特點(diǎn)和基本操作丨艾美捷Fluorochrome Ki67抗體
Ki67是正在進(jìn)行的細(xì)胞增殖的內(nèi)在標(biāo)志物,存在于細(xì)胞周期的所有活性階段(G1-M)。這種抗體是多克隆的,在兔體內(nèi)被培養(yǎng)成人肽序列TPKEKAQALEDLAGFKLFQT,該序列在注射到兔體內(nèi)之前通過(guò)戊二醛與甲狀腺球蛋白偶聯(lián)。該抗體已用于大鼠和人腦組織的免疫細(xì)胞化學(xué)。
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Fluorochrome?Ki67抗體(FC40001)基參:
中文名稱:Ki67抗體
英文名字:Ki67 Antibody-W
規(guī)格:200ul
應(yīng)用類型:IHC
免疫原:該抗體是多克隆抗體,在兔體內(nèi)針對(duì)人肽序列TPKEKAQALEDLAGFKELFQT產(chǎn)生
來(lái)源宿主:兔
反應(yīng)性:人,大鼠
保存建議:小瓶中含有約200微升1/100稀釋液。 抗體可在BSA稀釋液(50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中進(jìn)一步稀釋至至少1/20,000。 抗體應(yīng)在-20 ℃下儲(chǔ)存。 還包括吸附有用于封閉的特異性肽的濾紙。 可向管中加入500 μ l稀釋的抗體以獲得10 μ M阻斷。 應(yīng)用于組織前,在室溫(RT)下孵育至少1小時(shí)。 抗體特異性地與該肽阻斷,而不與吸附在濾紙上的其他肽阻斷。
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艾美捷Fluorochrome?Ki67抗體(FC40001)特點(diǎn):
各批次間結(jié)果一致且可重復(fù)
采用重組技術(shù),可實(shí)現(xiàn)快速生產(chǎn)
經(jīng)過(guò)大量驗(yàn)證確認(rèn)了特異性
不含動(dòng)物成分
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Fluorochrome?Ki67抗體(FC40001)基本操作:
新鮮冷凍的10-30微米切片在室溫下在4%多聚甲醛(FA)中固定1小時(shí),在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中洗滌,然后在90%的溫度下在10%檸檬酸鈉中處理40分鐘。將切片在檸檬酸鈉溶液中冷卻20分鐘,在PBS中洗滌,并用PBS中的0.1-0.3%H2O2孵育10至30分鐘。再次在PBS中洗滌組織,然后用Avidin/Biotin阻斷試劑盒(Vector cat#SP-2001)處理,在RT下洗滌并用BSA稀釋劑孵育1小時(shí)。在RT下將Ki67抗體(1/20000)施加到組織上過(guò)夜。在PBS洗滌后,將切片在生物素化GAR中以1/1000(Vector labs cat#BA1000)在RT下孵育1個(gè)小時(shí),洗滌,然后在阿維丁/生物素(Avidin/Biotin)中以1/1000(Vector labs cat#PK6100)在室溫下孵育1小時(shí)。洗滌后,用二氨基聯(lián)苯胺(0.04%)在0.1M乙酸鈉中與0.06%H2O2混合六分鐘(也可以加入2.5%的氯化鎳)觀察信號(hào)。然后對(duì)切片進(jìn)行水洗(如果需要,進(jìn)行復(fù)染)、脫水并蓋上蓋子。
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該抗體也適用于Fluorochrome的BRDU抗體可視化方案??梢允褂?%FA灌注組織代替新鮮冷凍切片。
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Ki67抗體(FC40001)出版物:
Perez et al, The Journal of Neuroscience, May 13, 2009:29(19):6379-6387
Garcia-Fuster et al, in preparation: Individual differences in adult hippocampal neurogensis following experimenter administration of cocaine.
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艾美捷科技是Fluorochrome的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。