細(xì)胞周期Cell Cycle

細(xì)胞周期(cell cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個(gè)階段。

間期（interphase）分為三個(gè)階段：DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）

M期（mitosis）即細(xì)胞分裂期，分為：前期，中期，后期和末期。

細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)主要是通過G1期的阻留而實(shí)現(xiàn)的，G0期即指細(xì)胞處于阻留的狀態(tài)。細(xì)胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停止分裂的一個(gè)階段。但在一定的刺激下，又可進(jìn)入細(xì)胞周期，合成DNA并進(jìn)行分裂。

G0期的特點(diǎn)為：①未受刺激的G0細(xì)胞，DNA合成與細(xì)胞分裂的潛力仍然存在; ②當(dāng)G0細(xì)胞受到刺激而增殖時(shí)，又能合成DNA并進(jìn)行細(xì)胞分裂。細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)主要是通過G1期的阻留而實(shí)現(xiàn)的，G0期即指細(xì)胞處于阻留的狀態(tài)。細(xì)胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停止分裂的一個(gè)階段。但在一定的刺激下，又可進(jìn)入細(xì)胞周期，合成DNA并進(jìn)行分裂。

技術(shù)原理

PI染色-流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的原理：

碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對(duì)中并與之結(jié)合的熒光染料，無堿基特異性。PI與雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被PI染色后，可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可以進(jìn)行細(xì)胞周期的分析。

由于細(xì)胞周期各時(shí)相的DNA 含量不同,通常正常細(xì)胞的G1/ G0期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N) ,而G2/ M期具有四倍體細(xì)胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍體和四倍體之間。PI可以與DNA結(jié)合，其熒光強(qiáng)度直接反映細(xì)胞內(nèi)DNA的含量。因此,通過流式細(xì)胞儀結(jié)合PI染色法對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以將細(xì)胞周期各時(shí)相區(qū)分為G1/G0期、S期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對(duì)應(yīng)的各細(xì)胞周期可通過特殊軟件計(jì)算各時(shí)相的細(xì)胞百分率。

結(jié)果示例

參考文獻(xiàn)：

A. https://ibook.antpedia.com/z/93690.html

B,C. Xie, Kewei et al. “Yes-associated protein regulates podocyte cell cycle re-entry and dedifferentiation in adriamycin-induced nephropathy.” Cell death & disease vol. 10,12 915. 4 Dec. 2019, doi:10.1038/s41419-019-2139-3