一、選擇題

1、微生物是一些個(gè)體微小、構(gòu)造簡單的低等生物的總稱，它們的大小一般小于（ C ）

A 、1cm B、1mm C、0.1mm D、1μm

2、在微生物學(xué)發(fā)展史上曾出現(xiàn)過尋找重要病原菌的“黃金時(shí)期”，其原因主要是（ C ）

A 、顯微鏡的應(yīng)用 B、消毒滅菌術(shù)的建立

C 、微生物純種分離技術(shù)的成功 D、純種微生物培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)立

3、人類已消滅的第一個(gè)傳染病是（ C ）

A 、麻疹 B、脊髓灰質(zhì)炎 C、天花 D、水痘

4、微生物五大共性的基礎(chǔ)是（ A ）。

A 、體積小，面積大 B、吸收多，轉(zhuǎn)化快 C、生長旺，繁殖快

D 、適應(yīng)強(qiáng)，易變異 E、分布廣，種類多

5、在以下四大類微生物中，只含DNA 或RNA 一種核酸的是（ D ）。

A、真菌 B、真細(xì)菌 C、古生菌 D、病毒

6、土壤中三大類群體微生物以數(shù)量排序?yàn)椋?A ）

A 、細(xì)菌＞放線菌＞真菌 B、細(xì)菌＞真菌＞放線菌

C 、放線菌＞細(xì)菌＞真菌 D、真菌＞細(xì)菌＞放線菌

7、在以下六類微生物中，細(xì)胞壁不含肽聚糖的是（ C ）。

A 、真細(xì)菌 B、放線菌 C、古生菌 D、藍(lán)細(xì)菌

E 、支原體 F、立克次氏體

8、在G 細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是（ D ）

A 、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)

9、在G 細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是（ B ）

A 、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)

10、革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是（ C ）

A. 結(jié)晶紫(初染) B.碘液(媒染) C.酒精(脫色) D.蕃紅(復(fù)染)

11、多數(shù)霉菌細(xì)胞壁的主要成分為( B )

A 、纖維素 B、幾丁質(zhì) C、肽聚糖 D、葡聚糖和甘露聚糖

12、下列微生物能通過細(xì)菌濾器的是( C )

A 、細(xì)菌 B、酵母菌 C、病毒 D、霉菌 －+

13、在放線菌發(fā)育過程中, 吸收水分和營養(yǎng)的為( A )

A 、基質(zhì)菌絲 B、氣生菌絲 C、孢子絲 D、孢子

14、 分生孢子頭呈掃帚狀的霉菌是（ C ）

A. 毛霉 B. 根霉 C. 青霉 D. 曲霉

15、用溶菌酶水解G 細(xì)菌的細(xì)胞壁通?？色@得一種稱為（ D ）的缺壁細(xì)菌。

A 、支原體 B、L 型細(xì)菌 C、原生質(zhì)體 D、球狀體

16、目前用于解釋細(xì)胞膜功能的學(xué)說，主要是（ B ）

A 、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說 B、液態(tài)鑲嵌模型

C 、化學(xué)滲透學(xué)說 D、構(gòu)象假說

17、異染粒在細(xì)菌中的生理功能是（ D ）

A 、碳源貯藏物 B、氮源貯藏物 C、能源貯藏物 D、磷素貯藏物

18、有一種芽孢桿菌可產(chǎn)生具有殺蟲作用的伴孢晶體，這種細(xì)菌稱為（ B ）。

A 、地衣芽孢桿菌 B、蘇云金芽孢桿菌 C、蕈狀芽孢桿菌 D、凝結(jié)芽孢桿菌

19、在以下六類微生物中，不屬于真核微生物的是（ D ）

A 、真菌 B、微藻 C、原生動(dòng)物 D、藍(lán)綠藻 E、地衣

F 、黏菌

20、在固態(tài)基質(zhì)上會(huì)不斷蔓延，以致不能形成菌落的霉菌是（ D ）。

A 、青霉 B、曲霉 C、白地霉 D、根霉

21、決定病毒感染專一性的物質(zhì)基礎(chǔ)是（ B ）

A 、核酸 B、蛋白質(zhì) C、脂類 D、糖類

22、病毒對(duì)（ C ）不敏感

A 、高溫 B、紫外線 C、抗生素 D、干擾素

23、下列微生物耐溫順序?yàn)椋?B ）

A. 營養(yǎng)體＞孢子＞芽孢 B.芽孢＞孢子＞營養(yǎng)體

C.孢子＞營養(yǎng)體＞芽孢 D.芽孢＞營養(yǎng)體＞孢子

24、動(dòng)物病毒在其宿主的單層細(xì)胞培養(yǎng)物上所形成的聚集體，稱為（ C ）

A 、包含體 B、噬菌斑 C、空斑 D、枯斑

25、在噬菌體一步生長曲線中，若人為地用氯仿等破壞宿主細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液呈現(xiàn)侵染性，

此期稱（ C ）。

A 、潛伏期 B、隱晦期 C、胞內(nèi)累積期 D、裂解期 －

26、噬菌體屬于病毒類別中的( A )

