菜鳥博士（懸空七少）

3.3質(zhì)譜調(diào)諧窗口各項參數(shù)設(shè)定

3.3.1在MassLynx軟件左側(cè)快捷鍵位置，點擊 MS Tune打開質(zhì)譜調(diào)諧界面。

3.3.2點擊質(zhì)譜調(diào)諧右下角Opearate按鈕，使儀器處于開機工作狀態(tài)。

3.3.3在質(zhì)譜調(diào)諧界面選擇離子模式。

3.3.4設(shè)置參數(shù)

(1)?????????? Capillary Voltage:毛細管電壓主要起到離子化的作用，一般來說，毛細管電壓越高，信號越強。正離子一般設(shè)在0.5~3.2kV，常用為3.0kV；負離子在0.5~2.6kV，常用為2.5kV。毛細管電壓設(shè)置過高，會導(dǎo)致毛細管放電，損壞毛細管。

(2)?????????? Sample Cone: 將帶電離子吸入錐孔，理論上錐孔電壓越高進入的離子越多，可設(shè)范圍為25~100V。一般設(shè)為35-40V,小分子藥物設(shè)為25V。sample cone電壓過高時，會在源內(nèi)產(chǎn)生離子碎片。對于SYNAPT G2-Si，錐孔電壓對源內(nèi)裂解的影響很小，可忽略。

(3)?????????? Sample offset：常設(shè)在40~80V之間。

(4)?????????? Source (°C)：常設(shè)范圍為：60~120°C。加熱源溫可以阻止溶劑在真空區(qū)域聚集。源溫設(shè)定需根據(jù)樣品的流速而定。

(5)?????????? Desolvation (°C)：Typically 150-650 °C。脫溶劑氣溫度是來協(xié)助溶劑蒸發(fā)。脫溶劑氣溫度設(shè)定需根據(jù)溶劑的流速及組成而定。

(6)?????????? Cone Gas (L/hr)：Typically 0 ~ 50 L/hr。氮氣反吹氣環(huán)繞與錐孔電壓，減少溶劑簇群的形成。

(7)?????????? Desolvation gas (L/hr): Typically 300-1000 L/h。用于溶劑的蒸發(fā)。脫溶劑氣流速設(shè)定需根據(jù)溶劑的流速及組成而定。

(8)?????????? 離子模式的選擇：堿性化合物宜用正離子方式；酸性化合物宜用負離子方式；如未知,可能正負都要做。

(9)?????????? 分析模式：靈敏度模式 分辨率模式 高分辨模式 超高分辨模式。

3.3.5在MS tune窗口進入Instrument界面。

Note:此處碰撞能一定處于off狀態(tài)，否則會使母離子在TOF1通道中打碎。

3.3.6在MS tune窗口進入fluidics界面。

1.Fluidics flow control 有三個控制圖標，分別為 Start infusion開始進樣、 Refill the syringe重新灌滿注射器、 Purge syringe清洗并灌注注射器。

2.在Flow state選項下可選擇相應(yīng)的流路。Sample流路下有4中流路狀態(tài)，在液質(zhì)聯(lián)用下，sample flow state需選在LC狀態(tài)下。在Lockspray flow state流路下只有infusion和waste。

Infusion是選擇的校正液進質(zhì)譜，LC出來的溶液進廢液。

Combined是校正液和LC一起進質(zhì)譜。

LC是校正液進廢液，LC出來的溶液進質(zhì)譜。

Waste是校正液和LC一起進廢液。

3.選擇相應(yīng)的Reservoir, Lockspray fluidics會自動purge，purge完之后在infusion flow rate下設(shè)定流速，點擊infusion，即實現(xiàn)從intellistart進樣。

3.3.7 點擊File > Save As... 保存質(zhì)譜調(diào)諧名字。

3.3.8在SYNAPT G2-SI質(zhì)譜前面板左側(cè)IntelliStart fluidics system位置放置溶液。樣品儲液瓶安裝在儀器前面板上。在儀器軟件中選擇一種溶劑后，LED將照亮相應(yīng)的儲液瓶?？梢酝瑫r照亮所有三個樣品儲液瓶，或熄滅光敏樣品的 LED。

A: 乙腈：H2O=50：50
B: 0.2 ng/μL亮氨酸腦啡肽Leucine enkephalin

C: 0.5 mM甲酸鈉Sodium Formate

3.3.9整數(shù)位質(zhì)量數(shù)Veff值校正

Veff值check（Veff值確保整數(shù)位質(zhì)量數(shù)的準確度）。若LE的所測質(zhì)量數(shù)比理論值之差大于±0.1Da，則需要更改Veff值。進入System view，System à Acquisition setting.....à Calculate and set Veff，在Reference Mass里輸入LE的準確分子量（正離子下(Pos Mode)556.28，負離子下（Neg Mode）554.26），在Measured Mass輸入tune page上LE所測得的分子量，點擊Calculate，然后update，即可。