支原體感染可引起人類的多種疾病，如呼吸道感染、關(guān)節(jié)炎和泌尿生殖道疾病等。研究表明，支原體可引起宿主細(xì)胞凋亡，并與疾病的發(fā)生發(fā)展過程有關(guān)。

支原體感染與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切，不同種類的支原體引起的細(xì)胞凋亡在疾病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中作用也不同。支原體感染細(xì)胞后，可直接誘導(dǎo)凋亡，亦可通過局部細(xì)胞因子或其他物質(zhì)間接誘導(dǎo)凋亡。

因此，研究支原體與細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系，對闡明支原體致病機(jī)理和臨床上疾病的治療至關(guān)重要。

◆◆支原體◆◆

支原體種類繁多、分布廣泛，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體污染率高達(dá)30%-60%，隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，組織、細(xì)胞、疫苗等受支原體污染的現(xiàn)象越來越普遍。細(xì)胞受支原體污染一般難以察覺，而支原體又可以通過細(xì)胞濾膜，因此難以去除，是細(xì)胞培養(yǎng)面臨的一個世界性難題。

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支原體的檢測方法

目前，支原體的檢測方法有很多種，包括培養(yǎng)法、DNA 熒光染色法、酶法、PCR 法、ELISA 法、間接免疫熒光試驗(yàn)、生化檢測法、直接血凝試驗(yàn)、探針法、放射自顯影法等，每種方法各有利弊。傳統(tǒng)的支原體檢測方法通常耗時(shí)長，操作繁瑣，環(huán)節(jié)多，因此，選擇快速、準(zhǔn)確、有效的檢測方法對控制原材料、細(xì)胞、生物制品的支原體污染十分重要。

現(xiàn)有一款現(xiàn)成的支原體檢測試劑盒，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，可快速、靈敏、有效的檢測支原體。

普健生物生產(chǎn)的支原體PCR檢測試劑盒是一款具有快速、靈敏、特異性高等特點(diǎn)的支原體檢測試劑盒，可用于細(xì)胞、培養(yǎng)基、動物血清等的支原體檢測。本產(chǎn)品通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（PCR）特異擴(kuò)增支原體16s rRNA 基因保守區(qū)域片段，進(jìn)行支原體檢測，能夠檢測包括M. arthritidis，M. hominis，M. hyorhinis，M. fermentans，M. orale，M. salivarium，M. bovis，M. bovigenitalium，M.pneumoniae，M. pirum等在內(nèi)的數(shù)十種常見支原體。

談完了支原體，現(xiàn)在我們來談?wù)劶?xì)胞凋亡這回事。

◆◆細(xì)胞凋亡◆◆

細(xì)胞凋亡（Apoptosis）是Kerr在1972年提出的，一般是指機(jī)體細(xì)胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下，通過基因調(diào)控的一種程序性細(xì)胞死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞生長、分化、消亡以及機(jī)體許多生理、病理過程有關(guān)。

細(xì)胞凋亡過程中，細(xì)胞的形態(tài)變化是特有的，表現(xiàn)為：細(xì)胞核固縮、染色質(zhì)凝聚、胞漿濃縮，核染色質(zhì)密度增高，凋亡小體形成，細(xì)胞核染色質(zhì)DNA被降解為180~200bp寡核苷酸片段，在瓊脂糖凝膠電泳中呈典型的梯狀條帶（曾被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡判定的金標(biāo)準(zhǔn)之一）。

但是這種方法既不能檢測單個細(xì)胞水平的凋亡，又不能提供細(xì)胞發(fā)生凋亡所處的組織位置和細(xì)胞分化狀態(tài)等方面的信息。

有問題就有解決方法——TUNEL法

TUNEL法：由脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。細(xì)胞凋亡晚期，染色體DNA雙鏈或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）的作用下，將熒光素/酶標(biāo)記的dUTP結(jié)合到DNA的3-OH末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測。

普健生物自產(chǎn)的TUNEL細(xì)胞凋亡試劑盒（Fluorescein-12），經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)、重重把關(guān)，現(xiàn)已行走于江湖。一起看一下，它能不能經(jīng)受住考驗(yàn)吧。

試劑盒優(yōu)點(diǎn)

1. 靈敏度高

背景染色極低，陽性染色強(qiáng)，可以在單個細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡。同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。

2. 特異性好

TUNEL檢測時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞，也不會檢測出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)，既可以把凋亡和壞死區(qū)分開，也不會把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。

注意：極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，最好同時(shí)檢測多個凋亡指標(biāo)。

3. 快速方便

只需將固定好的細(xì)胞或組織經(jīng)染色及洗滌后，即可置于熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞儀下進(jìn)行凋亡檢測，整個實(shí)驗(yàn)操作僅需1-2小時(shí)即可完成。

4. 應(yīng)用范圍廣

可以用于檢測冷凍切片或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

5. 靈活

適于固定的細(xì)胞和組織，可以使樣品收集、儲存和運(yùn)輸成為可能。

6. 質(zhì)優(yōu)

每一批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)檢。

詳情可點(diǎn)擊?TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

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