今天和瑞禧小編一起來看看PLGA納米顆粒表面偶聯(lián)靶向結(jié)合T細(xì)胞的CD3抗體的制備過程。

雙特異性抗體是含有2種特異性抗原結(jié)合位點(diǎn)的人工抗體,能在靶細(xì)胞和功能分子(細(xì)胞)之間架起橋梁,激發(fā)具有導(dǎo)向性的免疫反應(yīng),是基因工程抗體的一種。目前針對CD19、CD20、ErbB2/ErbB3等靶點(diǎn)的雙特異性抗體均已經(jīng)取得良好效果。

在傳統(tǒng)雙特異性抗體研究基礎(chǔ)上，利用生物可降解材料PLGA(在體內(nèi)降解產(chǎn)物為CO:和HO)制備成納米顆粒,然后利用化學(xué)偶聯(lián)方法將靶向細(xì)胞相關(guān)抗原MUC1的抗體和可識別T細(xì)胞的CD3抗體偶聯(lián)到納米顆粒表面,從而形成在一個(gè)納米球表面同時(shí)連接著多個(gè)2種抗體分子的雙特異性抗體,達(dá)到輔助T細(xì)胞。

MUC1是由mucl基因表達(dá)的一種高糖基化(糖基化大于50%)、大分子(M,>200 000)蛋白,是跨膜分子。糖基化不完全的MUC1廣泛分布并異常豐富地表達(dá)于細(xì)胞表面。因此MUC1成為一種非常有潛力的靶標(biāo)。CD3是T細(xì)胞表面廣泛表達(dá)的一種標(biāo)志物,本研究制備的MUC1。

制備方法：PLGA納米顆粒與抗體CD3及MUC1偶聯(lián)納米顆粒與抗體的偶聯(lián)采用EDC/NHS化學(xué)偶聯(lián)法。利用5mg/ml的EDC和NHS混合溶劑(現(xiàn)配現(xiàn)用,溶劑為50 mmolL的 MES溶液, pH=5.0)室溫活化納米顆粒1 h;將活化后的納米顆粒離心收集﹐然后用連接反應(yīng)液(0.1 mmol/L PB溶液, pH=8.0)洗滌納米顆粒.1次,將需要連接的抗體等量混合加人到連接反應(yīng)液,然后用含有抗體的連接反應(yīng)液重懸納米顆粒，室溫連接反應(yīng)1 h,反應(yīng)結(jié)束后離心收集納米顆粒，用PBS溶液洗滌納米顆粒2次,然后再重懸到PBS溶液中放4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

相關(guān)產(chǎn)品：

PLGA納米粒包裹阿霉素

全氟戊烷/四氧化三鐵修飾聚乳酸納米粒子

全氟戊烷/錳卟啉/紫杉醇修飾聚乳酸納米粒子

包裹地塞米松的PLGA 納米粒子

包裹醋酸地塞米松的PEG-PLGA納米粒

殼聚糖修飾的載胰島素聚乳酸納米粒子

載左氧氟沙星的PLGA亞微粒

包載熒光探針香豆素-6的PLGA納米粒

PLGA載洛伐他汀聚合物納米粒子

紅細(xì)胞膜包裹PLGA納米粒

載黃芩苷的聚乳酸納米粒

載有補(bǔ)骨脂素的PLGA納米粒,

載有丁香苦苷的聚乳酸納米粒（SYR-PLGA）納米粒

帶負(fù)電荷的牛血紅蛋白納米粒

聚乳酸接枝透明質(zhì)酸納米粒 (HA-PLGA)

載甲氨蝶呤聚乳酸納米粒子

包載鹽酸阿霉素的TA-Fe(III)修飾的PLGA納米顆粒

包雙環(huán)醇的PLGA納米顆粒

包載黃豆苷元的PLGA納米顆粒

負(fù)載羧甲基殼聚糖的多孔聚乳酸PLGA納米顆粒

封裝納米胰島素的PLGA納米顆粒

PLGA納米顆粒負(fù)載肝素酶

包溴丁苯酞PLGA納米顆粒

負(fù)載奧沙利鉑的mPEG-PLGA納米粒子

載SDF-1的PLGA納米粒

裝載肝素PLGA納米粒

殼聚糖修飾的丹皮酚PEG-PLGA納米粒

載魚藤酮的PLGA納米粒

RXYWX.2022.4.8