藥企怎樣殺滅嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑?

2023-09-13 15:58

關(guān)鍵詞：嗜熱脂肪芽孢桿菌，生物指示劑，殺滅嗜熱芽孢

嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)，廣泛分布于土壤、溫泉、海洋沉積物。于1917年由Smith等最早在實(shí)驗(yàn)室分離得到，隨后漸漸被認(rèn)識(shí)和研究。該菌營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞呈長(zhǎng)桿狀，多數(shù)為單生，少數(shù)成對(duì)或鏈狀排列，細(xì)胞寬0.6~1.0 um、長(zhǎng)2.0~3.5 um，硬壁菌門屬，熱抗穩(wěn)定，細(xì)菌繁殖體革蘭氏染色陰性，細(xì)菌芽孢為孔雀綠著色，所產(chǎn)芽孢無(wú)致病性、無(wú)熱原、無(wú)毒，對(duì)壓力蒸汽的抵抗力在大多數(shù)微生物中較強(qiáng)。

嗜熱脂肪芽孢桿菌培養(yǎng)條件。營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCI 5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4.H2O，則有利于產(chǎn)性芽孢。好氧型，培養(yǎng)溫度55℃。

實(shí)際應(yīng)用上，美國(guó)藥典、歐洲藥典、日本藥典等將這類菌收錄為熱力滅菌生物指示劑；我國(guó)衛(wèi)生部頒布的《消毒與滅菌效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)》(GB 15981-1995)[8]、《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)將其作為壓力蒸汽滅菌效果評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)菌株；國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局將其作為濕熱滅菌用生物指示物列入《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物》(GB 18281.3-2000)標(biāo)準(zhǔn)中。綜上所述，嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢懸液可用于濕熱滅菌、甲醛滅菌、過(guò)氧化氫蒸汽滅菌等滅菌效果的驗(yàn)證和評(píng)價(jià)。

嗜熱脂肪芽孢桿菌為什么能作為指示物，原因有如下：

1）菌種的耐受性應(yīng)大于需滅菌產(chǎn)品中所有可能污染菌的耐受性

常見(jiàn)的滅菌方法可以殺死待滅菌產(chǎn)品中所有可能的污染菌。對(duì)熱滅菌而言，微生物的耐熱性從高到低為：細(xì)菌芽孢＞革蘭陽(yáng)性細(xì)菌＞革蘭陰性細(xì)菌＞病毒。細(xì)菌芽孢具有穩(wěn)定及耐不良環(huán)境的能力，使其不但抗熱，還對(duì)紫外線、干燥、電離輻射和很多有毒的化學(xué)物質(zhì)都有很強(qiáng)的抗性。

2）菌種無(wú)致病性。生物界的微生物達(dá)幾萬(wàn)種，有一少部分能致病。考慮安全問(wèn)題，滅菌驗(yàn)證過(guò)程中，嗜熱脂肪芽孢桿菌非致病菌，選取作為指示微生物。

3）菌種穩(wěn)定且易于保存?？紤]到實(shí)際培養(yǎng)、應(yīng)用便捷性及穩(wěn)定性，選取的指示微生物嗜熱脂肪芽孢桿菌，其生長(zhǎng)培養(yǎng)不易受外界環(huán)境影響，遺傳性狀不易發(fā)生變異，存活期長(zhǎng)。

4）易于培養(yǎng)。嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑中休眠孢子含量要在90%以上。市場(chǎng)對(duì)生物指示劑的廣泛需求，制作生物指示劑的嗜熱芽孢是較容易培養(yǎng)，操作簡(jiǎn)單的。

嗜熱脂肪芽孢桿菌作為挑戰(zhàn)指示菌，驗(yàn)證空間消毒效果時(shí)候，過(guò)氧化氫氣體滅菌效果能否通過(guò)？也就是說(shuō)過(guò)氧化氫汽態(tài)是否能殺滅嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子，并且可以降低6log對(duì)數(shù)單位值，這是作為GMP無(wú)菌車間空間消毒的要求。

市面上的過(guò)氧化氫消毒方式五花八門，近年來(lái)似雨后春筍般涌出來(lái)，因此選擇過(guò)氧化氫空間滅菌一定要謹(jǐn)慎、謹(jǐn)慎又謹(jǐn)慎?，F(xiàn)場(chǎng)測(cè)試是第一要?jiǎng)?wù)，別光嘴上說(shuō)得好聽(tīng)，一到現(xiàn)場(chǎng)就鱉孫了，不是彩鋼板被腐蝕掉就是生物指示劑沒(méi)變色。就算現(xiàn)場(chǎng)考察過(guò)了，也要看看其在別家的質(zhì)量口碑如何，別整著使用不到一年就報(bào)廢了，但這種情況是很常見(jiàn)的。上述以鐘工十余年的經(jīng)驗(yàn)之談，有感而發(fā)，并且建議考慮新一代的干霧過(guò)氧化氫滅菌技術(shù)，例如比林科漢過(guò)氧化氫消毒機(jī)，KV系列產(chǎn)品，智能化、數(shù)字化消毒應(yīng)用方案。

潤(rùn)聯(lián)新型VHP過(guò)氧化氫發(fā)散機(jī)，其采用了世界先進(jìn)的冷蒸發(fā)文丘里技術(shù)原理，干霧過(guò)氧化氫是目前汽化較先進(jìn)、科學(xué)的技術(shù)整合方案。干霧是最接近氣態(tài)的過(guò)氧化氫顆粒，這種干霧在空氣中不會(huì)沉降，接觸表面后會(huì)反彈，擴(kuò)散性更好，不留消毒滅菌死角；同時(shí)又不會(huì)破裂濕潤(rùn)表面，因而不容易腐蝕設(shè)備和墻壁等物表。與汽化技術(shù)相比，干霧技術(shù)使用的過(guò)氧化氫濃度和使用量都較低，并且搭載便利易轉(zhuǎn)運(yùn)的輔助設(shè)備和智能化數(shù)字過(guò)程動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)裝置。

潤(rùn)聯(lián)深耕新版GMP生物制藥行業(yè)，一線操作，現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)證知識(shí)儲(chǔ)備充分，熟悉FDA/WHO及歐盟GMP的認(rèn)證，可以提出完美的潔凈區(qū)空間滅菌方案。