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Acti-stain 555鬼筆環(huán)肽,有何生物用途?

2021-07-12 17:26 作者:艾美捷  | 我要投稿

Phalloidin是蘑菇鵝膏菌中的一種七個(gè)氨基酸的肽毒素,它與肌動(dòng)蛋白(F-actin)的聚合形式特異性結(jié)合并具有高親和力(kd20nm)。Phalloidin將肌動(dòng)蛋白聚合的臨界濃度降低到1μg/ml以下,從而起到聚合促進(jìn)劑的作用。Phalloidin已經(jīng)用一種專有的紅色熒光染料標(biāo)記,它可以用來染色組織培養(yǎng)細(xì)胞和組織切片中的肌動(dòng)蛋白絲(1,見圖1)?以及無細(xì)胞制劑?;钚匀旧??555陰莖環(huán)素標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲保留了未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白的許多功能特性,包括它們與肌球蛋白相互作用的能力。肌動(dòng)蛋白染色??555 phalloidin以紅色固體形式提供。

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3T3細(xì)胞Rho活化,細(xì)胞核用Dapi(藍(lán)色)染色,F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白用Acti染色??555(紅色F-肌動(dòng)蛋白,Cat.#PHDH1-A)。


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Acti染色的吸光度和熒光掃描? 將標(biāo)記的鬼筆苷稀釋到甲醇中,分別在300-750和560-750nm之間掃描其吸光度和激發(fā)光譜。吸收峰在560nm處,熒光峰在575nm處。

Acti-stain 555鬼筆環(huán)肽用途:

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1.固定組織切片和組織培養(yǎng)細(xì)胞制備中肌動(dòng)蛋白絲的熒光染色。注:與許多肌動(dòng)蛋白抗體不同,Acti染色??555 phalloidin僅與F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合,導(dǎo)致低背景熒光。此外,肌動(dòng)蛋白染色并沒有明顯的不同物種。

2.穩(wěn)定熒光肌動(dòng)蛋白絲的體外制備。

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肌動(dòng)蛋白染色對(duì)確定活細(xì)胞和固定細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)和功能非常有用。肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架在活細(xì)胞中是一個(gè)非常動(dòng)態(tài)和不穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),但它可以在探測(cè)或染色肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)之前用多聚甲醛固定。


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