量效關(guān)系和可能的時(shí)效關(guān)系及可逆性，判斷藥物相關(guān)性，提供安全范圍等 。刺激性試驗(yàn)應(yīng)重視給藥濃度、 速度及次數(shù)等因素與結(jié)果的相關(guān)性分析，關(guān)注組織病理學(xué)檢查并提供相應(yīng)的圖片結(jié)果；過敏性試驗(yàn)應(yīng)注意給藥劑量和給藥速度對(duì)過敏反應(yīng)的影響；溶血性試驗(yàn)中，若出現(xiàn)紅細(xì)胞凝聚現(xiàn)象，應(yīng)判定是真凝聚還是假凝聚，若體外出現(xiàn)可疑溶血現(xiàn)象，應(yīng)采用其他方法進(jìn)一步評(píng)估，以確定或排除受試物的溶血作用 。此外， 制劑安全性試驗(yàn)結(jié)果往往存在多種不確定性，由于試驗(yàn)設(shè)計(jì)的問題（缺少參比對(duì)照）、試驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量（ 陰性對(duì)照組異常結(jié)果）等問題，導(dǎo)致對(duì)試驗(yàn)結(jié)果無法做出準(zhǔn)確的判斷。

【 案例 9】 某吸入用鹽酸氨溴索溶液按化學(xué)藥 品注冊(cè)分類“3 ”申報(bào)驗(yàn)證性臨床試驗(yàn)，用兔開展了制劑安全性試驗(yàn)，結(jié)果顯示：兔多次霧化吸入局部刺激 性試驗(yàn)中，陰性對(duì)照組動(dòng)物可見鼻甲、咽喉、氣管和肺及支氣管黏膜出現(xiàn)黏膜上皮變性、壞死、增生，以及黏膜炎細(xì)胞浸潤等炎癥反應(yīng)，出現(xiàn)的病理改變程度和比例明顯高于同類試驗(yàn)，提示現(xiàn)有的試驗(yàn)體系可能無法判斷動(dòng)物產(chǎn)生呼吸道癥狀是否與供試品刺激性相關(guān) ，審評(píng)認(rèn)為該試驗(yàn)體系尚不能滿足對(duì)吸入給藥局部刺激性的評(píng)價(jià) 。審評(píng)建議申請(qǐng)人結(jié)合已有非臨床試驗(yàn)結(jié)果、安評(píng)機(jī)構(gòu)背景數(shù)據(jù)、試驗(yàn)質(zhì)量控制等因素 ，分析吸入給藥局部刺激性試驗(yàn)結(jié)果中陰性對(duì)照組出現(xiàn)的病理改變程度和比例明顯偏高的原 因 ，選擇合適的試驗(yàn)體系重新開展該品種吸入給藥途徑的刺激性試驗(yàn)。

【案例 10】 某酒石酸阿福特羅霧化吸入用溶液按化藥注冊(cè)分類“3 ”申請(qǐng)驗(yàn)證性臨床試驗(yàn)，該品種設(shè)計(jì)開展的刺激性試驗(yàn)僅設(shè)置陰性對(duì)照組和供試品組， 供試品吸入途徑給藥可見輕度呼吸道黏膜刺激性，表現(xiàn)為肺血管周圍輕微混合炎性細(xì)胞浸潤、肺泡輕微巨 噬細(xì)胞聚集，鼻輕度急性炎癥，鑒于該品種吸入給藥出現(xiàn)呼吸道刺激性情況，而未設(shè)置恢復(fù)觀察期，也未設(shè)置參比制劑對(duì)照組，故無法判斷本品刺激性反應(yīng)的可逆性，也無法判斷刺激性反應(yīng)嚴(yán)重程度是否高于參比對(duì)照，應(yīng)當(dāng)重新開展規(guī)范設(shè)計(jì)的、與參比制劑對(duì)照進(jìn)行的刺激性試驗(yàn)。