A. 微生物病毒 B. 昆蟲病毒 C. 植物病毒 D. 動(dòng)物病毒

27、對(duì)多數(shù)微生物來說，最適宜的碳源是（ B ）

A 、C ·G ·I ·B ·N 類 B、C ·H ·O 類 C、C ·H 類 D、C ·O 類

28、在C ·H ·O 類化合物中，微生物最適宜的碳源是（ A ）

A 、糖類 B、有機(jī)酸類 C、醇類 D、脂類

29、培養(yǎng)真菌時(shí), 培養(yǎng)基常加0.3%乳酸, 其目的是( D )

A. 提供能源 B.提供碳源 C.調(diào)節(jié)pH D.三者都是

30、微酸環(huán)境下適宜生長的微生物是（ C ）

A 、細(xì)菌 B、放線菌 C、真菌 D、病毒

31、下列哪種培養(yǎng)法適用于厭氧菌的培養(yǎng)（ D ）

A. 固體平板 B. 固體斜面 C. 液體表面 D. 高層瓊脂柱

32、以高糖培養(yǎng)酵母菌, 其培養(yǎng)基類型為( A )

A. 加富培養(yǎng)基 B. 選擇培養(yǎng)基 C. 鑒別培養(yǎng)基 D. 普通培養(yǎng)基

33、向培養(yǎng)基中加入青霉素篩選轉(zhuǎn)化子, 此培養(yǎng)基屬（ C ）

A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B.加富培養(yǎng)基 C.選擇培養(yǎng)基 D.鑒別培養(yǎng)基

34、藍(lán)細(xì)菌屬于（ A ）微生物。

A 、光能自養(yǎng)型 B、光能異養(yǎng)型 C、化能自養(yǎng)型

D 、化能異養(yǎng)型

35、葡萄糖和果糖等營養(yǎng)物進(jìn)入原核生物細(xì)胞膜的機(jī)制是通過（ D ）

A 、單純擴(kuò)散 B、促進(jìn)擴(kuò)散 C、主動(dòng)運(yùn)送 D、基團(tuán)移位

36、發(fā)酵是以（ D ）作為最終電子受體的生物氧化過程

A.O2 B.CO2 C.無機(jī)物 D.有機(jī)物

37、高氏1號(hào)培養(yǎng)基適合培養(yǎng)（ B ）

A 、細(xì)菌 B、放線菌 C、酵母菌 D、霉菌

38、要對(duì)含菌量較少的水樣進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)，較好的方法是應(yīng)用固體培養(yǎng)基中的（

A 、固化培養(yǎng)基 B、非可逆性固化培養(yǎng)基

C 、濾膜固體培養(yǎng)基 D、天然固態(tài)培養(yǎng)基

39、要對(duì)細(xì)菌進(jìn)行動(dòng)力觀察，最好采用（ C ）

A 、液體培養(yǎng)基 B、固體培養(yǎng)基 C、半固體培養(yǎng)基 ）法。 C

D 、脫水培養(yǎng)基

40、下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌的侵襲力無直接關(guān)系（ C ）

A. 菌毛 B. 鏈激酶 C. 細(xì)胞膜 D. 莢膜

41、新陳代謝研究中的核心問題是（ C ）。

A 、分解代謝 B、合成代謝 C、能量代謝 D、物質(zhì)代謝

42、反硝化作用的最終產(chǎn)物( C )

A. NH3 B. HNO3 C. N2 D. HNO2

43、在典型生長曲線中，細(xì)胞形態(tài)最大的時(shí)期是（ A ）。

A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期

44、在典型生長曲線中，代時(shí)最短的時(shí)期是（ ）

A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期

45、質(zhì)粒是細(xì)菌的（ B ）。

A. 核質(zhì)DNA B. 胞質(zhì)DNA C. 胞質(zhì)RNA D. 核質(zhì)DNA

46、黏質(zhì)沙雷氏菌在25℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生深紅色的靈桿菌素，可是，當(dāng)培養(yǎng)基在37℃下時(shí)就不產(chǎn)此色素，但若再降到25℃時(shí)又重新恢復(fù)產(chǎn)色素能力，此即（D ）

A. 遺傳型 B. 表型 C. 變異 D. 飾變

47、今從土壤中分離到一株菌，欲對(duì)其進(jìn)行鑒定，首先應(yīng)進(jìn)行的是：（ A ）

A 、獲得該菌株的純培養(yǎng) B、細(xì)胞形態(tài)和習(xí)性水平研究

C 、查找權(quán)威鑒定手冊(cè) D、基因或DNA 水平鑒定

48、干熱滅菌法要求的溫度和時(shí)間為（ C ）

A. 105℃,2小時(shí) B. 121℃,30分鐘 C. 160℃,2小時(shí) D. 160℃,4小時(shí)

49、下列哪種情況不屬于微生物與生物間共生關(guān)系的體現(xiàn)。（ D ）

A. 根瘤 B. VA菌根

C. 反芻動(dòng)物的瘤胃 D. 固氮菌與纖維素分解菌的共培養(yǎng)

50、下列微生物耐溫順序?yàn)椋?B ）

A 、營養(yǎng)體＞孢子＞芽孢 B、芽孢＞孢子＞營養(yǎng)體

C、孢子＞營養(yǎng)體＞芽孢 D、芽孢＞營養(yǎng)體＞孢子

三、填空

1、根據(jù)形態(tài)、結(jié)構(gòu)等生物學(xué)特征，可將微生物劃分為 原核微生物 、 真核微生物 、 非細(xì)胞型微生物 三大類。

