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每日科研進展 l 2022.07.25 l 利用體外合成的dsRNA防治瓜類病毒

2023-08-23 14:47 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


利用體外合成的dsRNA防治瓜類病毒

密集型園藝作物中病毒性疾病的反復(fù)出現(xiàn)需要替代控制策略。與病原體同源的dsRNA分子的局部應(yīng)用已被提出作為植物病毒控制的工具。這些dsRNA誘導(dǎo)沉默機制,RNA干擾(RNAi),能夠降解與之同源的dsRNA

黃瓜綠斑駁花葉病毒(CGMMV)對瓜類作物構(gòu)成嚴重威脅。由于商業(yè)品種尚未獲得對該病毒的遺傳抗性,該研究旨在通過RNAi控制該病毒。

本文獲得了在細菌中表達dsRNA的結(jié)構(gòu),用于局部施用處理黃瓜植株,以及在溫室室中進行的農(nóng)業(yè)接種實驗。

在春季和夏季進行了溫室試驗,當植物受到病毒攻擊時,研究了幾種參數(shù)的差異,包括癥狀的嚴重程度、干重、總高度、病毒積累和病毒衍生的小干擾RNAvsiRNAs)。


圖 1. CGMMV接種和CP-dsRNA處理后植株的表型參數(shù)

在溫室試驗中,用dsRNA噴施植物顯著降低了植物中CGMMV的癥狀。在相同條件下進行的農(nóng)桿菌滲入法試驗也有效地限制了CGMMV疾病的進展。


圖 2. 在(A)春季和(B)夏季進行的實驗中,不同處理后植物的長度和干重之間的散點圖


在春季進行的溫室試驗中,dsRNA噴施植物的癥狀顯著減少,與未處理植物相比,植物的發(fā)育得到改善。在dsRNA處理的植物中,病毒滴度和VSIRNA明顯降低。在夏季進行的溫室試驗中,dsRNA的保護作用不太明顯。


圖 3. 在春季和夏季進行的兩次溫室試驗中,dsRNA處理和未處理的感染植物之間CGMMV積累的數(shù)量差異


圖 4. 與CGMMV基因組匹配的21-24個nt類小RNA的分布

此外,研究了從噴灑或農(nóng)桿菌滲入法dsRNA中提取的長鏈RNA的流動性,發(fā)現(xiàn)它可以在施用部位的局部、遠端和遠端檢測到。在局部和遠端點也檢測到VSIRNA,并比較累積的差異。


圖 5. 不同方法處理后,近端和遠端葉片中vsiRNA數(shù)量的差異


圖 6. 噴灑dsRNA處理后,近端和遠端葉片中vsiRNA數(shù)量的差異

鑒于這些結(jié)果,局部應(yīng)用dsRNA被認為是控制黃瓜CGMMV的一種有希望的策略。

原文鏈接:

https://doi.org/10.3389/fpls.2022.895953

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