膠原酶原料認(rèn)證?：

粗膠原酶制劑含有兩種不同膠原酶的幾種同工型，一種巰基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨肽酶。這種膠原蛋白水解和蛋白水解活性的組合可有效分解細(xì)胞間基質(zhì)，這是組織解離的重要部分。該復(fù)合物的一個(gè)成分是水解酶，它優(yōu)先在序列?Pro-Y-Gly-Pro?中的?Y-Gly?鍵處降解天然膠原蛋白中的螺旋區(qū)域，其中?Y?最常見(jiàn)的是中性氨基酸。這種切割產(chǎn)生對(duì)進(jìn)一步肽酶消化敏感的產(chǎn)物。粗膠原酶被半胱氨酸、EDTA?或鄰菲咯啉等金屬螯合劑抑制，但?DFP?不抑制。它也被一種大的血漿糖蛋白α2-巨球蛋白抑制。鈣2+是酶活性所必需的。

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每種膠原酶的特定酶譜已與從中獲得研究細(xì)胞的組織（或與放置細(xì)胞的用途）相關(guān)，并且作為相關(guān)性的結(jié)果，Worthington?艾美捷已經(jīng)建立了幾種類(lèi)型的粗膠原酶：類(lèi)型?1、2、3?和?4。

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??1?型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。

??2?型含有較高相對(duì)水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

??3?型含有最低水平的二級(jí)蛋白酶。

??4?型被設(shè)計(jì)成胰蛋白酶活性特別低，以限制對(duì)膜蛋白和受體的損害。

??5?型 含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。

??6?型 含有高膠原酶活性，酪蛋白酶與膠原酶的比例約為?2:1。設(shè)計(jì)為相對(duì)于?I?型?( col ?G)富含?II?型?( col ?H)?膠原酶。

??7?型膠原酶和酪蛋白酶的活性比?1?型和?2?型膠原酶高四倍。

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??純化的膠原酶，代碼：CLSPA，含有最少的二次蛋白水解活性和高膠原酶活性。

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Worthington?艾美捷預(yù)包裝形式的每種類(lèi)型的?0.22μm?過(guò)濾制劑，用于直接重組和用于細(xì)胞分離和培養(yǎng)程序。酶類(lèi)型和不同組織的有效性之間的相關(guān)性很好，但并不完美，部分原因是使用的可變參數(shù)。然而，大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是一項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。

膠原酶測(cè)定是對(duì)Mandl的改進(jìn)，其中膠原酶與天然膠原一起溫育5小時(shí)并且使用Moore and Stein, JBC, 176 , 367, (1948)比色茚三酮法測(cè)定膠原分解的程度。釋放的氨基酸以每毫克膠原酶微摩爾亮氨酸表示。

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用途：粗膠原酶廣泛用于酶促原代細(xì)胞分離和組織解離程序。大多數(shù)研究人員要么使用粗制膠原酶制劑，例如?1、2、3?和?4?型，要么使用色譜純化的膠原酶（代碼：CLSPA）；后者通常與二級(jí)酶如彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等結(jié)合。為了獲得最佳結(jié)果，必須針對(duì)要解離的組織調(diào)整蛋白水解活性的較精確混合。不同組織的類(lèi)型和有效性之間的相關(guān)性很好，但并不完美，并且可能部分取決于使用參數(shù)和目標(biāo)以及批次間的差異。

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Worthington相關(guān)研究：

膠原蛋白?(CL)

脫氧核糖核酸酶?I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

彈性蛋白酶?(ES/ESL/ESFF)

透明質(zhì)酸酶?(HSE/HSEP)

中性蛋白酶?(Dispase, NPRO)

木瓜蛋白酶?(PAP/PAPL/PAP2)蛋白酶?K (PROK)

胰蛋白酶?(TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)

胰蛋白酶抑制劑?(LBI/OI/SI/SIC)

細(xì)胞分離優(yōu)化系統(tǒng)?(CIT)

肝細(xì)胞分離系統(tǒng)?(HIS)

新生兒心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)?(NCIS)

木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)?(PDS/PDS2)

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Worthington專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。其核心酶包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。