2、專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物有 衣原體 、 立克次氏體 、 病毒 。

3、真核微生物的鞭毛為 9+2 型。

4、列出四種觀察細(xì)菌鞭毛的方法 電鏡觀察 、 鞭毛染色法 、 懸滴法 、 半固體穿刺法 。

5、測定噬菌體效價(jià)的常用方法是 雙層平板法 。

6、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)中，與致病性直接相關(guān)的是 菌毛 和 莢膜 。

7、連續(xù)培養(yǎng)器的原理按控制方式可分為 恒濁器 和 恒化器 。

8、細(xì)菌生長繁殖需要營養(yǎng) ， 溫度 ， pH ， 氣體 條件。

9、細(xì)菌的6類營養(yǎng)要素包括 碳源 、 氮源 、 能源 、 生長因子 、無機(jī)鹽 和 水 。

10、營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有四種，其中可以逆濃度梯度運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)的方式有 主動(dòng)運(yùn)輸 和 基團(tuán)轉(zhuǎn)運(yùn) 。

11、將病毒分為三種對(duì)稱體制。例如，腺病毒屬于 二十面立體 對(duì)稱體制，TMV 屬于 螺旋 對(duì)稱體制。

12、利用“曲頸瓶試驗(yàn)”否定自然發(fā)生學(xué)說的是 巴斯德 ，首次分離到衣原體的是我國的微生物學(xué)家 湯飛凡 。

13、肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的特有成分，是由肽和聚糖骨架鏈組成，而后者是 Ｎ－乙酰胞壁酸 和 Ｎ－乙酰葡糖胺 經(jīng) β－１、４糖苷鍵 連接而成。

14、絲狀真菌的結(jié)構(gòu)由孢子和菌絲體組成，其中菌絲按功能分為 營養(yǎng)菌絲 和 氣生菌絲 兩種。

15、細(xì)菌的基本形態(tài)包括 球狀 ， 桿狀 ， 螺形狀 三種。

16、采用原生質(zhì)體融合進(jìn)行微生物遺傳育種時(shí)，制備細(xì)菌的原生質(zhì)體常用 青霉素 處理，酵母菌常用 蝸牛酶 處理獲得相應(yīng)的原生質(zhì)體。

17、根據(jù)核酸的形式，病毒可分為 dsRAN 病毒， dsDNA 病毒， -ssRNA病毒 ， +ssRNA病毒， ssDNA病毒 ， 反轉(zhuǎn)錄病毒 六種。

18、衣原體的生活史包括 始體 和原體 兩個(gè)階段，無繁殖能力的階段是 原體 。

19、證實(shí)核酸是遺傳物質(zhì)的3個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)分別是 轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、_噬菌體侵染實(shí)驗(yàn)和_植物病毒重建實(shí)驗(yàn) 。

20、證明基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)分別是 變量實(shí)驗(yàn) ， 涂布實(shí)驗(yàn) 、 影印實(shí)驗(yàn) 。

四、名詞解釋

1、microorganism ：微生物, 指一大類形體微小、結(jié)構(gòu)簡單的低等生物的總稱。包括真核細(xì)胞型、原核細(xì)胞型和非細(xì)胞結(jié)構(gòu)三大類微生物。

2、真核微生物：是一大類群具有真核生物特點(diǎn)的微生物，包括菌物界的真菌、屬于植物界的顯微藻類和屬于動(dòng)物界的原生動(dòng)物。

3、原核生物：是一大類細(xì)胞微小、只有核區(qū)的單細(xì)胞生物，包括真細(xì)菌和古生菌兩大類。原核生物和真核生物的主要區(qū)別是：原核生物細(xì)胞膜無核膜包裹，缺少由單位膜分隔而成的細(xì)胞器，核糖體為70S 型。

4、古生菌：又稱古細(xì)菌，是一類在進(jìn)化早期就與真細(xì)菌和真核生物的遠(yuǎn)祖相互獨(dú)立演化的原核生物，主要包括一些與地球早期環(huán)境有聯(lián)系的極端微生物，如嗜熱菌、嗜酸菌、嗜鹽菌和產(chǎn)甲烷菌等。主要特點(diǎn)為細(xì)胞壁無肽聚糖，細(xì)胞膜脂由醚鍵連接，以及與細(xì)菌有明顯差別的16S rRNA序列等。

5、立克次氏體：是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間，在許多方面類似細(xì)菌，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物。主要特征為：專性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)的原核生物；有細(xì)胞壁，細(xì)胞較大， G-；產(chǎn)能代謝途徑不完整；以二分裂方式進(jìn)行繁殖；需在相應(yīng)的細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)繁殖；對(duì)熱敏感；對(duì)青霉素等抗生素敏感；為斑疹傷寒、恙蟲病等疾病的病原體；采用“外斐氏反應(yīng)”檢測病原；通過節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其他動(dòng)物。

6、莢膜：糖被的一種，包裹在細(xì)菌細(xì)胞壁外、有固定層次的膠黏物，一般成分為多糖，少數(shù)為多肽或多糖與多肽的復(fù)合物。莢膜具有保護(hù)、貯藏、附著和堆積代謝廢物等生理功能。

