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艾美捷 優(yōu)化的Cas9核酸酶特征和相關(guān)研究

2023-04-06 16:01 作者:認(rèn)真搞科研的科研達(dá)人  | 我要投稿

優(yōu)化的Cas9核酸酶化膿性鏈球菌設(shè)計(jì)用于活細(xì)胞或生物體的基因組編輯以及體外消化。使用 Cas9/RNP 遞送提高基因組編輯效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因組編輯可以通過多種方法(質(zhì)粒、mRNA、核酸酶、病毒遞送)進(jìn)行。

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艾美捷?優(yōu)化的Cas9核酸酶#CAS9050描述和特征:

Cas9核酸酶來源于化膿性鏈球菌。包含一個(gè) N 端 His 標(biāo)簽、2 個(gè)優(yōu)化的核定位序列 (NLS) – 1 個(gè) N 端 NLS 和 1 個(gè) C 端 NLS + 1 個(gè)真正的靶向序列。

大?。?164.48 kDa

等電點(diǎn):9.26

濃度:1 毫克/毫升:以 Hepes 10 mM pH 7.5、250 mM 氯化鈉、1 mM DTT、50% 甘油提供

100 μg Cas9 核酸酶 = 608 pmol這種 Cas9 核酸內(nèi)切酶是 CRISPR/Cas9 機(jī)制的一部分,該機(jī)制起源于細(xì)菌,其中它通過 RNA 引導(dǎo)的切割提供針對入侵的外來 DNA 的獲得性免疫。

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Cas9核酸酶(CRISPR相關(guān)蛋白9)是一種RNA引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,用于通過產(chǎn)生序列特異性雙鏈斷裂(DSB)進(jìn)行基因組編輯。DNA中DSB的存在導(dǎo)致細(xì)胞修復(fù)過程的激活,其中DNA恢復(fù)通過非同源末端連接(NHEJ)或同源定向重組(HDR)發(fā)生,從而改變基因組?;蚯玫?、缺失或插入說明了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的主要成就。

圖:用sgRNA編程的Cas9核酸酶。結(jié)合后,短向?qū)NA(sgRNA)特異性靶向短DNA序列標(biāo)簽(PAM)。Cas9核酸酶在PAM序列上游切割DNA三個(gè)核苷酸。

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優(yōu)化的Cas9核酸酶相關(guān)研究:

Crispr/Cas9基因組編輯

CRISPR Cas9轉(zhuǎn)染試劑

蛋白質(zhì)輸送


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