2021年NK細(xì)胞很火，先是北京北醫(yī)三院張煜醫(yī)生和上海新華醫(yī)院陸巍醫(yī)生就一個(gè)晚期胃腸道腫瘤病人治療展開(kāi)的一系列事件，NK細(xì)胞治療成為核心焦點(diǎn)。

再是11月11日，中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心審批通過(guò)由國(guó)健呈諾生物科技（北京）有限公司研發(fā)的針對(duì)“晚期上皮性卵巢癌治療的靶向間皮素（Mesothelin，MSLN）嵌合抗原受體NK細(xì)胞（CAR-NK）注射液”（簡(jiǎn)稱(chēng)：CAR-NK注射液）的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)。

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然后就是上周，11月24日，中國(guó)首個(gè)自體NK細(xì)胞注射液(Autologous Natural Killer Cell Injection)，申請(qǐng)境內(nèi)生產(chǎn)藥品注冊(cè)臨床試驗(yàn)獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局受理。本品屬于全新治療用生物制品，按照注冊(cè)分類(lèi)1類(lèi)申報(bào)1期臨床試驗(yàn)。?該藥由廣州達(dá)博生物制品有限公司自主研發(fā)的抗腫瘤免疫治療藥物；臨床適應(yīng)癥為：消化道腫瘤。

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一、 NK細(xì)胞潛力巨大

自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)于20世紀(jì)70年代被發(fā)現(xiàn)，因其具有快速殺滅病毒和腫瘤細(xì)胞的內(nèi)在能力而得名。

NK細(xì)胞在腫瘤免疫監(jiān)測(cè)中起主導(dǎo)作用。近年來(lái)，多項(xiàng)基礎(chǔ)研究，結(jié)合細(xì)胞RNA測(cè)序技術(shù)，揭示了NK細(xì)胞除了對(duì)轉(zhuǎn)化細(xì)胞具有天然的細(xì)胞毒性外，還能分泌多種細(xì)胞因子和趨化因子，從而進(jìn)一步調(diào)節(jié)免疫微環(huán)境。這些特點(diǎn)表明NK細(xì)胞在腫瘤治療中具有巨大的潛力。

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NK細(xì)胞作用機(jī)制：它既可以作為先天細(xì)胞毒性效應(yīng)，也可以作為調(diào)節(jié)先天免疫和適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)因子：

A???作為先天殺傷細(xì)胞，應(yīng)激誘導(dǎo)的配體(“自我誘導(dǎo)”)和降低的MHC I表達(dá)水平(“自我缺失”)分別可被NK細(xì)胞上的激活受體和抑制受體識(shí)別，其平衡決定了NK細(xì)胞的活化狀態(tài)。

B???NK細(xì)胞活化后，可通過(guò)顆粒酶B和穿孔素分泌顆粒、死亡受體/配體相互作用和抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒性等途徑誘導(dǎo)靶細(xì)胞溶解。

C? ?活化的NK細(xì)胞能分泌一系列的細(xì)胞因子和趨化因子，促進(jìn)DC的成熟和募集，從而進(jìn)一步調(diào)節(jié)T細(xì)胞反應(yīng)，包括細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞和Th細(xì)胞活化。

二、NK細(xì)胞在胃腸道腫瘤的臨床應(yīng)用

NK細(xì)胞具有較強(qiáng)的抗腫瘤能力和對(duì)其他免疫細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用，利用NK細(xì)胞治療已成為胃腸道腫瘤免疫治療的下一個(gè)前沿。由于NK細(xì)胞在癌癥患者中經(jīng)常不足或功能失調(diào)，因此過(guò)繼性的NK細(xì)胞（簡(jiǎn)單說(shuō)就是補(bǔ)充N(xiāo)K細(xì)胞）是腫瘤免疫治療的重要辦法。對(duì)于胃腸道腫瘤，已經(jīng)嘗試了不同來(lái)源的NK細(xì)胞治療多種不同的胃腸道腫瘤，臨床試驗(yàn)匯總表如下圖：（可點(diǎn)擊放大查看）

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在一期臨床試驗(yàn)中(Umin UMIN000007527)，Sakamoto等人用OK432、IL-2和改良的FN-CH 296誘導(dǎo)的T細(xì)胞刺激胃腸道癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，成功地將NK細(xì)胞擴(kuò)增至4720倍，擴(kuò)大NK細(xì)胞轉(zhuǎn)移的臨床安全性得到進(jìn)一步驗(yàn)證，未觀察到意外的NK細(xì)胞輸注相關(guān)毒性。

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除了外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)外，臍帶血、人胚胎干細(xì)胞(HESCs)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(IPSCs)也是獲得具有較高擴(kuò)增效率和抗腫瘤功能的NK細(xì)胞的寶貴來(lái)源。