7、糖被：包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物，其成分一般為多糖。因厚度不同等原因，可把糖被分成莢膜、黏液層或菌膠團(tuán)等。糖被德生理功能是保護(hù)細(xì)胞、貯藏養(yǎng)料、附著和堆積代謝產(chǎn)物等。

8、 L型細(xì)菌：實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。對(duì)滲透壓敏感，在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落。

9、 鞭毛:某些細(xì)菌細(xì)胞表面著生的一至數(shù)十條長絲狀、螺旋形的附屬物，具有推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)功能，為細(xì)菌的“運(yùn)動(dòng)器官”。

10、水活度：在天然環(huán)境中，微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量，一般用在一定的溫度和壓力條件下, 溶液的蒸汽壓力與同樣條件下純水蒸汽壓力之比表示，即：αw =Pw/Pow。。

11、伴孢晶體：少數(shù)芽孢桿菌形成芽孢時(shí)產(chǎn)生的菱形、方形或不規(guī)則堿溶性蛋白質(zhì)晶體，可

作為生物農(nóng)藥。

12、溶原性細(xì)菌：溫和噬菌體基因組整合到宿主基因組中去，并隨細(xì)菌基因組的復(fù)制而復(fù)制，不能形成子代噬菌體。此時(shí)的宿主菌就是溶原性細(xì)菌。

13、前噬菌體： 溫和噬菌體感染宿主菌后, 其基因整合到宿主染色體上, 隨宿主染色體的復(fù)制而復(fù)制.

14、呼吸：又稱好氧呼吸，指葡萄糖等底物按一定途徑脫氫后，氫經(jīng)完整呼吸鏈的傳遞，最終被外源分子氧接受并釋放水，在此過程中完成氧化磷酸化作用而產(chǎn)生ATP 形式的能量。

15、無氧呼吸：又稱厭氧呼吸，一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機(jī)氧化物或有機(jī)氧化物的生物氧化，是在無氧條件下進(jìn)行的、產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。其特點(diǎn)是葡萄糖等底物按常規(guī)途徑脫氫后，經(jīng)呼吸鏈傳遞氫（或電子），最終由氧化態(tài)的無機(jī)物（NO 3，SO 4等）或有機(jī)物受氫，并完成氧化磷酸化產(chǎn)ATP 功能。

16、發(fā)酵：在無氧條件下，底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力[H]未經(jīng)呼吸鏈而直接交中間產(chǎn)物接受；以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。

17、LPS ：脂多糖（LPS ）：是位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖類物質(zhì)，由類脂A 、核心多糖和O-特異側(cè)鏈三部分組成。

18、PHB ： 聚β-羥丁酸。是一種存在于某些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的一類顆粒狀物質(zhì)，具有貯存能源、碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的物質(zhì)。

19、一步生長曲線：一步生長曲線是指能定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。一步生長曲線可分為三個(gè)時(shí)期：①潛伏期; ②裂解期; ③穩(wěn)定期

20、菌落形成單位（cfu ）：用平板菌落計(jì)數(shù)法對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)的一個(gè)計(jì)數(shù)單位，對(duì)充分分散、稀釋度合適的單細(xì)胞微生物來講，1 cfu 即表示樣品中有一個(gè)活細(xì)胞，但對(duì)成團(tuán)或呈鏈狀、絲狀生長的微生物來說，則cfu 并非一個(gè)活細(xì)胞。

21、生長因子：通常指那些微生物生長所必需而且需要量很小，但微生物自身不能合成的或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物。根據(jù)生長因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)與它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)的生理功能不同，可以將生長因子分為維生素、氨基酸和嘌呤及嘧啶堿基三大類。

22、正常菌群： 在正常人體與外界相通的部位，長期寄居的不同種類和不同數(shù)量的微生物。一般對(duì)人體無害，與機(jī)體相互制約＼相互依存，與機(jī)體保持動(dòng)態(tài)平衡的關(guān)系。

23、條件致病菌：人體的正常微生物菌群一旦進(jìn)入非正常聚居部位，或生態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起人類疾病的微生物。主要包括（1）由于機(jī)體的防衛(wèi)功能減弱2）由于正常菌群寄居部位的改變 (３）不合理使用抗生素等。 -2-

24、消毒：采用一種較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分有害的病原菌，而以被消毒的對(duì)象基本無害的措施。

25、巴氏消毒法:用于啤酒、牛奶等不耐熱的食品德低溫消毒法。主要是消除不耐熱的無芽孢的病原體。有低溫維持法（63℃ ３０min ）和高溫瞬時(shí)法（７２℃ １５s ）．

五、簡答題

1、科赫定律的內(nèi)容及其在科學(xué)研究中的指導(dǎo)意義。

內(nèi)容：①在患病的動(dòng)物體內(nèi)總能發(fā)現(xiàn)特定微生物，而健康的動(dòng)物體內(nèi)則沒有；

②在動(dòng)物體外可以純培養(yǎng)此微生物；

③將該培養(yǎng)物接種到易感動(dòng)物體內(nèi)會(huì)引起同樣的疾??；

④從試驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物中重新分離得到的微生物應(yīng)該是同種微生物。

