抗體蛋白測(cè)序
抗體蛋白測(cè)序,是測(cè)定抗體的氨基酸序列??贵w氨基酸序列決定抗體的種類和功能特征。百泰派克生物科技提供基于質(zhì)譜的抗體蛋白測(cè)序,包括抗體蛋白N/C端測(cè)序和全序列分析。
抗體
抗體是一種蛋白質(zhì),屬于免疫球蛋白,可以與抗原特異性結(jié)合??贵w由4條多肽鏈構(gòu)成,其中包括兩條分子量較小的輕鏈和兩條分子量較大的重鏈。根據(jù)氨基酸的情況,抗體分為可變區(qū)和恒定區(qū),恒定區(qū)氨基酸數(shù)量和順序都較為穩(wěn)定,可變區(qū)氨基酸的組成和排列變化較大??贵w的可變區(qū)決定其與抗原結(jié)合的特異性,恒定區(qū)則與抗體的類型相關(guān)。
抗體蛋白測(cè)序
抗體蛋白測(cè)序,就是對(duì)抗體的氨基酸序列進(jìn)行檢測(cè)??贵w蛋白測(cè)序可以對(duì)抗體的輕鏈、重鏈及全長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)序。抗體蛋白測(cè)序可以幫助了解抗體的類型和功能,可以用于發(fā)現(xiàn)新抗體檢測(cè)已知抗體,可以用于抗體藥物研發(fā)等等。與蛋白質(zhì)測(cè)序一樣,抗體蛋白測(cè)序也可以采用Edman降解法和質(zhì)譜法。Edman降解法從抗體蛋白N端開始逐一分離氨基酸,然后由高效液相色譜(HPLC)根據(jù)每個(gè)氨基酸的洗脫時(shí)間確定氨基酸的種類,從而實(shí)現(xiàn)抗體蛋白測(cè)序。Edman降解法常常只能準(zhǔn)確測(cè)定n端的幾十個(gè)氨基酸。質(zhì)譜法主要是利用串聯(lián)質(zhì)譜等方法,一級(jí)質(zhì)譜獲取高校液相色譜MS1中洗脫的肽的質(zhì)量-電荷比(m/z)和肽的強(qiáng)度(intensity);二級(jí)質(zhì)譜通過對(duì)肽段氨基酸序列進(jìn)行確定,MS2選擇單個(gè)肽段對(duì)其進(jìn)行萃裂從而得到該肽段的光譜數(shù)據(jù)。通過理論數(shù)據(jù)庫比對(duì)的方式對(duì)樣品進(jìn)行序列分析。