【案例 11】 某德谷胰島素利拉魯肽注射液按生物類似物申報(bào)，溶媒對(duì)照組、自研品及原研對(duì)照組均可見高發(fā)生率的動(dòng)物臨床觀察異常表現(xiàn)（發(fā)抖、排糞、排尿現(xiàn)象），發(fā)生率分別為 100. 0% 或 91. 7% , 申請(qǐng)人判斷為“類過敏反應(yīng)”，而非過敏反應(yīng) 。為佐證判斷，試驗(yàn)人員在激發(fā)給藥階段，同時(shí)選擇健康未致敏動(dòng)物（每組 4 只）進(jìn)行激發(fā)試驗(yàn)，顯示出相似的異常表現(xiàn)為 “ 發(fā)抖、排糞、排尿等現(xiàn)象”，符合相關(guān)指導(dǎo)原則關(guān)于 “ 類致敏反應(yīng)”的判斷。

四?其他需要開展制劑安全性情形

除了上述討論的仿制藥申請(qǐng)（包括一致性評(píng)價(jià)產(chǎn)品）需要關(guān)注制劑安全性評(píng)價(jià)外，創(chuàng)新藥（包括改良新藥）、生物制品變更等也需要特別關(guān)注制劑安全性的評(píng)估。

4. 1 創(chuàng)新藥

創(chuàng)新藥的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)，一般需要提交全面的安全性評(píng)估資料 。在制劑安全性研究方面，可以單獨(dú)開展，也可以結(jié)合重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)數(shù)據(jù)開展，但伴隨毒理學(xué)開展的制劑安全性評(píng)價(jià)應(yīng)當(dāng)涵蓋制劑臨床最高擬用濃度，如無法達(dá)到制劑相關(guān)濃度要求，應(yīng)當(dāng)開展單獨(dú)的制劑安全性評(píng)估。

【案例 12】 某降糖藥按化藥注冊(cè)分類“ 1 ”申請(qǐng)臨床試驗(yàn)，同時(shí)在臨床試驗(yàn)期間新增制劑規(guī)格，原獲批臨床規(guī)格為 1. 5 mL/3 mg（質(zhì)量濃度 2 mg ·mL - 1 ) , 現(xiàn)申請(qǐng)新 增規(guī)格為 3 mL/30 mg（ 質(zhì)量濃度10 mg·mL - 1 ) , 僅新增一項(xiàng)單次給藥的刺激性試驗(yàn)，而已完成的多項(xiàng)重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)所用藥物濃度均遠(yuǎn)低于本次新增規(guī)格的濃度，無法評(píng)估新規(guī)格制劑多次給藥后的刺激性特征，臨床試驗(yàn)期間存在未知的安全性風(fēng)險(xiǎn)。

【案例 13】 某人源化免疫球蛋白 G ( immuno?globulin G , IgG) 1 亞型雙特異性抗體，系一種注射用粉針劑型，在食蟹猴重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中，伴隨觀察該雙抗靜脈給藥的局部刺激性，結(jié)果顯示，在不同劑量組，供試品溶液最高給藥質(zhì)量濃度僅為 3 mg ·mL - 1 , 未見輸注給藥相關(guān)的刺激性反應(yīng) 。同時(shí)，由于本品臨床用法用量未確定，而臨床試驗(yàn)給藥方案顯示，臨床試驗(yàn)期間最大給藥質(zhì)量濃度可能達(dá)到 5. 4 mg ·mL - 1 , 可能存在現(xiàn)有制劑安全性試驗(yàn)未提示的局部刺激性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)在臨床試驗(yàn)前采用臨床最大擬用濃度重新進(jìn)行局部刺激性試驗(yàn)，并根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果完善臨床試驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)控制計(jì)劃，確保受試者安全。

4. 2 改劑型產(chǎn)品

除了前述提及的 2 款口頰膜、口溶膜制劑等改良型新藥存在的問題，還有其他改劑型相關(guān)產(chǎn)品存在制劑安全性評(píng)價(jià)不足的問題。

【案例 14】 某丁苯酞注射液按化藥注冊(cè)分類 “2. 2”申報(bào)臨床試驗(yàn)，系由已上市的丁苯酞氯化鈉注射劑（大輸液，規(guī)格 100 mL/25 mg) 改成小容量注射劑（規(guī)格 5 mL/25 mg) , 申請(qǐng)人未針對(duì)小容量制劑開展制劑安全性研究，僅提供了原報(bào)大輸液制劑的研究資料作為參考，審評(píng)認(rèn)為雖然大輸液制劑與前期開發(fā)的丁苯酞氯化鈉注射液的活性成分、適應(yīng)證、給藥途徑、給藥方法、單次給藥劑量、主藥輔料廠家以及生產(chǎn) 工藝方面一致，但仍無法充分評(píng)估本次申報(bào)產(chǎn)品的制劑安全性特征，需要針對(duì)新報(bào)制劑開展制劑安全性研究。