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徐等人用膜結(jié)合白細(xì)胞介素-21(IL-21)從UCB中擴(kuò)增NK細(xì)胞。這些NK細(xì)胞能有效地殺傷大腸癌細(xì)胞株，并能分泌干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)等細(xì)胞因子和趨化因子。

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FT 500是從iPSC衍生出來(lái)的現(xiàn)成NK細(xì)胞，它能有效地產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和趨化因子，幫助吸收和激活T細(xì)胞，結(jié)合FT500和免疫檢查點(diǎn)抑制劑有望對(duì)抗癌癥患者的耐藥性。

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更重要的是，從健康供者中分離出的同種異體NK細(xì)胞的安全性和有效性已經(jīng)在血液惡性腫瘤和實(shí)體腫瘤中得到證實(shí)。

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利用NK細(xì)胞株如NK-92是另一種選擇，其優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞均勻，易于處理和擴(kuò)展。此外，它們對(duì)腫瘤的細(xì)胞毒性也已通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)。然而，關(guān)于這種方法的臨床療效的信息很少，在一期臨床試驗(yàn)中招募結(jié)腸癌和肺癌患者，采用Hsp 70激活的自體NK細(xì)胞。雖然這些患者NK細(xì)胞毒性增強(qiáng)，無(wú)任何不良反應(yīng)，但由于腫瘤負(fù)擔(dān)重和樣本數(shù)量有限，臨床未見(jiàn)明顯反應(yīng)。

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受嵌合抗原受體T細(xì)胞(CAR-T)啟發(fā)，CAR修飾NK細(xì)胞也是可行的。

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Li等人將CARS注入IPSC衍生NK細(xì)胞，與IPSC-NK和PBMC衍生NK細(xì)胞相比，具有更高的增殖效率和細(xì)胞毒性。

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在對(duì)結(jié)直腸癌患者的臨床試驗(yàn)中，用NKG2D-CAR轉(zhuǎn)染NK細(xì)胞，構(gòu)建NKG2D-CAR-NK細(xì)胞，用NKG2D-CAR-NK治療的患者臨床緩解程度不同，表明CAR-NK在腫瘤治療中有一定的應(yīng)用前景。

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經(jīng)PD1-DAP 10/NKG2D雙特異性嵌合修飾的NK-92細(xì)胞體外殺傷作用增強(qiáng)，體內(nèi)抑瘤作用增強(qiáng)。

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另一種人NK細(xì)胞系YT經(jīng)特異性識(shí)別人癌胚抗原(CEA)的嵌合免疫球蛋白T細(xì)胞受體修飾，該抗原在結(jié)直腸癌、胃癌、胰腺癌等胃腸道腫瘤中常被過(guò)度表達(dá)，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了改良NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。

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到目前為止，使用Car-NK 治療胃腸道癌有三個(gè)階段的1/2臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中（NCT 02839954；NCT 03941457；NCT 03940820)。

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除了NK細(xì)胞過(guò)繼轉(zhuǎn)移，增加NK細(xì)胞在腫瘤部位的浸潤(rùn)外。還有就是恢復(fù)NK細(xì)胞功能（因?yàn)槟[瘤病人的NK細(xì)胞數(shù)量不足或功能被破壞）的方式。免疫檢查點(diǎn)抑制劑、單克隆抗體和某些細(xì)胞因子已被嘗試用于恢復(fù)或增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。

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無(wú)論是坊間火熱的NK細(xì)胞治療，還是CAR-NK細(xì)胞藥物形式的臨床試驗(yàn)，NK細(xì)胞越來(lái)越“熱”，也成為了科學(xué)家的“心頭好”。相信隨著科學(xué)家更為深入的探索，免疫細(xì)胞研究將會(huì)迎來(lái)更多新的進(jìn)展。

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同立海源生物自主研發(fā)的AMMS?NK細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒套裝，已通過(guò)美國(guó)FDA DMF II類(lèi)備案（備案號(hào)DMF 035588）。該款試劑盒采用自體外周血或臍血細(xì)胞中分離得到的單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)體外操作使NK細(xì)胞活化擴(kuò)增，最終得到高純度高效應(yīng)的NK細(xì)胞。經(jīng)過(guò)大量的測(cè)試數(shù)據(jù)表明，該款試劑盒處于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先地位。

關(guān)于同立海源生物：

北京同立海源生物科技有限公司，專(zhuān)注細(xì)胞和基因治療（CGT），提供一站式核心原料和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品涉及真核重組蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒、藥物靶點(diǎn)蛋白、工具酶、細(xì)胞培養(yǎng)基。提供重組蛋白設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)、定制生產(chǎn)、委托灌裝凍干、委托細(xì)胞制備等服務(wù)。公司建有符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)的萬(wàn)級(jí)潔凈車(chē)間，具備一類(lèi)醫(yī)療器械生產(chǎn)資質(zhì)，通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證。