意義：鑒定一種微生物；確定一種新微生物種類。

2、試述細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與功能。

細(xì)胞壁細(xì)胞壁的主要功能有：①固定細(xì)胞外形和提高機(jī)械強(qiáng)度；②為細(xì)胞的生長、分裂和鞭毛運(yùn)動(dòng)所必需。③阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì). ④賦予細(xì)菌具有特定的抗原性、致病性以及對(duì)抗生素和噬菌體的敏感性。

革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁含90%肽聚糖和10%磷壁酸。革蘭氏陽性菌肽聚糖厚，層數(shù)多，呈網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個(gè)細(xì)胞上。肽聚糖分子是由肽與聚糖兩部分組成，其中的肽有四肽尾和肽橋兩種，聚糖則由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸相互間隔連接而成，呈長鏈骨架狀。磷壁酸是結(jié)合在革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。磷壁酸可分為壁磷壁酸和膜磷壁酸。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁由肽聚糖和外膜。其肽聚糖薄 僅由1~2層，呈網(wǎng)狀分子，只形成較為疏稀、機(jī)械強(qiáng)度較差的肽聚糖網(wǎng)套沒有特殊的肽橋。外膜位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜。

3、有關(guān)鞭毛運(yùn)動(dòng)的機(jī)制曾有過“旋轉(zhuǎn)論”和“揮鞭論”的爭議。1974年，美國學(xué)者M(jìn).Silverman 和M.Simon 曾通過“逆向思維”方式創(chuàng)造性地設(shè)計(jì)了一個(gè)巧妙的“拴菌”試驗(yàn)，即設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地“拴”在載玻片上，然后在光鏡下觀察該細(xì)胞的行為，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮“揮動(dòng)”。從該試驗(yàn)所提供的事實(shí)，你認(rèn)為細(xì)菌是以何種方式運(yùn)動(dòng)的？該試驗(yàn)的“逆向思維”逆在哪里？

“拴菌”試驗(yàn)指把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地”拴”在載玻片上，然后在光鏡下觀察該細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮揮動(dòng)，證明了

細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)是因?yàn)楸廾D(zhuǎn)的結(jié)果，而不是鞭毛“揮動(dòng)”的結(jié)果。其創(chuàng)新思維在于“逆向思維“，通過固定鞭毛的游離端，使細(xì)菌細(xì)胞變成了指示鞭毛運(yùn)動(dòng)的指示物，進(jìn)而在光鏡下就可觀察鞭毛的作用機(jī)制。

4、如何初步判斷并進(jìn)一步驗(yàn)證某一細(xì)菌是否長有鞭毛？

初步判斷可采用半固體瓊脂穿刺培養(yǎng)法和懸滴法（水封片法），進(jìn)一步驗(yàn)證可采用暗視野顯微鏡法和鞭毛染色法。

1）半固體培養(yǎng)基穿刺接種法：將欲檢查的細(xì)菌穿刺接種至牛肉膏蛋白胨半固體直立柱培養(yǎng)基中培養(yǎng)，若細(xì)菌有運(yùn)動(dòng)能力，就會(huì)沿著穿刺線向四周擴(kuò)散生長，使穿刺線變粗且周緣不整齊。無運(yùn)動(dòng)能力的細(xì)菌僅能沿穿刺線生長，穿刺線顯得纖細(xì)濃密和整齊。

2）懸滴法：將菌液滴加在潔凈的蓋玻片中央，在其四周涂上凡士林，然后將它覆蓋在凹玻片上，使菌液對(duì)準(zhǔn)凹槽中央，直接觀察。此法快速、簡便。

3）暗視野顯微鏡法：裝暗視野聚光器，調(diào)節(jié)光源，將1小滴香柏油滴于聚光器頭頸頂端平面上，再將樣品的水封片置于鏡臺(tái)上，使玻片的下表面與透鏡上的香柏油接觸，然后觀察。

4）鞭毛染色法：染色前用媒染劑處理，讓其沉積在鞭毛上，使鞭毛直徑加粗，然后再進(jìn)行染色。常用染色方法有銀染色法、Leifson 氏染色法、Bailey 氏染色法等。

5、試述劃線分離的操作方法。

1）取9ml 無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-20ml 營養(yǎng)瓊脂, 讓其冷凝成平板。

2）左手拿上述平板, 右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條。

3）將接種環(huán)在火焰上滅菌, 左手平板轉(zhuǎn)動(dòng)大約70度, 用滅菌接種環(huán)通過第一次劃線的地方作二次劃線, 以此類推, 重復(fù)操作多次。

6、簡述微生物純種分離方法中的平板表面劃線法、平板表面涂布法和瓊脂培養(yǎng)基澆注法，并說說它們有何優(yōu)點(diǎn)。

平板劃線法：將混雜在一起的不同種微生物或同種微生物群體中的不同細(xì)胞，通過在分區(qū)的平板表面上作多次畫線稀釋，形成較多的獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)而繁殖成相互獨(dú)立的多個(gè)單菌落。

澆注平板法：將待分離的試樣用生理鹽水等稀釋液作梯度系列稀釋后，取其中一合適稀釋度的少量菌懸液加至無菌培養(yǎng)皿中，立即倒入融化的固體培養(yǎng)基，經(jīng)充分混勻后，置適溫下培養(yǎng)，在其表面和內(nèi)層出現(xiàn)的許多單菌落。該法適合兼性厭氧的細(xì)菌和酵母菌分離。