4. 3 生物制品變更

生物制品的制劑安全性評(píng)價(jià)思路與化學(xué)藥品相似 。而生物制品制劑的變更，尤其是涉及中等以上變更，往往是風(fēng)險(xiǎn)更高的一類情況，例如生產(chǎn)場(chǎng)地變更、 生產(chǎn)規(guī)模變更、關(guān)鍵工藝控制及質(zhì)量控制參數(shù)變更等，往往均需要制劑安全性評(píng)估 。此外，由于生物制品制劑常含白蛋白成分，系常見的過敏原，可能會(huì)出現(xiàn)過敏性試驗(yàn)的陽性結(jié)果，應(yīng)當(dāng)結(jié)合制劑特點(diǎn)，綜合分析并提示臨床風(fēng)險(xiǎn)。

針對(duì)臨床試驗(yàn)期間的變更，一般遵從國際人用藥品注冊(cè)技術(shù)協(xié)調(diào)會(huì)( The International C ouncil for Har?monisation of Technical Requirements for Pharmaceuti?cals for Human U se , ICH) Q5E 指導(dǎo)原則的要求，結(jié)合生物制品在變更前后藥學(xué)的可比性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)， “ 如果生產(chǎn)商能通過本文件推薦的分析研究方法來保證可比性，產(chǎn)品可比性的確定可以僅以質(zhì)量研究為基礎(chǔ) 。當(dāng)質(zhì)量數(shù)據(jù)對(duì)確定可比性不充分時(shí)，恰當(dāng)?shù)厥菑姆桥R床或臨床研究中獲得補(bǔ)充證據(jù)”[13] 。但基于中國的藥品監(jiān)管實(shí)踐，生物制品的藥學(xué)變更（尤其是重大變更）所帶來的安全性風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于化學(xué)藥品的安全性風(fēng)險(xiǎn)，藥學(xué)比對(duì)研究往往無法作出“變更前后一致性”的結(jié)論，故需要非臨床安全性對(duì)比研究進(jìn)行的風(fēng)險(xiǎn)提示。

針對(duì)上市后生物制品制劑開展的變更，應(yīng)當(dāng)在藥學(xué)方面可比的基礎(chǔ)上，對(duì)于《 已上市生物制品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》[14] 中，分類定為重大變更的，均需提供制劑安全性數(shù)據(jù)，中等或微小變更，應(yīng)基于生物制品可比性研究結(jié)果綜合分析處理 。特別需要指出的是，如果變更后產(chǎn)品已在境外獲得批準(zhǔn)并用于人體，建議結(jié)合臨床安全性信息評(píng)估，可不再要求開展非臨床制劑安全性研究。

五?討論

藥物的非臨床安全性評(píng)價(jià)是基于風(fēng)險(xiǎn)的識(shí)別研究，而制劑安全性研究是非臨床安全性研究的重要組成部分 。我國藥品監(jiān)管部門一直關(guān)注藥物制劑安全性評(píng)價(jià)，其中非臨床制劑安全性評(píng)價(jià)是重要一部分。 美國食品藥品監(jiān)督管理局也于 2023 年 4 月發(fā)布了一份修訂指南草案[15] , 關(guān)注了仿制藥透皮和局部給藥 系統(tǒng)制劑刺激性和致敏性潛力的評(píng)估，以期為仿制藥 申請(qǐng)人臨床制劑安全性評(píng)價(jià)提供科學(xué)和清晰的研究思路。

藥物的制劑安全性研究，應(yīng)當(dāng)遵循藥物安全性評(píng)價(jià)的一般規(guī)律，結(jié)合藥物的制劑特點(diǎn)、藥理作用其他毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果，以及臨床信息等綜合分析和評(píng)價(jià)，以期全面真實(shí)地反映臨床用藥實(shí)際，為臨床用藥安全 提供風(fēng)險(xiǎn)控制信息，確保臨床用藥安全。

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