在做GPC測試時，科學(xué)指南針檢測平臺工作人員在與很多同學(xué)溝通中了解到，好多同學(xué)對GPC測試不太了解，針對此，科學(xué)指南針檢測平臺團(tuán)隊(duì)組織相關(guān)同事對網(wǎng)上海量知識進(jìn)行整理，希望可以幫助到科研圈的伙伴們；

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測試樣品要求

（1）樣品盡量純，而且必須可溶于GPC流動相。

（2）為了增加樣品的溶解，可輕微擾動（不要劇烈搖動或用超聲）

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GPC柱選擇

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對于GPC而言，選擇合適的色譜柱是成功分離的核心。從溶劑類型分，主要包括有機(jī)相色譜柱，水相色譜柱和蛋白質(zhì)色譜柱。

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最常用的有機(jī)相色譜柱常用的填料基質(zhì)是苯乙烯和二乙烯苯的共聚物，一般以懸浮聚合或分散聚合方式制成苯乙烯-乙烯基苯多孔微球，以致孔劑制出所需孔徑和孔容。這類凝膠的特點(diǎn)是孔徑分布比較寬，分子量分離范圍比較大，且柱效高。主要用于非極性有機(jī)溶劑，丙酮、乙醇一類極性溶劑不能應(yīng)用。在有機(jī)溶劑中，有機(jī)凝膠通常都處于溶脹狀態(tài)對不同的溶劑溶脹因子各不相同，因此不能在柱中直接更換溶劑，進(jìn)樣時也不能帶進(jìn)大量不良溶劑和空氣。

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蛋白質(zhì)的填料柱主要分為兩種，氧化硅和纖維素凝膠。氧化硅基質(zhì)填料的有點(diǎn)是硬度較高，分辨率較高，耐壓性較號，可以使用較高流速。纖維素凝膠填料的優(yōu)點(diǎn)是用途廣泛，甚者可以同時分離蛋白和某些高分子的混合物，如PEG和蛋白，但是硬度較低，流出物較多，建議在低流速下使用。

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流動相選擇

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做GPC檢測時首先要考慮被測樣品的溶解情況，以此確定流動相，還要考慮柱子的測試范圍，應(yīng)使被測物分子量落在柱子的分子量-淋出曲線線性部分之內(nèi)，若柱子范圍太窄則可考慮將不同規(guī)格的柱子串聯(lián)使用。

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對于適用于GPC儀器的每一根柱子都會配有詳細(xì)的使用說明，使用之前應(yīng)認(rèn)真閱讀，嚴(yán)格遵從，特別值得注意的是嚴(yán)禁超壓（超流量），否則會降低柱效、損毀柱子。如Shim-pack GPC-800系列柱，對于填充溶劑為THF型或者氯仿型能使用其他的洗提液如甲苯、亞甲基氯化物替換，而對填充溶劑為DMF型的GPC柱，流動相不能被其他洗提液替代。

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通常流動相溶劑類型的改變應(yīng)當(dāng)在流速不超過0.5 mL/min時候進(jìn)行，且對于同一根柱最好只使用單一類型的溶劑，頻繁的改變流動相類型會縮短柱的壽命，而GPC儀器柱的價格昂貴，通常上萬元一根。流動相溶劑最好是色譜級，否則需用孔徑為0.2~0.45μm的膜過濾。

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