常用的膜電位熒光探針盤點
RH 414(貨號:HCQ001068)
RH 414是用于膜電位的熒光探針。RH 414 [N-(3-三乙銨丙基)-4-(4-(4-(二乙氨基)苯基)丁二烯基)二溴化吡啶鎓]是一種神經(jīng)元示蹤染料。它用于監(jiān)測神經(jīng)元的膜電位,突觸活性和離子通道活性。Ex/Em: 532/716nm (in Methanol)。
圖1.RH 414化學(xué)結(jié)構(gòu)
Di-2-ANEPEQ (JPW 1114)(貨號:HCQ000596)
Di-2-ANEPE膜電位熒光探針(160605-94-7,也稱 JPW 1114)用來測定快速膜電位改變。(160605-94-7)ANEP染料屬于快速反應(yīng)膜電位染料類。它們的光學(xué)反應(yīng)總夠快能檢測刺激細(xì)胞中瞬時跨膜電位的改變,能證明膜電勢依賴激發(fā)光譜的轉(zhuǎn)換。λEx/λEm (EtOH) 530/720 nm.
圖2.Di-2-ANEPEQ (JPW 1114)化學(xué)結(jié)構(gòu)
JC-10(貨號:HCQ000588FY)
JC-10 是 JC-1 的優(yōu)越替代品。與JC-1?相比,JC-10 具有更好的水溶性。JC-10 可檢測細(xì)胞、組織以及純化的線粒體膜電位。當(dāng)線粒體膜電位較高的情況下,JC-10 聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以發(fā)出紅色的熒光;當(dāng)線粒體膜電位較低情況下,JC-10 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時 JC-10 作為單體,可以發(fā)出綠色熒光。 JC-10 能夠選擇性地進(jìn)入線粒體,并隨著膜電位的增加可逆地將其顏色從綠色變?yōu)槌壬晒?:λex 510 nm, λem 525 nm。
DiSBAC2(3)——慢響應(yīng)的膜探針(貨號:LSH44727)
DiSBAC2(3) 是一種帶有長波長激發(fā)和發(fā)射光靈敏的膜電位探針。DiSBAC2(3)?是一種慢響應(yīng)的探針,用于測定細(xì)胞跨膜電位。熒光波長:λ Excitation (nm)/λ Emission (nm):538/555。
圖3.DiSBAC2(3)熒光光譜
DiOC2(3)(3,3'-二乙基氧雜羰花青碘)(貨號:HXH504170)
DiOC2(3)(3,3'-二乙基氧雜羰花青碘)是一種用于測量膜電位的熒光探針。 DiOC2(3)? 被用于通過使用熒光發(fā)射比檢測的流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)菌活力。熒光:λex 444 nm, λem 512 nm 磷酸鹽緩沖液/SDS pH 8.0;λex 480 nm, λem 505 nm 乙醇溶液。
圖4.DiOC2(3)熒光光譜
Di-8-ANEPPS——快速響應(yīng)的膜電位染料(貨號:YZM019653)
Di-8-ANEPPS是一種快速響應(yīng)的膜電位染料(探針)?,在質(zhì)膜的外葉中具有出色的保留能力。Di-8-ANEPPS 萘基苯乙烯基電壓敏感染料,它們的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜會因電壓的變化而變化。Di-8-ANEPPS 熒光 :λex 498 nm, λem 713 nm in DMSO。Di-8-ANEPPS 比?Di-4-ANEPPS?光學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定,光毒性更小。
使用案例
圖5.Di-8-ANEPPS 染色神經(jīng)節(jié);染料摻入外膜,露出單個神經(jīng)元細(xì)胞體的輪廓。B表示響應(yīng)于A中用白色箭頭標(biāo)記的神經(jīng)元的兩次連續(xù)c48/80應(yīng)用(用跡線下方的條標(biāo)記)的動作電位放電。跡線顯示了三個記錄周期內(nèi)的響應(yīng),中間的非記錄周期為6 s。在這個神經(jīng)節(jié)中,19個神經(jīng)元中有17個對c48/80有反應(yīng)。C PGP9.5陽性培養(yǎng)的腸神經(jīng)元。缺乏c-kit免疫反應(yīng)性表明培養(yǎng)物中缺乏肥大細(xì)胞。D表明c48/80應(yīng)用仍然在分別用H1和H2阻斷劑吡拉敏(1μM)和雷尼替?。?0μM)的組合處理的培養(yǎng)物中引起尖峰。E 顯示豚鼠粘膜下叢(左圖)的整個安裝制備中的綠色 PGP9.5 陽性神經(jīng)元和紅色 c-kit 陽性圓形和光滑肥大細(xì)胞(其中一些在中圖中由白色三角形標(biāo)記),它們在形態(tài)上與 Cajal 的紡錘形間質(zhì)細(xì)胞不同。右圖顯示了兩種染色的合并圖像。