一.UPLC色譜柱可以反沖嗎？hplc的色譜柱可以簡單反沖，但是，uplc的色譜柱.也是一樣的嗎？如果壓力偏高，該怎么辦？

? ? ? ?答：如果兩端篩板孔徑對稱，UPLC柱應(yīng)該也是可以反沖的。發(fā)現(xiàn)壓力偏高，當(dāng)然也可以用反沖清洗的方法維護(hù)，uplc柱和普通色譜柱比，只是壓力高一點(diǎn)，不應(yīng)該有什么特殊吧。

二.常規(guī)LC的柱子粒度小，柱效高，現(xiàn)在有3.5um的常規(guī)柱，不知道用3.5um*250的壓力與4.6um的壓力相差多少？

? ? ? ?答：一般柱子4.6mmx250mm指的是其內(nèi)徑和長度。粒徑才用um的單位，但一般標(biāo)的是5um，也有3.5um的。其它條件一樣，光粒徑是3.5um和5um的柱壓差別，理論上3.5um柱子的柱壓是5um柱子的(5/3.5)平方倍數(shù)，即2.04倍，簡單說就是2倍。

三.因為不知道流動相已走完，液相色譜柱空走了大概一晚上，請問這種情況下柱子還能用嗎？如果可以應(yīng)該如何再生？

? ? ? ?答：能用的！可能柱子里會有氣泡進(jìn)去，但之后多用流動相沖沖，看到基線穩(wěn)定，就沒問題了。用色譜柱的保存液低流速長時間沖洗，然后再檢測一下柱效，看柱子是否恢復(fù)，液相最好設(shè)置一下最低壓限，這樣就不怕流動相走光而會損傷色譜柱。

四.在梯度洗脫的時候，如果整個時間程序越長，保留時間的重現(xiàn)性越差，尤其是后出的峰重現(xiàn)性差更明顯，我猜估計是流量本身的誤差引起的，但是怎么盡量避免這種情況的出現(xiàn)，使保留時間重現(xiàn)性更好？

? ? ? ?答：這個要控制好環(huán)境溫度和柱溫，易揮發(fā)的流動相要適當(dāng)密封，同時保留時間的漂移與儀器的精度也有關(guān)系。

五.我對聚苯乙烯-二乙烯苯柱很有興趣，主要是它耐高溫、耐酸堿、但有關(guān)這方面的文獻(xiàn)很少，但對于他的分離效能我一直心里沒底，我的問題有三：1、分離效果與ODS比較，是相當(dāng)呢，還是更勝一籌，或是更差？2、我原以為它是整體住，但看過資料后發(fā)現(xiàn)也是顆粒的比如5u，請問該類型的柱是否符合速率理論、是不是粒徑越小分離效果會幾何級的增加？3、問什么沒有1.7u的這種柱出現(xiàn)呢？

? ? ? ?答：聚合物基質(zhì)色譜柱的優(yōu)點(diǎn)你已經(jīng)提到了，它的缺點(diǎn)有：對小分子分離的柱效相對硅膠基質(zhì)色譜柱要低，表面衍生化修飾也沒有在硅膠表面豐富，機(jī)械強(qiáng)度低耐壓性不好，還有碰到某些有機(jī)溶劑會溶脹等。

? ? ? ?聚合物基質(zhì)柱當(dāng)然也符合速率理論！它柱效低主要是因為分析物在聚合物固定相中的傳質(zhì)速度比在硅膠表面固定相中慢很多。不過粒徑越小柱效幾何級增加的規(guī)律還是有的。1.7um的硅膠基質(zhì)填料也是最近幾年才商品化，1.7um的聚合物基質(zhì)沒出來也正常，或許永遠(yuǎn)都不出來了，因為聚合物耐壓差，粒徑做這么小，它根本承受不了這個高壓吧，但愿以后會有能抗高壓的聚合物填料研究出來。

總結(jié)

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