PVDF膜蛋白測序
PVDF膜是聚偏二氟乙烯膜,常見于蛋白免疫印跡實(shí)驗。PVDF膜蛋白測序可用于基于Edman降解法的蛋白測序中,NC膜在Edman試劑中會降解。百泰派克生物科技提供PVDF膜蛋白測序,包括基于Edman降解的蛋白N端測序等。
PVDF膜
PVDF常見于蛋白免疫印跡實(shí)驗中,用做一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的,孔徑有大有小,膜孔徑越小對低分子量的蛋白的結(jié)合能力就越好。PVDF膜還可用于吸附分析、蛋白N端測序和糖蛋白顯色等多個方面。在蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)現(xiàn)中,最常使用的膜是硝酸纖維素膜(NC膜),因為它有價格較便宜、親水性較好等優(yōu)點(diǎn)。相比于NC膜,PVDF膜具有更高的機(jī)械強(qiáng)度、背景低、溶劑相容性廣,以及著色能力好等優(yōu)點(diǎn),而且還能用于蛋白測序。
PVDF膜蛋白測序
PVDF膜蛋白測序常用Edman降解法。Edman降解法是蛋白質(zhì)測序方法中最成熟的方法之一,NC膜在Edman試劑中會發(fā)生降解,因此PVDF膜作為替代品開始應(yīng)用于蛋白免疫印跡實(shí)驗中。需要PVDF膜蛋白測序時,PVDF膜染色過程中可以使用考馬斯亮藍(lán)或者立春紅進(jìn)行染色,千萬不要使用銀染的方法進(jìn)行染色。染色完成之后,可以使用雙蒸水對PVDF膜進(jìn)行清洗,特別是在轉(zhuǎn)膜的緩沖液中含有甘氨酸時,需要對PVDF膜進(jìn)行多次沖洗,以避免甘氨酸對后續(xù)分析的影響。
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