艾美捷Worthington?Papain Dissociation System?是一套試劑，旨在用于?Huettner?和?Baughman?的神經(jīng)細(xì)胞分離方法?( J. Neurosci., 6 , 3044, 1986)。這些材料是為了方便和簡(jiǎn)單而設(shè)計(jì)的，對(duì)偶爾使用的用戶以及更有經(jīng)驗(yàn)和經(jīng)常使用的用戶都很有用。每個(gè)批次都經(jīng)過(guò)大鼠脊髓神經(jīng)細(xì)胞分離性能測(cè)試，該試劑盒為每次解離提供新鮮制備的酶溶液。

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穩(wěn)定性/儲(chǔ)存： 試劑在環(huán)境溫度下在正常運(yùn)輸程序中預(yù)期的一段時(shí)間內(nèi)是穩(wěn)定的，但包裝在到達(dá)時(shí)應(yīng)冷藏。使用前，內(nèi)容物可在?2-8°C?下保存?4-6?個(gè)月。儲(chǔ)存在?2-8°C。

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艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)包裝內(nèi)容：

該包裝包含足夠的材料，可以分離五份最多?0.3-0.4 cm 3的單獨(dú)組織等分試樣。對(duì)于較大的組織樣本，在每個(gè)步驟中按比例準(zhǔn)備較大體積的試劑，并按照協(xié)議中所述的相同比例將它們組合起來(lái)。

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? 小瓶1： 含有鈣、鎂、碳酸氫鹽和酚紅的無(wú)菌厄爾平衡鹽溶液(EBSS)，每包一瓶，100?毫升。該小瓶的等分試樣用于重構(gòu)其他小瓶并制備稀釋的抑制劑溶液。在使用之間冷藏并在每次使用前用無(wú)菌?O 2 :CO 2平衡。

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? 小瓶2：含有L-半胱氨酸和EDTA?的木瓜蛋白酶，每包5 x 100?單位一次性小瓶。該材料經(jīng)?0.22?微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌的小瓶中凍干。用?5ml EBSS（小瓶?1）重構(gòu)的小瓶在?1mM L-半胱氨酸和?0.5mM EDTA?中產(chǎn)生每毫升?20?單位木瓜蛋白酶的溶液。需要在?37°C?下短暫孵育以確保完全溶解和活性。

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? 小瓶3：脫氧核糖核酸酶I (DNase)，每包5 x 2000?單位一次性小瓶。

該材料經(jīng)過(guò)?0.22?微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用?0.5ml EBSS（小瓶?1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生每毫升?2000?單位脫氧核糖核酸酶的溶液。避免劇烈混合。

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? 小瓶4：含有牛血清白蛋白的卵類粘蛋白蛋白酶抑制劑，每包一瓶，重構(gòu)后32ml。

該材料經(jīng)過(guò)?0.22?微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用?32ml EBSS（小瓶?1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生的溶液的有效濃度為每毫升?10mg?的卵類粘蛋白抑制劑和?10mg?白蛋白。該小瓶的等分試樣用于每次解離。在使用之間冷藏并在每次使用前用無(wú)菌?O 2 :CO 2平衡。在?2-8°C?儲(chǔ)存時(shí)，重構(gòu)后穩(wěn)定。

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還包括一張將顏色與?pH?值關(guān)聯(lián)起來(lái)的卡片，用作?O 2 :CO 2平衡的指南。

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艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)相關(guān)研究：

膠原酶?(CLS1-4/CLSPA)

脫氧核糖核酸酶?I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

透明質(zhì)酸酶?(HSE/HSEP)

中性蛋白酶?(Dispase, NPRO)

蛋白酶?K (PROK)

胰蛋白酶?(TL/TRL/TRL3/TRLS /TRTPCK)

胰蛋白酶抑制劑?(LBI/OI/SI/SIC)

細(xì)胞分離優(yōu)化系統(tǒng)?(CIT)

肝細(xì)胞分離系統(tǒng)?(HIS)

新生兒心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)?(NCIS)

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相關(guān)參考文獻(xiàn)：

1.Bader, C.、MacLeish, P.?和?Schwartz, E.： 對(duì)從?Tiger Salamander Retina?分離的孤立棒狀感光器的光的反應(yīng) ，?Proc Natl Acad Sci USA 75 , 3507, 1978

2.巴紹爾，馬克?M： 卷。五十八?(I) ,, , 124, 1979

3.Dreyfus, Cheryl F.?和?Black, Ira B.: Methods Neurosci 2 , 10, 1990

4.Finkbeiner, S.?和?Stevens, CF： 定量測(cè)量在評(píng)估谷氨酸神經(jīng)毒性中的應(yīng)用 ，?Proc Natl Acad Sci USA 85 , 4071, 1988

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Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。