艾美捷Bio-Helix IRIS11預(yù)染蛋白Markers簡單介紹
預(yù)染蛋白Marker是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料共價耦聯(lián),在電泳過程中或者轉(zhuǎn)膜時可以直接觀察到。預(yù)染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了實驗,可以幫助我們在電泳時、電泳后以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測電泳情況和估計遷移率。由于預(yù)染蛋白Marker是與染料共價耦聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發(fā)生某些變化,可能導(dǎo)致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白。
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不過多數(shù)情況下Marker的條帶未必能和我們的目標(biāo)蛋白完全一樣,我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小,最后都需要Western來定性,所以如果不是要區(qū)分大小相近的條帶,預(yù)染Marker還是很好用的,而且也可以和未染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)一起使用。
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艾美捷Bio-Helix IRIS11預(yù)染蛋白質(zhì)Markers(11條預(yù)染條帶,3-260 kDa)是11種預(yù)染色蛋白的組合,分子量為3至260kDa。11種重組蛋白與藍(lán)色發(fā)色團(tuán)共價偶聯(lián),而2條70kDa的紅色帶15kDa的綠色帶和60kDa的新設(shè)計的孔雀綠色帶用作參考帶。
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IRIS11預(yù)拉伸蛋白質(zhì)階梯跟蹤SDS聚丙烯酰胺過程中蛋白質(zhì)的大小和分離凝膠電泳、近似靶蛋白大小并驗證PVDF上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移效率,尼龍或硝化纖維膜。
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艾美捷Bio-Helix IRIS11預(yù)染蛋白Markers組分:
IRIS11 Prestained Protein Ladder ?500μl x 1 vial
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艾美捷Bio-Helix IRIS11預(yù)染蛋白Markers存儲緩沖區(qū):
0.2~0.4 mg/ml的每一條蛋白質(zhì)儲存在含有:20 mM三磷酸鹽的溶液混合物中pH 7.5時,2%十二烷基硫酸鈉、0.2mM二硫蘇糖醇、3.6M尿素和15%(v/v)甘油。
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參考各種電泳條件下的IRIS11預(yù)拉伸蛋白質(zhì)梯形圖:

重要注意事項:
每種蛋白質(zhì)的分子量(kDa)在每種電泳條件,應(yīng)考慮其他數(shù)據(jù)以進(jìn)行更準(zhǔn)確的調(diào)整。