百螢 檢測(cè)細(xì)胞功能的探針------Annexin V-Cy3標(biāo)記
1.?Annexin V-Cy3標(biāo)記概述:
? ? ? ? Annexin V-Cy3標(biāo)記是美國(guó)AAT Bioquest研發(fā)的用于檢測(cè)細(xì)胞功能的探針,膜聯(lián)蛋白是鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白家族。 它們富含真核生物,屬于參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的普遍存在的細(xì)胞質(zhì)蛋白家族。 膜聯(lián)蛋白V的優(yōu)先結(jié)合配偶體是磷脂酰絲氨酸(PS),其通常保持在細(xì)胞膜的內(nèi)葉(細(xì)胞質(zhì)側(cè))。 在細(xì)胞凋亡中,PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。 磷脂酰絲氨酸在細(xì)胞表面上的出現(xiàn)是細(xì)胞凋亡的初始/中間階段的通用指示,并且可以在觀察到形態(tài)變化之前檢測(cè)到。 我們的膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物是一組監(jiān)測(cè)細(xì)胞功能的工具,旨在通過(guò)測(cè)量磷脂酰絲氨酸的易位來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡。
? ? ? ? ?膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物在Ca2+存在下與凋亡細(xì)胞表面上的PS結(jié)合,它也可以通過(guò)壞死細(xì)胞膜或死細(xì)胞并與細(xì)胞內(nèi)部的PS結(jié)合。 因此,我們建議將細(xì)胞不可滲透的核染色與膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物結(jié)合使用,以區(qū)分死細(xì)胞和凋亡細(xì)胞。
2.??Annexin V-Cy3標(biāo)記參數(shù):
?Ex(nm)? ? ? ? ? ?555
Em(nm)? ? ? ? ? 569
分??子 量? ? ? ? ?~36000
儲(chǔ)存條件? ? ? ? ?在零下15度以下保存,避免光照。
溶? ? ? ?劑 ????????Water
3.?Annexin V-Cy3標(biāo)記光譜圖

4.Annexin V-Cy3標(biāo)記數(shù)據(jù)分析
? ? ? ?下圖是使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細(xì)胞凋亡中的結(jié)合活性的實(shí)例。 在活的非凋亡細(xì)胞中,膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450檢測(cè)非誘導(dǎo)細(xì)胞中的先天性細(xì)胞凋亡,其通常為所有細(xì)胞的2-6%。 在凋亡細(xì)胞中,膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結(jié)合,磷脂酰絲氨酸位于細(xì)胞膜的外部小葉上,導(dǎo)致染色強(qiáng)度增加。

5.Annexin V-Cy3標(biāo)記參考文獻(xiàn)
Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors:?Brad Larson, Peter Banks
Journal:?Experimental Biology (2017)
Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors:?Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal:?Journal of Controlled Release (2017)