蛋白泛素化檢測
泛素化修飾是蛋白質(zhì)的一種重要的翻譯后修飾,幾乎參與了細胞的各個生命活動,因此對蛋白泛素化檢測進行檢測是很重要的。百泰派克生物科技提供基于質(zhì)譜的蛋白泛素化檢測服務(wù)。
蛋白質(zhì)泛素化
蛋白質(zhì)泛素化是蛋白質(zhì)的一種翻譯后修飾形式。泛素是一種存在于真核生物大多數(shù)組織中的小的(8.6 kDa)調(diào)節(jié)蛋白。通過酶的作用,將泛素添加至底物蛋白的過程稱為蛋白質(zhì)的泛素化。該過程包含三個主要步驟:激活、結(jié)合和連接,每個步驟分別由泛素激活酶(E1s)、泛素結(jié)合酶(E2s)和泛素連接酶(E3s)作用。蛋白質(zhì)泛素化修飾可以是單個泛素(單泛素化)或泛素鏈(多泛素化)修飾。與磷酸化修飾一樣,泛素化修飾也是可逆的,泛素蛋白可以由去泛素化酶(DUB)去除掉。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)真核生物中80%-85%的蛋白質(zhì)降解。此外,泛素化還參與幾乎所有生命活動,包括細胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號傳遞、損傷修復(fù)和炎癥免疫等。
蛋白泛素化檢測
蛋白質(zhì)泛素化檢測是檢測蛋白質(zhì)是否發(fā)生了泛素化、哪個位點發(fā)生了泛素化,以及對泛素化蛋白進行定量。檢測蛋白質(zhì)的泛素化可以利用western blot、免疫共沉淀和質(zhì)譜等技術(shù)進行。其中,質(zhì)譜通過檢測蛋白質(zhì)酶切肽段的質(zhì)量,可以檢測出蛋白質(zhì)是否發(fā)生了泛素化,二級質(zhì)譜信息可以得到泛素化發(fā)生的位點,通過質(zhì)譜峰強弱等信息還可實現(xiàn)泛素化蛋白質(zhì)的定量。

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