Q1.?應(yīng)該如何儲存和解凍血清不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損??

建議血清應(yīng)保存在-20℃，若一次無法用完一瓶 ，無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。解凍時，建議將血清從冷凍室先移至 2-8℃冰箱解凍。再放置于室溫進行徹底解凍。請注意，解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。不推薦將 FBS在37℃長時間孵?育解凍。

Q2.?培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎??

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時 ,您應(yīng)該在2周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

Q3.?如果我的FBS到達時已部分解凍，還能使用嗎??

海星生物Hycyte?篩選胎牛血清全部都在冰凍狀態(tài)下由干冰運輸，因此您收到時應(yīng)該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍，F(xiàn)BS仍然可以使用，但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍，之后通過溫和的搖晃進行混合，再移至-20℃進行儲存。

Q4.?不同批次血清顏色為什么有差異?

血中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過程中細胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影響細胞培養(yǎng)。國家藥典規(guī)定≤20mg/dL(注:1dL=100ml)?也寫作<0.02%(w/v)。

Q5.?熱滅活是必須的嗎??

實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或完全沒有任何甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中局部溫度過高，搖晃不均勻滅活時間過長，都會造成血清品質(zhì)下降。若非必須，可以不需要做熱處理這一步，不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量! ??

Q6.?如何進行血清的熱滅活??

滅活之前必須先搖勻解凍的血清并恢復(fù)到室溫(1)取部分搖勻的血清(50ml離心管)，選用同規(guī)格的對照管一個。(2)對照管內(nèi)放入與血清等體積的水。(3)溫度預(yù)試:對照管內(nèi)插入溫度計，顯示56℃時，將恢復(fù)到室溫的血清，放入水浴鍋。滅活過程中，經(jīng)常輕輕晃動搖勻(如每隔5min)，保證溫度均一。

Q7.?細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理??

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，?微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在顯微鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):

(1)細胞生長過老，破碎的細胞碎片；?

(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長；

(3)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除；

(4)血清等級不足以維持細胞良好的生長。

Q8.?FBS 中含有的絮狀物是什么??

FBS中的絮狀物可能由很多種原因造成，其中最常見的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋白，不會影響血清品質(zhì)，但必須去除，因為沉淀會影響細胞與細胞之間的聯(lián)系，誘導(dǎo)細胞聚集，影響細胞貼壁等。

如要去除絮狀物，在 4℃解凍后，首先混勻血清 4℃靜置 30min-1h，讓沉淀自然沉降到瓶底或管底。中上層無沉淀血清直接轉(zhuǎn)出使用，下層血清轉(zhuǎn)到50ml 無菌離心管 1000rpm(約400g)，離心3-5min即可除去。?

Q9.?如何選擇適合的血清 ？

市面上的胎牛血清大部分來于澳洲、南美。昂貴的澳洲血清培養(yǎng)嬌貴細胞（如：小鼠 ES、原代細胞分離培養(yǎng))，南美(烏拉圭)血清或國產(chǎn)胎牛血清用于癌細胞、常規(guī)細胞系培養(yǎng)(用量最大)。

海星生物技術(shù)團隊經(jīng)細胞培養(yǎng)和檢測推出了三款不同類型的篩選血清：

特點：

☆?無任何病毒污染? ?

☆?不含激素、抗生素??? ? ? ? ?

?☆?無外源添加因子??

?☆?質(zhì)量穩(wěn)定、性價比高

作者：Cas9x海星生物

公眾號：海星生物科技

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我們的服務(wù)：CRISPR/Cas9細胞基因編輯、載體構(gòu)建/病毒包裝、分子診斷標(biāo)準品/突變基因標(biāo)準品/融合基因標(biāo)準品、細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)/細胞干擾

我們的產(chǎn)品：HyCyte干細胞/原代細胞/細胞株、三系誘導(dǎo)培養(yǎng)試劑、ClonePlus 專用培養(yǎng)基、基因編輯試盒、病毒現(xiàn)貨、細胞專用血清?