HPV還不能進(jìn)行體外病毒培養(yǎng)，組織切片或細(xì)胞涂片后染色鏡檢方法的靈敏度也比較低，而臨床常用于其他病原體檢測的血清學(xué)方法對于診斷HPV感染來說結(jié)果也并不可靠。目前臨床上直接或間接檢測HPV的手段主要包括以下幾個(gè)方面：一是組織活檢，通過細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變來判斷。典型的改變是表皮細(xì)胞核周空泡等。也可以進(jìn)一步進(jìn)行免疫組化檢測，準(zhǔn)確性較高，但由于是有創(chuàng)傷的操作，取材麻煩，實(shí)際應(yīng)用相對不多。二是液基細(xì)胞學(xué)檢測(TCT)，TCT在一定程度上也可以檢測HPV感染的存在，不過與分子生物學(xué)檢測的方法比較，敏感性較差。三是依賴于分子生物學(xué)技術(shù)手段對HPV DNA進(jìn)行檢測，包括核酸雜交和PCR方法等，根據(jù)具體的方法，可以對HPV進(jìn)行定量檢測和分型檢測。這些方法包括傳統(tǒng)雜交法、雜交捕獲法、PCR法等。下面簡單介紹一下分子生物學(xué)方法。

　　一、傳統(tǒng)雜交法

　　特異度高、直觀等優(yōu)點(diǎn)，但操作復(fù)雜，靈敏度較PCR法低，而且需要新鮮組織樣本，不便于臨床推廣。

　　二、雜交捕獲法

　　由美國Digene公司生產(chǎn)的第二代雜交捕獲法HybridCaptureⅡSystems(HC2)是一種液相雜交法，是目前為一被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的HPV DNA檢測技術(shù)，它能同時(shí)檢測出13種高危型型病毒(HPVl6、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)和5種低危型病毒(6、11、42、43、44)。雖然美國CDC批準(zhǔn)了HC2檢測低危型，但目前國內(nèi)的試劑只能檢測高危型。HC2高危型檢測靈敏度較好、重復(fù)性高，但其缺點(diǎn)在于不能確定具體HPV亞型，且檢測成本昂貴，在經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)很難推廣。另外，HC2還存在一定的交叉雜交的問題，有時(shí)會引起假陽性結(jié)果。

　　HC2檢測是目前臨床高危型HPV檢測領(lǐng)域很重要，很常用的方法，也是宮頸癌篩查的手選方法。HC2統(tǒng)一的臨床判定標(biāo)準(zhǔn)≥/ml(相當(dāng)于5000病毒拷貝/次)。需要特別指出，HC2 HPVDNA檢測結(jié)果陰性并不代表完全沒有感染HPV，只是代表其體內(nèi)HPV含量低于5000拷貝/次。病毒含量低于該水平，則在至少3-5年內(nèi)發(fā)生宮頸上皮瘤變CIN2/3級病變的可能性是非常低的。也就是說，罹患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)是非常低的。若檢測結(jié)果為陽性， HC2 HPV DNA≥/ml(5000copies/ml)，則應(yīng)當(dāng)每年定期進(jìn)行HC2復(fù)查，若連續(xù)兩年檢測結(jié)果陽性，應(yīng)咨詢醫(yī)生進(jìn)行下一步檢查或治療，年齡大于30歲女性更應(yīng)密切監(jiān)測。宮頸癌手術(shù)后的病人監(jiān)測HC2可預(yù)測病變惡化或手術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

　　三、PCR法

　　以PCR為基礎(chǔ)的檢測方法是目前認(rèn)為較好的HPV DNA檢測及分型方法，主要分為基因擴(kuò)增和產(chǎn)物分析兩部分。它能用于HPV定性及半定量檢測、DNA測序和基因突變分析。

　　1、PCR基因擴(kuò)增

　　包括通用引物PCR(GP-PCR)、型特異性PCR(TS-PCR)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RQ-PCR)等方法。

　　2、PCR產(chǎn)物分析

　　包括基因芯片(也稱DNA芯片)法、限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP)、測序法和雜交分析法等?；蛐酒蛇M(jìn)行HPV分型及診斷混合感染，且具有通量大、高敏感性和特異性的特點(diǎn)，可用于大范圍篩查，更適于流行病學(xué)的調(diào)查和疫苗方面的研究。

　　男性檢測HPV也是有重要意義的，研究顯示有多個(gè)性伴侶的男性是高危型和低危型HPV的“運(yùn)載工具”。男性感染高危型HPV主要是亞臨床感染。以往檢測男性HPV感染是通過陰莖灌洗液或精液檢測HPV DNA，但存在取材的困難、檢測手段的敏感性低、實(shí)驗(yàn)程序復(fù)雜，缺乏正常對照等缺點(diǎn)。

　　目前臨床上對于HPV的檢測還沒有既能分型又能定量，既非常準(zhǔn)確又價(jià)格便宜的方法，為了解決這個(gè)問題，一是根據(jù)不同的目的進(jìn)行不同的檢測，一是傾向于聯(lián)合應(yīng)用，例如，液基細(xì)胞學(xué)檢測(TCT)聯(lián)合細(xì)胞HC2檢測、或者基因芯片進(jìn)行篩查后，進(jìn)行HC2半定量檢測等。另外，性伴同時(shí)進(jìn)行檢測，無論對HPV低危型引起的尖銳濕疣，還是HPV高危型引起的宮頸癌等疾病，都有重要意義。