一.我之前有了解到貴公司也有手性色譜柱，之前買過大賽璐的手性柱，其手性柱價格相比普通反相色譜柱，要高出很多倍，不知道是本身柱子裝填技術(shù)的難度大還是其他什么原因？它的主要技術(shù)關(guān)鍵在什么方面？

? ? ? ? ?答：手性柱技術(shù)關(guān)鍵在于手性填料的開發(fā)，大賽璐公司在手性填料的生產(chǎn)技術(shù)方面申請了專利保護(hù)，別的廠商不能生產(chǎn)，導(dǎo)致手性柱價格居高不下。前幾年傳說該公司的專利保護(hù)期限快到了，國際國內(nèi)有些公司就想著仿制生產(chǎn)。后來又聽說專利還沒到期，情況不明。

二.“樣品與離子對生成緊密的結(jié)合物，離子對試劑掩藏化合物中的極性基團(tuán)”這句話是什么意思？離子對怎么樣掩蔽化合物中極性基團(tuán)？不就是通過靜電引力的作用形成離子締合物，來降低其極性的嗎？

? ? ? ? ?答：離子對色譜是解決強(qiáng)極性物質(zhì)在反相色譜中保留能力不足的一個有效的途徑。有些堿性極性物質(zhì)，即使用100%水相做流動相，且無論在色譜柱能承受的pH范圍內(nèi)怎么去調(diào)節(jié)pH，保留能力都不夠。建議如果需要分離的組分中全是可以離子態(tài)存在的，那還可以選擇離子交換色譜進(jìn)行分離。不然的話，就只有選擇離子對色譜方法了，盡管它有流傳的那么多副作用存在。

? ? ? ? ? 離子對試劑含親水基和疏水基，很像表面活性劑，所以一開始離子對色譜也稱為“皂色譜”。離子對作用的機(jī)理有兩種解釋，你上面都已經(jīng)提到了。到底是哪種解釋對，尚無定論，實際上也沒必要去定論，反正兩種解釋都通就可以了。主流的解釋也是你先提到的機(jī)理，下面示意圖更直觀：

? ? ? ? ?我個人認(rèn)為，兩種機(jī)理都可能存在，要看離子對試劑、固定相和分析物這三者本身情況而定。如果離子對試劑的疏水端和固定相之間的結(jié)合力相對更強(qiáng)，示意圖的作用機(jī)理會占上風(fēng)。反之，離子對試劑親水端和分析物導(dǎo)致掩藏極性端的作用力更強(qiáng)，你后面提到的機(jī)理更可能。總之，要看你用的什么離子對試劑，是何種的分析物等具體情況不同而不同吧。

三.我們在用的氨基柱時，有時候峰型突然變寬，有拖尾，用一段時間就又好了，不明白是什么原因造成的，如果要再生氨基柱的時候應(yīng)該怎么做呢？是像您先前回答的問題中提到的，用一定比例的氨水沖洗嗎？氨基柱可以直接用純水沖洗嗎？記得當(dāng)時買的氨基柱那個使用說明書上說不能用純水沖？是這樣的嗎？如果可以沖的話，一般沖多久？

? ? ? ? ?答：氨基柱的硅膠孔內(nèi)的氨基濃度非常高（大約有1mol/L），在有水存在的時候，在孔內(nèi)形成一個pH10左右甚至超過10的很強(qiáng)的堿性小環(huán)境，并會導(dǎo)致硅膠基體慢慢溶解。不過硅膠基體的溶解會生成酸性的硅醇基，又會降低孔內(nèi)的pH值，延緩硅膠基體的溶解進(jìn)程。一段時間后，兩個相反的過程會達(dá)成一個動態(tài)平衡，從而穩(wěn)定下來。對你問題提到的這個現(xiàn)象，我想到的是這個原因。

? ? ? ? ?氨基柱，要看氨基柱的應(yīng)用模式，是正相還是HILIC？這兩種模式的情況是大不相同的。正相使用，一般很怕有水。但HILIC模式應(yīng)用，一般流動相是乙腈/水，是不怕水的。不過鍵合氨丙基基團(tuán)非常容易水解，所以一般氨基柱不適宜保存有水的溶劑中。作為正相應(yīng)用時，流動相中要求一點都不能含水，但清洗柱子上的污染物質(zhì)，是可以含水的，因為水有強(qiáng)極性，在正相色譜上洗脫能力極強(qiáng)，當(dāng)然不必用100%純水。氨基柱具體沖洗方法，正相條件按照正相硅膠柱 的清洗方法，HILIC模式按C18柱的清洗方法。

四.采用國標(biāo)用C18柱測定辣椒精辣度，將辣椒精中添加吐溫系列乳化劑做成水溶辣椒精，請問乳化劑對C18柱是否有影響？

? ? ? ? ?答：乳化劑和離子對試劑類似，有極性端和非極性端，肯定會對C18柱有影響。不過如果辣椒精是極性物質(zhì)，乳化劑的存在到可以提高其在C18柱上的保留能力。

五.公司按照國標(biāo)測定辣椒紅色素中蘇丹紅含量，標(biāo)品分離很好，峰也不錯，但是辣椒紅色素由于跟蘇丹紅性質(zhì)很相似，且顏色較深，分離效果很差，收得率很低，測定結(jié)果偏差很大。該如何處理樣品？色素是否會降低柱效？

? ? ? ? ?答：色素不會降低柱效，但辣椒紅色素主峰濃度過大，會影響與臨近雜質(zhì)峰的分離。可考慮稀釋樣品，或試試用柱效更高的柱子。

總結(jié)

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