辣根過氧化物酶

辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合物是通過改良的Nakane和Kawaoi程序制備的（J.Histochem.Ceythem.1974.22，1084）。過氧化物酶結(jié)合物通常用于免疫組織化學(xué)、免疫印跡和ELISA。親和純化的抗辣根過氧化物酶和結(jié)合物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于含HRP試劑的信號(hào)放大。對于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的免疫染色，使用抗辣根過氧化物酶的優(yōu)點(diǎn)是減少了背景，因?yàn)榭贵w不能識(shí)別在這些細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性過氧化物酶樣酶。

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HRP易提取、價(jià)格低廉、性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱及有機(jī)溶劑，與抗原或抗體偶聯(lián)后，活性很少受損失，在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。

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艾美捷/HRP標(biāo)記-純化兔抗雞IgY適用于大部分免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，基于免疫電泳和/或ELISA，抗體與雞IgY重鏈的Fc部分反應(yīng)，但與雞免疫球蛋白的Fab部分不反應(yīng)。未檢測到針對非免疫球蛋白血清蛋白的抗體?？贵w可能與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。

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通過免疫親和層析從抗血清中分離出完整的IgG抗體。它們有一個(gè)Fc部分和兩個(gè)抗原結(jié)合Fab部分，通過二硫鍵連接在一起，因此它們是二價(jià)的。據(jù)報(bào)道，平均分子量約為160 kDa?？贵w的整個(gè)IgG形式適用于大多數(shù)免疫檢測程序，且最具成本效益。

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艾美捷/HRP標(biāo)記-純化兔抗雞IgY（IgG），F(xiàn)c端二抗其它參數(shù)：

cat#：303-035-008

目標(biāo)：雞

宿主：兔子

抗體格式：全I(xiàn)gG

特異性：IgY（IgG），F(xiàn)c片段特異性

結(jié)合物：辣根過氧化物酶

類別：全I(xiàn)gG親和純化抗體

克隆性：多克隆

物理狀態(tài)：凍干固體

儲(chǔ)存和再水化：將凍干固體儲(chǔ)存在2-8°C下。用指示體積的dH2O再水化，如果不清楚，則用離心機(jī)進(jìn)行離心。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作稀釋液。產(chǎn)品在2-8°C溫度下作為未稀釋液體穩(wěn)定約6周。

補(bǔ)液后的長期儲(chǔ)存：等分并在-70°C或更低溫度下冷凍。避免反復(fù)凍融。或者，添加等量的甘油（ACS級(jí)或更好），最終濃度為50%，并作為液體儲(chǔ)存在-20°C下。

有效期：自補(bǔ)液之日起一年。如果試驗(yàn)結(jié)果可用于預(yù)期用途，則有效期可延長。

純度：抗體通過免疫親和層析從抗血清中純化，使用抗原與瓊脂糖珠偶聯(lián)。

緩沖液：0.01M磷酸鈉，0.25M氯化鈉，pH 7.6

穩(wěn)定劑：15毫克/毫升牛血清白蛋白（不含IgG，不含蛋白酶）

防腐劑：無（警告：使用疊氮化鈉作為防腐劑將顯著抑制辣根過氧化物酶的酶活性。）

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艾美捷/HRP標(biāo)記-純化兔抗雞IgY建議的工作濃度或稀釋范圍：

1:500-1:5000用于免疫組織/細(xì)胞化學(xué)

1:5000-1:100000用于ELISA和帶有顯色底物的Western印跡

1:10000-1:200000用于ECL底物的蛋白質(zhì)印跡

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稀釋系數(shù)以范圍的形式表示，因?yàn)閦ui＋稀釋度是許多因素的函數(shù)，例如抗原密度、滲透性等。實(shí)際使用的稀釋度須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。