艾美捷Worthington?純化果膠酶是一種多組分制劑，可高效解聚具有不同酯化程度的植物果膠。該產(chǎn)品含有大量的半纖維素酶、纖維素酶、果膠酯酶和木聚糖酶活性，與果膠裂解酶和多聚半乳糖醛酸酶協(xié)同作用消化植物細(xì)胞壁組織。當(dāng)與?Worthington?純化的纖維素酶一起使用時(shí)，已發(fā)現(xiàn)純化的果膠酶在玉米、大豆、紅甜菜、向日葵、番茄和柑橘等幾種植物系統(tǒng)中非常成功地產(chǎn)生了高產(chǎn)量的活原生質(zhì)體。一般來說，濃度范圍為?0.1%?至?0.5%?的果膠酶（伴隨著?0.5%?至?1.5%?的纖維素酶）在?24°C?至?37°C?下使用?1?至?16?小時(shí)會(huì)產(chǎn)生良好的效果。

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主要的：??

果膠裂解酶?(4.2.2.10)

多聚半乳糖醛酸酶?(3.2.1.15)

半乳聚糖?1,4-α-半乳糖醛酸酶?(3.2.1.67)

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次要的：

纖維素酶（內(nèi)切纖維素酶（3.2.1.4）、外切纖維素酶（?3.2.1.91） 、纖維二糖酶（3.2.1.21））

半纖維素酶?(3.1.1.73)

果膠酯酶?(3.1.1.11)

木聚糖酶?(3.2.1.8)

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艾美捷Worthington?黑曲霉果膠酶的特性：

除了其高酶活性外，純化的果膠酶還專門用于植物原生質(zhì)體培養(yǎng)研究。使用定量測(cè)量D-半乳糖醛酸從多聚半乳糖醛酸中釋放的方法測(cè)定酶。該方法基于使用鹽酸新銅堿顯色試劑測(cè)定法測(cè)定還原糖。當(dāng)與?Worthington?純化的纖維素酶一起使用時(shí)，已發(fā)現(xiàn)純化的果膠酶可用于在幾種植物系統(tǒng)（例如玉米、大豆、紅甜菜、向日葵、番茄和柑橘）中產(chǎn)生良好產(chǎn)量的活原生質(zhì)體。一般來說，濃度范圍為?0.1%?至?0.5%?的果膠酶（伴隨著?0.5%?至?1.5%?的纖維素酶）在?24°C?至?37°C?下使用?1?至?16?小時(shí)會(huì)產(chǎn)生良好的效果。

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儲(chǔ)存:?儲(chǔ)存于?2-8°C。防潮。如果不一次使用整個(gè)瓶子，在到達(dá)時(shí)稱重成一次性等分試樣，并蓋緊、干燥、冷藏保存。材料非常吸濕，如果暴露在濕氣中會(huì)變得發(fā)粘且難以稱重。

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穩(wěn)定性/儲(chǔ)存： 防潮。如果不一次使用整個(gè)瓶子，在到達(dá)時(shí)稱重成一次性等分試樣，并在?2-8°C?下蓋緊并干燥儲(chǔ)存。材料非常吸濕，如果暴露在濕氣中會(huì)變得發(fā)粘且難以稱重。

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單位定義：一個(gè)單位在?37°C、pH 5.0?下每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放?1μmole D-半乳糖醛酸。

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技術(shù)說明：果膠酶具有J強(qiáng)的吸水性；儲(chǔ)存干燥以防受潮。

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艾美捷Worthington果膠酶的測(cè)定：

方法：在?37°C，pH 5.0?條件下，一個(gè)單位每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放?1 umole D-半乳糖醛酸。

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試劑：

0.1 M?檸檬酸/磷酸鹽緩沖液（測(cè)定緩沖液），pH 5.0

顏色試劑?A：將?40g?無水?Na 2 CO 3溶解 在?600 ml?試劑級(jí)?H 2 O?中。加入?16 g?甘氨酸并攪拌直至溶解。加入?0.450 gm CuSO 4 5H 2 O，攪拌至溶解。用試劑級(jí)?H 2 O?加至?1?升。

顏色試劑?B：將?1.2 g neocuprine - HCl?溶解在?1?升?H 2 O?級(jí)試劑中。在?4°C?下儲(chǔ)存在棕色瓶中。

D-半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品，1mg/ml

0.5%?聚半乳糖醛酸底物：

在熱板上加熱?500 ml?檢測(cè)緩沖液。在加熱和攪拌的同時(shí)，緩慢加入?2.5 gm?聚半乳糖醛酸。加熱并攪拌直至溶解。它會(huì)有點(diǎn)粘稠和不透明。不要讓溶液沸騰。如有必要，冷卻并恢復(fù)音量。儲(chǔ)存于?4°C。

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酶：

每天化妝新鮮。將溶液放在冰上直至使用。在檢測(cè)緩沖液中連續(xù)稀釋至?0.01 mg/ml。

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程序：

準(zhǔn)備三個(gè)試管，每個(gè)試管含有?1 ml?緩沖液和?6 ml?底物（試劑空白）。準(zhǔn)備三個(gè)試管，每個(gè)試管含有?6 ml?底物和?1 ml 0.1 mg/ml?的酶樣品（測(cè)試）。準(zhǔn)備三個(gè)試管，每個(gè)試管含有?6 ml?緩沖液和?1 ml?濃度為?0.1 mg/ml?的酶樣品（樣品空白）。

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將試管在?37°C?水浴中孵育?60?分鐘 ±?1?分鐘。使用?10?μg?至?125?μg?的?D-半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品將標(biāo)準(zhǔn)曲線管分裝，一式三份。

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試管孵育?60?分鐘后，立即將支架放入冰水中以停止反應(yīng)。從每管?100?μl?中分裝到另一組管中（也在冰上）。向每個(gè)反應(yīng)管和標(biāo)準(zhǔn)管中加入?2 ml Color Reagent A?和?2 ml Color Reagent B。倒置充分混合。將機(jī)架放入沸水浴中?13?分鐘 ±1?分鐘。冷卻試管，然后加入?2ml H 2 O。倒置充分混合。使用一次性比色皿讀取?A 450與水空白的吸光度。不要使用流通池；橙色附著在玻璃上。計(jì)算每組一式三份的平均吸光度。

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計(jì)算：

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：

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計(jì)算變化率。曲線應(yīng)該是線性的，直到?100 ug D-半乳糖醛酸，如果不是，用新鮮試劑重復(fù)曲線。

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Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。