涂布平板法：取少量梯度稀釋菌懸液，置于已凝固的無菌平板培養(yǎng)基表面，然后用無菌的涂布玻棒把菌液均勻地涂布在整個(gè)平板表面，經(jīng)培養(yǎng)后，在平板培養(yǎng)基表面會(huì)形成多個(gè)獨(dú)立分布的單菌落。該法適合好氧性或有氣生菌絲的放線菌和細(xì)菌分離。

優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、設(shè)備簡單、分離效果好。

7、某微生物發(fā)酵廠的發(fā)酵液出現(xiàn)疑似噬菌體感染的異常情況，試設(shè)計(jì)一簡便快速實(shí)驗(yàn)證實(shí)之。

在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板上涂布接種大腸桿菌，同時(shí)接種疑似噬菌體感染的發(fā)酵液（提前進(jìn)行適當(dāng)稀釋），培養(yǎng)后若出現(xiàn)噬菌斑，即證明該發(fā)酵液受到噬菌體感染。

8、 何謂病毒？以噬菌體為例，試述病毒的增殖周期。

病毒是超顯微的，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的，具有以下特點(diǎn)：①無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生；②沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全，不能進(jìn)行代謝活動(dòng)；③個(gè)體極小，能通過細(xì)菌濾器；④對(duì)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。它們?cè)诨罴?xì)胞外具有一般化學(xué)大分子特征，一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。

病毒增殖周期五個(gè)階段

1、吸附 吸附是病毒感染宿主細(xì)胞的前提，具有高度的專一性。在通常情況下，敏感細(xì)胞表面具有特異性表面接受部位，可與相應(yīng)的病毒結(jié)合。

2、侵入 病毒侵入的方式 取決于宿主細(xì)胞的性質(zhì)，尤其是它的表面結(jié)構(gòu)。一般來說有三種情況：①整個(gè)病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞；②核衣殼進(jìn)入宿主細(xì)胞；③只有核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞。

3、生物生物合成 包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。首先，噬菌體以其核酸中的遺傳信息向宿主細(xì)胞發(fā)出指令并提供“藍(lán)圖”，使宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)按次序地逐一轉(zhuǎn)向合成噬菌體的組分和“部件”，合成所需“原料”可通過宿主細(xì)胞原有核酸等的降解、代謝庫內(nèi)的貯存物或從環(huán)境中取得。

烈性噬菌體體的增殖方式按核酸類型的不同主要分成三類：即①按早期、次早期和晚期基因的順序來進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯和復(fù)制的雙鏈DNA 噬菌體的增殖方式；②按“滾環(huán)”模型復(fù)制單鏈DNA 的增殖方式；③按“花朵”模式復(fù)制A 蛋白（成熟蛋白）、衣殼蛋白和復(fù)制酶蛋白的增殖方式。

4、裝配 病毒核酸的復(fù)制與病毒蛋白質(zhì)的合成是分開進(jìn)行的，由分別合成好的核酸與蛋白質(zhì)組成完整的新的病毒粒子的過程。

5、釋放 成熟的病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到外界的過程稱為病毒釋放。病毒的釋放是多樣的，有的通過破裂，出芽作用或通過細(xì)胞之間的接觸而擴(kuò)散。

9、培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的含量間一般遵循何種規(guī)律？其中的原因是什么？

由于微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間的比例是穩(wěn)定的，因此，設(shè)計(jì)微生物培養(yǎng)基時(shí)，考慮微生物細(xì)胞組成元素的比例有重要的意義。培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比直接影響微生物的生長繁殖和（或）代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比（C ／N ）的影響較大。在大多數(shù)化能異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，除水分外，碳源的含量最高，其次是氮源、大量元素和生長因子，它們之間大體上存在著10倍序列的遞減趨勢，即：

要素：

含量： H 2O ＞ C 源+能源 ＞ N 源 ＞ P 、S ＞ K 、Mg ＞ 生長因子 (～10-1) (～10-2) (～10-3 ) (～10-4 ) (～10-5 ) (～10-6 )

10、試述革蘭氏染色的步驟及機(jī)理。

革蘭氏染色的步驟： 結(jié)晶紫初染、碘液媒染、 95 ％乙醇脫色、紅色染料復(fù)染 4 步； 革蘭氏染色的機(jī)制： 革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通過初染和媒染，在細(xì)菌細(xì)胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。

G + 細(xì)菌由于細(xì)胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯(lián)緊密，故用乙醇洗脫時(shí)，肽聚糖層網(wǎng)孔會(huì)因脫水而明顯收縮，再加上的 G + 細(xì)菌細(xì)胞壁基本上不含類脂，故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙，因此，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物仍牢牢阻留在其細(xì)胞壁內(nèi)，使其呈現(xiàn)藍(lán)紫色。

G - 細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散，故遇乙醇后，肽聚糖層網(wǎng)孔不易收縮，加上它的類脂含量高，所以當(dāng)乙醇將類脂溶解后，在細(xì)胞壁上就會(huì)出現(xiàn)較大的縫，這樣結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細(xì)胞壁。因此，通過乙醇脫色，細(xì)胞又呈現(xiàn)無色。這時(shí)，再經(jīng)番紅等紅色染料復(fù)染，就使 G - 細(xì)菌獲得了新的顏色 —— 紅色，而 G + 細(xì)菌則仍呈藍(lán)紫色（實(shí)為紫中帶紅）。

