脂質(zhì)如何染色？小薇今天簡單為大家介紹一下常見的脂質(zhì)染色方法。

脂質(zhì)是構(gòu)成人體組織的正常成分，包括脂肪和類脂（磷脂、糖脂、固醇等），通常不溶于水而易溶于酒精、氯仿等脂溶劑。

最常見的脂質(zhì)染色方法包括蘇丹III染色、蘇丹IV染色、蘇丹黑和油紅O染色。一般用于病理狀態(tài)下組織脂肪的檢測。正常狀態(tài)下，除脂肪細(xì)胞外其他細(xì)胞內(nèi)不見或少見少量脂滴，但在病理狀態(tài)下，正常細(xì)胞中會(huì)出現(xiàn)脂滴或者脂滴明顯增多，尤其是心、肝、腎等實(shí)質(zhì)器官發(fā)型脂肪病變時(shí)，胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡，此時(shí)需用脂肪染色鑒定空泡是為脂肪變性、水變性還是糖原貯存。

#01蘇丹III染色

1、原理

蘇丹（Sudan）III，最早使用的脂肪染料，具有脂溶性，易穿過細(xì)胞膜進(jìn)入脂肪細(xì)胞內(nèi)與脂肪反應(yīng)顯橘黃色。

2、結(jié)果

脂肪呈橘黃色或鮮紅色，脂肪酸不著色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。一般用于確定胞漿內(nèi)空泡是脂滴、糖原還是水變性。

3、大致染色步驟

1：準(zhǔn)備冰凍切片（8-10μm）；

2：70%酒精固定1min；

3：蘇丹III酒精溶液染色20-30min；

4：70%酒精洗去多余染料；

5：水洗；

6：蘇木素復(fù)染2-5min；

7：1%鹽酸酒精分化；

8：水洗、藍(lán)化、甘油封固。

#02蘇丹IV染色

1、原理

蘇丹IV又名猩紅，是蘇丹III的衍生物，可將脂肪染成紅色，也能將角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油等染成紅色。

2、結(jié)果

脂肪呈猩紅色，比蘇丹III更為清晰。

3、步驟與蘇丹III染色一致。

#03油紅O染色

1、原理

油紅O（Oil Red O）為脂溶性染料，可在脂肪內(nèi)高度溶解。油紅O可以特異性地與組織和細(xì)胞內(nèi)的重型甘油三酯、脂質(zhì)和脂蛋白產(chǎn)生吸附以使脂肪染色。分子式如下：

油紅O染色的觀察性好，染色更深，是目前最優(yōu)良的脂肪染色燃料，進(jìn)行脂肪染色時(shí)，標(biāo)本不能制作石蠟切片，而需要冰凍切片。

油紅O除了可用于脂肪染色，也可用于法醫(yī)鑒定指紋。

2、結(jié)果

脂肪呈鮮紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色，間質(zhì)無色。

3、步驟

1：準(zhǔn)備冰凍切片（8-10μm）；

2：70%酒精固定1min；

3：蒸餾水洗；

4：油紅稀釋染液10-15min，避光密封；

5：60%酒精鏡下分化至間質(zhì)清晰；

6：蒸餾水洗；

7：Marry氏蘇木素復(fù)染核；

8：水洗，甘油或甘油明膠封片。

脂肪染色方法簡單，結(jié)果也比較好解讀。組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時(shí)，對蘇丹染料著色效果最好，因而在實(shí)際操作中，可以適當(dāng)提高溫度（37℃-60℃）以便更好地觀察染色結(jié)果。

小方法成就大文章，祝大家科研之路一切順利！