最簡(jiǎn)單的RNAi——Accell siRNA

不需要借助任何轉(zhuǎn)染試劑、不需要構(gòu)建病毒載體、不需要包裝病毒顆粒、更不需要借助電轉(zhuǎn)儀，和慣性思維通通SAY NO！

您需要的僅僅是一個(gè)Accell?siRNA！Accell?siRNA可直接在典型的難轉(zhuǎn)染細(xì)胞中進(jìn)行有效的基因沉默，其中包括SH-SY5Y (神經(jīng)母細(xì)胞瘤)、Jurkat (T細(xì)胞)和原代神經(jīng)元等。

事實(shí)上，遞送方式仍然是目前RNAi在眾多難轉(zhuǎn)染細(xì)胞應(yīng)用中的最大屏障之一。為了克服這一困難，Dharmacon研發(fā)了一種創(chuàng)新性siRNA，能夠促進(jìn)siRNA的遞送，不依賴于病毒載體或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，可在幾乎所有細(xì)胞類型中成功遞送。

此外，在進(jìn)行RNAi時(shí)，如果您研究的蛋白質(zhì)半衰期較長(zhǎng)或研究的表型需要較長(zhǎng)時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)的情況下，普通的siRNA就存在一定的局限性。到底怎樣才能誘導(dǎo)長(zhǎng)時(shí)效的基因沉默呢？那當(dāng)然還是我們的Accell?siRNA，您可以通過簡(jiǎn)單的重復(fù)補(bǔ)加，從而使靶基因達(dá)到一個(gè)更長(zhǎng)時(shí)效的敲低狀態(tài)。

那么，Accell?siRNA到底有多么神奇呢？和普通siRNA相較，它的優(yōu)勢(shì)到底體現(xiàn)在哪兒呢？小編今天就帶您一探究竟！?

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1.?可在多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類型中成功進(jìn)行RNAi，且在多個(gè)細(xì)胞系中得到驗(yàn)證：

利用有效的算法在HeLa S3, Rat-2, 3T3-L1, Jurkat, THP-1, NHA和SH-SY5Y等細(xì)胞中進(jìn)

行多個(gè)基因敲低效率的驗(yàn)證，結(jié)果表明Accell?siRNA可在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞中保證基因沉默效率、基本無細(xì)胞毒性，對(duì)細(xì)胞活性影響極小。

Accell siRNA適用于普通脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，部分如下表所示：

2.?操作簡(jiǎn)便，RNAi重復(fù)性高

您要做的只是將Accell?siRNA和Accell Delivery Media（也可使用低/無血清培養(yǎng)基）混

合成mix后，直接加到細(xì)胞中培養(yǎng)72h，即可進(jìn)行相應(yīng)的表型分析鑒定。

3.?延長(zhǎng)沉默時(shí)效——重復(fù)補(bǔ)加Accell?siRNA

重復(fù)補(bǔ)加Accell siRNA誘導(dǎo)長(zhǎng)時(shí)效基因沉默的基本操作流程：首先將細(xì)胞鋪板培養(yǎng)，

24小時(shí)后去掉生長(zhǎng)培養(yǎng)基，加入delivery mix (Accell siRNA 和Delivery Media的混合物)，培養(yǎng)24~48h后，將delivery mix替換為完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞長(zhǎng)滿，隨后傳代細(xì)胞，同時(shí)按著之前同樣的操作重新補(bǔ)加Accell delivery mix。

Tips:?經(jīng)驗(yàn)證，通過重復(fù)補(bǔ)加Accell siRNA，HeLa細(xì)胞可持續(xù)沉默30天（傳9代），SH-

SY5Y可持續(xù)沉默20天（傳5代）

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4.??Accell siRNA不會(huì)引起炎癥反應(yīng)

較傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方式而言，Accell siRNA基本不會(huì)引起先天性免疫應(yīng)答，RNAi作用

溫和，對(duì)細(xì)胞生理基本無影響。

5.??Accell技術(shù)與傳統(tǒng)脂質(zhì)體介導(dǎo)技術(shù)兼容

為了測(cè)試Accell siRNA的長(zhǎng)時(shí)效基因沉默是否與脂質(zhì)體介導(dǎo)的siRNA轉(zhuǎn)染相兼容，持

續(xù)用Accell PPIB siRNA作用HeLa細(xì)胞10天后，再用Dharmacon? siGENOME? (未修飾) siRNA GAPDH和Dharmacon? DharmaFECT? 1轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行傳統(tǒng)脂質(zhì)體方式轉(zhuǎn)染，每個(gè)基因的總敲除率為80%或更高?(第13天) 。這表明Accell siRNA在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面的靈活性，Accell siRNA與脂質(zhì)體介導(dǎo)遞送技術(shù)結(jié)合可實(shí)現(xiàn)多基因沉默。

6.?特殊化學(xué)性修飾增加穩(wěn)定性，提升轉(zhuǎn)染效率

7.?可減少非特異性遞送效果，最大程度降低基因沉默中的脫靶效率

…………（更多強(qiáng)大功能等您來詢！）

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綜上，Accell siRNA這些基本屬性極大地拓寬了您使用RNAi 研究生物問題和細(xì)胞類型的范圍?？朔藗鹘y(tǒng)意義上難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的技術(shù)漏洞，節(jié)省了構(gòu)建病毒載體、包裝病毒顆粒的高額成本，大大節(jié)約您寶貴的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

如果您正在為RNAi效果不好而苦惱，如果您的細(xì)胞恰巧是難轉(zhuǎn)染細(xì)胞，如果您嘗試了多種轉(zhuǎn)染試劑仍不能成功遞送siRNA，那么，趕緊聯(lián)系您身邊的優(yōu)寧維銷售咨詢Accell?siRNA吧~

Dharmacon?Accell?siRNA涵蓋人、小鼠、大鼠全基因組的產(chǎn)品，您只需要把您想要研究的基因ID或名稱提供給我們，就可輕松幫您解決RNAi實(shí)驗(yàn)難題！

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