worthington組織解離方法丨用 95% O 2 :5% CO 2平衡
艾美捷worthington組織解離方法多且全,主要包括以下幾個(gè)方面:
·方法和材料
·使用酶
·基本原代細(xì)胞分離
·95%O 2 :5%CO 2平衡
·研磨
·酶促細(xì)胞收獲
·細(xì)胞粘附和收獲
·用于細(xì)胞收獲的胰蛋白酶
·細(xì)胞釋放程序
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接下來一起來看看worthington組織解離的方法和材料:用?95% O?2?:5% CO?2平衡。
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在許多細(xì)胞分離程序中,對(duì)于解離過程中組織的存活來說,培養(yǎng)介質(zhì)在生理?pH?值下既要充氧又要緩沖是很重要的。當(dāng)培養(yǎng)基與?95%O?2?:5%CO?2平衡時(shí),這兩個(gè)要求都得到了滿足。幾種平衡鹽溶液含有對(duì)?pH?值敏感的指示劑染料酚紅。當(dāng)它呈紅色或紫色時(shí),介質(zhì)太堿性。當(dāng)將組織置于解離酶溶液中時(shí),有時(shí)會(huì)發(fā)生這種情況。孵育前通常需要用?O?2?:CO?2重新平衡。
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氣體不應(yīng)直接鼓入任何含有蛋白質(zhì)的溶液中。這會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)起泡和變性,失去生物活性。氣體可通過?0.22?微米膜過濾器或通過無菌纖維塞(例如無菌巴斯德或容量移液管中的棉塞)進(jìn)行消毒。在混合溶液的同時(shí),使O?2?:CO?2連續(xù)通過液體上方的空間,直到顏色指示?pH?值為?7.2-7.4。平衡鹽溶液通常預(yù)先充氣,但每次打開瓶子時(shí)都應(yīng)使用無菌O?2?:CO?2進(jìn)行平衡。
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無論氧化/碳酸化程度如何,緩沖平衡鹽溶液通常會(huì)保持恒定的?pH?值,因此更容易使用。某些細(xì)胞類型可能對(duì)特定的緩沖鹽敏感。參考表可用于為特定應(yīng)用選擇合適的平衡鹽溶液、緩沖液或解離介質(zhì)。

艾美捷worthington組織表(參考,按組織類型和物種分組)?
脂肪/脂肪?腎上腺?骨?腦
軟骨?冒號(hào)?內(nèi)皮?上皮
眼睛?心?腸?腎
肝?肺?淋巴結(jié)?乳腺
各種各樣的?肌肉?神經(jīng)?胰腺
腮腺?垂體?前列腺?生殖
秤?皮膚?脾?干
胸腺?甲狀腺/甲狀旁腺?扁桃體?瘤
注意:Worthington并未將列出的參考文獻(xiàn)僅限于那些使用?Worthington?酶的論文。一般而言,Worthington?提供的組織解離酶可互換用于所引用的大多數(shù)制劑。
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Worthington專注于高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。其核心酶產(chǎn)品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。