11、什么是溶源菌？它有何特點(diǎn)？如何檢出溶源菌？

在染色體組上整合有溫和噬菌體并能進(jìn)行正常生長繁殖的宿主稱為溶源菌。 特點(diǎn)：能“收養(yǎng)”溫和噬菌體并能與其長期共存，通常不呈現(xiàn)對(duì)宿主細(xì)胞有害的影響；常以較低頻率（10－10）進(jìn)行自發(fā)裂解（能使位于宿主基因組上的整合態(tài)前噬菌體從染色體上解離出來），使前噬菌體由整合態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)的營養(yǎng)態(tài)（脫離宿主核基因組而處于積極復(fù)制、合成和裝配的狀態(tài)）；溶源菌對(duì)同種或關(guān)系密切與的噬菌體具有免疫性（免遭其再侵染指特性）；溶源菌也會(huì)失去前噬菌體而復(fù)愈為正常菌株。 -3-5

檢測某一菌株是否屬于溶源菌，可利用溶源菌所攜帶的前噬菌體的低頻裂解性，與其相對(duì)應(yīng)敏感菌株以適當(dāng)比例混合，然后與瓊脂培養(yǎng)基混合后倒平板，經(jīng)培養(yǎng)后形成特殊菌落（中央有溶源菌的小菌落，四周有透明圈圍著）。

12、為什么說土壤是人類最豐富的菌種資源庫？如何從中篩選所需要的菌種（以酵母菌為例）？

土壤具備了各種微生物生長發(fā)育的優(yōu)越條件，包括營養(yǎng)、水分、空氣、酸堿度、滲透壓和溫度等，故其中各種微生物的含量極為豐富，尤以細(xì)菌、放線菌居多，真菌居中，藻類、原生動(dòng)物較少。

篩選的一般步驟有：采集菌樣——富集培養(yǎng)——純種分離——性能測定——菌種保藏。

13、試從形態(tài)、結(jié)構(gòu)、大小、繁殖方式及生活條件等方面比較放線菌、酵母菌及病毒的異同。 放線菌 酵母菌 病毒

形態(tài)比較 多為絲狀放射狀 多為圓形，卵圓形 球狀，絲狀，磚頭狀等 結(jié)構(gòu)比較 菌絲和孢子 單細(xì)胞 無細(xì)胞結(jié)構(gòu)

大小比較 直徑較?。?μm 左右） 直徑較大（幾μm ） 最?。?00nm 左右），

繁殖方式比較 孢子和菌絲 芽殖，裂殖，孢子 復(fù)制 生活條件 可人工培養(yǎng)，偏堿性 可人工培養(yǎng)，偏酸性 活細(xì)胞或組織培養(yǎng)

14、什么是細(xì)菌的生長曲線？生長曲線對(duì)微生物發(fā)酵生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義?

細(xì)菌接種到適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基后，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌數(shù)為縱坐標(biāo)，根據(jù)不同培養(yǎng)時(shí)間時(shí)細(xì)菌數(shù)量的變化，可以作出一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線，這種曲線稱為生長曲線稱為生長曲線。一條典型的生長曲線至少可以分為遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長時(shí)期。

遲緩期：細(xì)菌的數(shù)量維持恒定。在工業(yè)發(fā)酵和科研中遲緩期會(huì)增加生產(chǎn)周期而產(chǎn)生不利的影響，因此應(yīng)該采取一定的措施：①通過遺傳學(xué)方法遲緩期縮短；②利用對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞作為“種子”； ③接種前后培養(yǎng)基組成不要相差太大；④適當(dāng)擴(kuò)大接種量等方式縮短遲緩期。對(duì)數(shù)生長期：細(xì)菌數(shù)量呈對(duì)數(shù)增加，細(xì)菌生長是平衡生長。對(duì)數(shù)生長期細(xì)菌的代謝活性、酶活性高而穩(wěn)定，大小比較一致，生活力強(qiáng)，因而它廣泛地在生產(chǎn)上用作“種子”和在科研上作為理想的實(shí)驗(yàn)材料。穩(wěn)定生長期：由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH 等環(huán)境變化，逐步不適宜于細(xì)菌生長，細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量。穩(wěn)定生長期的活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。如果及時(shí)采取措施，補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件，如對(duì)好氧菌進(jìn)行通氣、攪拌或振蕩等可以延長穩(wěn)定生長期，獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。衰亡

期：細(xì)菌死亡速率逐步增加和活細(xì)菌逐步減少。細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶。

15、什么是大腸菌群？檢驗(yàn)飲用水的質(zhì)量時(shí)，為什么要選用大腸桿菌群數(shù)做為主要指標(biāo)？我國衛(wèi)生部門對(duì)此有何規(guī)定？

大腸菌群指任何可發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的G 、桿狀、無芽孢、兼性厭氧的腸道桿菌，主要是大腸桿菌和一些產(chǎn)氣腸桿菌等。

