PKH26紅色熒光細(xì)胞鏈接試劑盒操作注意事項(xiàng)
PKH26熒光細(xì)胞連接試劑盒采膜標(biāo)記技術(shù),能夠?qū)в休^長(zhǎng)脂質(zhì)尾巴的??-橙?熒光染料結(jié)合到細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)域上。染??式依賴于細(xì)胞與膜的類型,主要?于細(xì)胞體外標(biāo)記、體外細(xì)胞增殖研究及體內(nèi)外細(xì)胞示蹤研究。
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艾美捷?Biogradetech?PKH26紅色熒光細(xì)胞鏈接試劑盒:
中文名稱:PKH26紅色熒光細(xì)胞鏈接試劑盒
英文名字:PKH26 Cell Linker Kit
Biogradetech貨號(hào):B-CHK104-0.1mL
規(guī)格:0.1mL
保存建議:PKH26紅色熒光細(xì)胞鏈接試劑盒室溫保存
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試劑盒提供染?過(guò)程所需溶劑(稀釋液),該溶劑可以可以在染?過(guò)程中,增加染料溶解度和染?效率,同時(shí)維持細(xì)胞活?。稀釋液與哺乳動(dòng)物細(xì)胞等滲,不含去垢劑或有機(jī)溶劑,也不含?理鹽?和緩沖鹽。根據(jù)細(xì)胞類型及標(biāo)記后細(xì)胞膜內(nèi)在的變化,標(biāo)記后的細(xì)胞表?會(huì)由均?透亮變得有點(diǎn)狀凸起或補(bǔ)丁狀。但在?理范圍內(nèi),PKH26熒光不受pH的影響,每個(gè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度與染料標(biāo)記位置?關(guān)。PKH26?熒光穩(wěn)定性強(qiáng),在??-橙?區(qū)域(λex=551nm,?λem=567nm),可?來(lái)標(biāo)記追蹤體內(nèi)外多種細(xì)胞。在細(xì)胞毒性分析,熒光蛋?、抗體或?DNA?染料在該區(qū)域發(fā)出的紫?、綠?、紅?和遠(yuǎn)紅外等,不會(huì)與?PKH26?產(chǎn)??擾。

組份:
PKH26?染料:0.1ml?稀釋液:10ml
儲(chǔ)存條件:
避光冷藏,?前檢查結(jié)晶,如有結(jié)晶需在?37℃?浴溶晶。因在?醇中貯藏,所以要蓋緊防揮發(fā)。稀釋液?C:常溫或冰箱保存,?防腐劑和抗?素,保持?菌。
所需材料:
均勻的單細(xì)胞懸液;含?清培養(yǎng)基;??清培養(yǎng)基或不含?Ca2+Mg2+的PBS?液;?清、?蛋?或與培養(yǎng)基兼容的蛋?源;聚丙烯錐形離?管;溫度可控的離?機(jī)(0-1000g);熒光分析儀(熒光計(jì),熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀, 熒光圖象分析儀);超凈臺(tái);細(xì)胞計(jì)數(shù)儀;載玻?。
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操作注意:
快速均勻的混合對(duì)標(biāo)記也很重要,為獲得最佳效果應(yīng)采取下述措施:
1)混合時(shí)細(xì)胞懸液和?作染液應(yīng)等量;
2)避免染太多(>5ml)或太少(<100ul)的液體。避免?沾?清的移液管加染料;
3)液體量應(yīng)盡可能精確以保證細(xì)胞和染料濃度被精確復(fù)制。
4)染料和稀釋液作?于細(xì)胞的時(shí)間盡量短,可?稀釋液按上述步驟作?于細(xì)胞看其受損程度。
5)加等量?清終?反應(yīng),在終?染?反應(yīng)前別離?稀釋液中的細(xì)胞,清洗時(shí)?含?清培養(yǎng)基可增加清洗效果。6)細(xì)胞應(yīng)單獨(dú)移?新試管中離?,清洗?3?次時(shí)不?稀釋液??培養(yǎng)基。
7)可?于體外?細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、內(nèi)?細(xì)胞等的標(biāo)記較理想。
8)全細(xì)胞標(biāo)記應(yīng)先于單抗染?的標(biāo)記,當(dāng)?4℃單抗染?時(shí)細(xì)胞跟蹤探針將保持穩(wěn)定;如后于單抗染?的標(biāo)記,很可能出現(xiàn)“蓋帽”現(xiàn)象。
9)染?細(xì)胞??2%多聚甲醛固定穩(wěn)定性達(dá)高。