轉(zhuǎn)染——是指將外源基因如DNA、RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來越廣泛。

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目前常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有以下幾種：

1、化學(xué)介導(dǎo)法：

（1）陽離子脂質(zhì)體：脂質(zhì)體是一種人工的脂雙層膜?？梢詫NA包裹到親水性核心內(nèi)部，也可將其絡(luò)合到磷脂片層。

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（2）陽離子聚合物：帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。陽離子聚合物和陽離子脂質(zhì)體最大的區(qū)別在于陽離子聚合物不含疏水部分而完全溶于水，可以方便地進(jìn)行化學(xué)修飾，且不會像脂質(zhì)體一樣破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，所以相對毒性較低。

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（3）非脂質(zhì)體的脂質(zhì)（Non-liposomal lipids）：脂質(zhì)體技術(shù)的未來發(fā)展方向——革新配方成分形成膠束結(jié)構(gòu)而非簡單的雙層膜結(jié)構(gòu)，令核酸傳遞更有效率而且細(xì)胞毒性也顯著降低。能夠轉(zhuǎn)染各種貼壁細(xì)胞，也可用于懸浮細(xì)胞，毒性較陽離子脂質(zhì)體更小。

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2、物理介導(dǎo)法：

電轉(zhuǎn)染：也叫細(xì)胞電穿孔?(electroporation)，在瞬間強(qiáng)大電場的作用下，溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜被破壞，通透性增高，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。電場使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近，隨后細(xì)胞本身的機(jī)制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處。傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方式很難轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞，這種情況下電轉(zhuǎn)染就能夠從根本上解決此問題，無論是原代細(xì)胞、干細(xì)胞、還是難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，都可以重復(fù)出很高的轉(zhuǎn)染效率。

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Lonza電轉(zhuǎn)儀：

3、生物介導(dǎo)法：

病毒介導(dǎo)法：對于上述幾種方式都不能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，可采用病毒轉(zhuǎn)染。病毒介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染效率特別高，尤其是針對難以轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞、活體細(xì)胞。病毒轉(zhuǎn)染主要包括以下幾個步驟：構(gòu)建載體、包裝提純病毒以及感染靶細(xì)胞

目前，腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒載體已廣泛用于哺乳動物細(xì)胞體內(nèi)外的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中。以慢病毒為例，其包裝系統(tǒng)由兩部分組成，即包裝成分和載體成分。將包裝成分與載體成分的多個質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞，即可在細(xì)胞上清中收獲攜帶目的基因的復(fù)制缺陷型慢病毒載體顆粒。包裝好的假病毒顆?？梢灾苯佑糜谒拗骷?xì)胞的感染，目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后，經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄，整合到基因組，從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。

不同病毒載體形式對比：

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