因?yàn)檫@類細(xì)菌是溫血?jiǎng)游锬c道中的正常菌群，數(shù)量極多，用它作指標(biāo)，可以靈敏地推斷該水源是否曾與動(dòng)物糞便接觸以及污染程度如何，由此即可避免直接去計(jì)算出數(shù)量極少的腸道傳染病（霍亂、傷寒、痢疾等）病原體所帶來的難題。

我國衛(wèi)生部門規(guī)定的飲用水標(biāo)準(zhǔn)是：1mL 自來水中的細(xì)菌總數(shù)不可超過100個(gè)（37℃，培養(yǎng)24h ），1000mL 自來水中大腸菌群數(shù)則不超過3個(gè)（37℃，培養(yǎng)48h ）。

16、簡述濕熱滅菌法效果較干熱滅菌法效果好的原因。

1) 濕熱滅菌法特點(diǎn)：溫度低、時(shí)間短、滅菌效果好。

2) 滅菌效果好的原因：

菌體內(nèi)含水量越高凝固溫度越低。

汽冷凝會(huì)放出潛熱。

飽和水蒸汽穿透力強(qiáng)。

濕熱易破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定性，主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。

濕熱易破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定性，主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。

17、菌種為何會(huì)衰退？ 如何初步判斷一個(gè)菌種是否衰退？如何防止菌種衰退？如何復(fù)壯？

衰退原因：基因自發(fā)突變。

具體表現(xiàn)有：原有形態(tài)性狀變得不典型了，生長速度變慢，代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降，致病菌對(duì)宿主侵染能力下降，對(duì)外界不良條件的抵抗能力下降。

防止菌種衰退：1）控制傳代次數(shù)；2）創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件；3）利用不易衰退的細(xì)胞接種；4）采用有效的菌種保藏方法。

復(fù)壯：純種分離、利用寄主復(fù)壯、淘汰衰退的個(gè)體。

18、歷史上證明核酸是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)有哪幾個(gè)？圖示并說明Lederberg 等的影印平板培養(yǎng)試驗(yàn)，并指出其證明突變自發(fā)、隨機(jī)和不對(duì)應(yīng)性的關(guān)鍵步驟。為什么說影印平板實(shí)驗(yàn)使自發(fā)突變論者徹底擺脫了“馴養(yǎng)論”者的長期糾纏和責(zé)難？

1） 經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)：Griffith 的肺炎鏈球菌動(dòng)物轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)、S 菌的無細(xì)

胞抽提液試驗(yàn)；Avery 等的S 菌生化組分轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。 -

2） 噬菌體感染實(shí)驗(yàn)

3） 植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)

Lederberg 等的影印平板培養(yǎng)試驗(yàn)圖示：

Lederberg 等的影印平板培養(yǎng)試驗(yàn)關(guān)鍵步驟：影印

影印平板實(shí)驗(yàn)使自發(fā)突變論者徹底擺脫了“馴養(yǎng)論”者的長期糾纏和責(zé)難的理由：該實(shí)驗(yàn)的巧妙設(shè)計(jì)，使實(shí)驗(yàn)中的原始鏈霉素敏感株在根本未觸及鏈霉素的情況下，就可高效篩選到大量抗鏈霉素突變株。

19、舉例說明微生物與環(huán)境間的關(guān)系。

1）互生：較松散聯(lián)合，可以是一方得利，或雙方有利。如好氧性自生固氮菌與纖維素分解菌、人腸道中正常菌群與人、工業(yè)發(fā)酵中的混菌培養(yǎng)。

2）共生：緊密結(jié)合在一起，高度發(fā)展時(shí)，形成特殊共住體，生理上有分工，組織、形態(tài)上產(chǎn)生新結(jié)構(gòu)。如地衣、根瘤菌與豆科植物、菌根菌與植物、白蟻腸道中的細(xì)菌、瘤胃微生物與反芻動(dòng)物。

3）寄生：一種生物生活在另一種生物表面或體內(nèi)，從后者獲得營養(yǎng)。如噬菌體與細(xì)菌、蛭弧菌與假單胞菌、植物病原微生物、動(dòng)物病原微生物。

4）拮抗：一種生物產(chǎn)生不利于另一種生物生存的代謝物質(zhì)或改變環(huán)境條件，抑制甚至殺死另一種生物的現(xiàn)象。如泡菜中的乳酸菌和腐敗菌、產(chǎn)抗生素微生物和其它微生物。

5）捕食：一種生物直接吞食另一種生物。如原生動(dòng)物捕食細(xì)菌和藻類、捕食性真菌捕食土壤線蟲。

20、簡述微生物在環(huán)境保護(hù)中的作用。

1） 環(huán)境污染概念；水體的污染——富營養(yǎng)化介紹；

2） 污水的微生物處理：原理，處理方法（完全混合曝氣法，生物轉(zhuǎn)盤法）；

3） 固體有機(jī)垃圾的微生物處理：原理（利用好氧性高溫微生物），處理方法（有機(jī)垃圾好

氧生物反應(yīng)器）；

4） 沼氣發(fā)酵與環(huán)境保護(hù)：減少畜禽糞便、植物殘?bào)w的污染；

5） 微生物可做為環(huán)境監(jiān)測和污染控制中的指示生物：利用艾姆斯試驗(yàn)法檢測“三致”物質(zhì)，

發(fā)光細(xì)菌檢測水質(zhì)污染程度。