Tof測蛋白質(zhì)的重鏈和輕鏈
蛋白質(zhì)的重鏈和輕鏈?zhǔn)轻槍γ庖叩鞍准纯贵w蛋白而言的,抗體蛋白由兩條輕鏈(Light chain,L鏈)和兩條重鏈(Heavy chain,H鏈)組成。L鏈大約由200個左右的氨基酸組成,分子質(zhì)量大約在24kD左右;H鏈的氨基酸數(shù)量和相對分子質(zhì)量大約為L鏈的兩倍??贵w的特異性主要由H鏈決定,不同的氨基酸組成、種類、數(shù)量和排列方式以及二硫鍵的位置和數(shù)量等導(dǎo)致其抗原性也不同。
抗體蛋白氨基酸組成以及排列順序等對闡明其抗原性具有重要意義,也為其人工合成提供了現(xiàn)實依據(jù)。質(zhì)譜技術(shù)是目前公認(rèn)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析技術(shù),其優(yōu)越的分辨率、靈敏度以及準(zhǔn)確性使得其在各種蛋白分析如定性定量鑒定、氨基酸序列鑒定以及結(jié)構(gòu)鑒定等中廣泛運用。飛行時間(Time of light,TOF)檢測器是質(zhì)譜分析中的質(zhì)量分析器,被離子化的抗體蛋白樣品通過TOF檢測得到來自重鏈和輕鏈的肽段離子的質(zhì)荷比(m/z),通過與理論數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)進行比對可以對肽段離子進行定性鑒定,再通過拼接可以實現(xiàn)整個抗體蛋白的鑒定以及重鏈和輕鏈的氨基酸序列鑒定。
百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀結(jié)合Nano-LC,提供基于TOF的抗體蛋白測序服務(wù)技術(shù)包裹,適用于不同亞型抗體(例如IgG和IgM)和不同類型抗體(熒光偶聯(lián)抗體,固定化抗體,不同物種的抗體)的序列分析,包括抗體全長序列和可變區(qū)氨基酸序列分析等,以獲取抗體的輕鏈和重鏈的完整序列信息,歡迎免費咨詢。