??? ? ? 今天介紹的病毒是絲狀病毒(Filovirus)。Filovirus是個(gè)拉丁詞，意思是“狀如細(xì)絲的病毒”。絲狀病毒外形呈絲狀，或具分支多形態(tài)，或U形，6形，或環(huán)形(特別在純化后)，病毒的直徑約80nm，可達(dá)1400nm長(zhǎng)，純化出的病毒長(zhǎng)度可能達(dá)790-970nm。表面有瘤狀突起的形狀，散布在脂質(zhì)雙層膜中。

? ? ? ? 絲狀病毒中，最著名的是埃博拉病毒(Ebolavirus)，因?yàn)榘２├鲅獰嶂滤缆矢哌_(dá)50%~90%。

? ? ? ?在埃博拉病毒中，扎伊爾埃博拉病毒(ZEBOV/EBOV)是致死率最高的，可謂是殺人如麻；蘇丹埃博拉病毒(SUDV/SEBOV)絲毫不遜色于扎伊爾埃博拉病毒；塔伊森林埃博拉病毒(TAFV/CIEBOV)對(duì)人類有明顯的致病性，但一般不致死，對(duì)黑猩猩的致死率很高；而雷斯頓埃博拉病毒(RESTV/REBOV)卻不傷害人類。因此，在這里介紹一下雷斯頓埃博拉病毒——以下簡(jiǎn)稱雷斯頓病毒。

簡(jiǎn)介

? ? ? ?雷斯頓病毒(RESTV/REBOV)是埃博拉病毒中六種已知病毒之一。 雷斯頓病毒在非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物中引起埃博拉出血熱(EHF)；與其他五種埃博拉病毒不同，它不引起人類疾病，但已引起無(wú)癥狀感染。雷斯頓病毒最初于1990年被描述為埃博拉病毒(EBOV)的新“毒株”。它是雷斯頓埃博拉病毒種的唯一成員，埃博拉病毒屬的埃博拉病毒科屬于單病毒科。雷斯頓病毒以首次發(fā)現(xiàn)該病毒的美國(guó)弗吉尼亞州雷斯頓的名字命名。

? ? ? ? RESTV于1989年在Hazleton實(shí)驗(yàn)室(現(xiàn)為Covance)的食蟹獼猴中發(fā)現(xiàn)。由于雷斯頓(Reston)靠近華盛頓特區(qū)，都會(huì)區(qū)以及緊密相關(guān)的埃博拉病毒的致死性，引起了媒體的廣泛關(guān)注。 盡管雷斯頓病毒已被列為生物安全等級(jí)4級(jí)(BSL-4)病原體，但它對(duì)人類沒(méi)有致病性，雖然對(duì)猴子是有害的； 該病毒與猿猴出血熱病毒(SHFV)合并感染使人們對(duì)致死性的認(rèn)識(shí)更加復(fù)雜。盡管正在進(jìn)行研究，但缺乏人類致病性的決定因素尚未發(fā)現(xiàn)。

命名

? ? ? ? 根據(jù)國(guó)際病毒分類委員會(huì)(ICTV)制定的分類單元命名規(guī)則，雷斯頓病毒名稱始終要大寫(xiě)，但絕不能斜體，并且可以縮寫(xiě)(RESTV為正式縮寫(xiě))。?

? ? ? ? 雷斯頓病毒于1990年首次作為埃博拉病毒的新“毒株”被引入。在2000年，它獲得了雷斯頓埃博拉病毒的名稱；在2002年，它更名為雷斯頓埃博拉病毒。以前的病毒縮寫(xiě)是EBOV-R(代表埃博拉病毒-雷斯頓型)，最近是REBOV(代表雷斯頓埃博拉病毒)。 該病毒在2010年重新命名為雷斯頓病毒(RESTV)，并于2010年獲得目前的稱號(hào)。

? ? ? ? 如果雷斯頓埃博拉病毒種具有雷斯頓埃博拉病毒的特性，并且其基因組與原型雷斯頓病毒的基因組不同，則該病毒屬于雷斯頓病毒(RESTV)。 例如，存在雷斯頓病毒變種賓夕法尼亞州(RESTV/Pen)，在核苷酸水平上相差不到10％。

初露崢嶸

? ? ? ?在調(diào)查1989年11月發(fā)生的猿猴出血熱病毒(SHFV)時(shí)，一名來(lái)自USAMRIID的電子顯微鏡學(xué)家Thomas W. Geisbert在從菲律賓進(jìn)口到哈茲爾頓實(shí)驗(yàn)室的食蟹獼猴中采集的組織樣本中發(fā)現(xiàn)了與埃博拉病毒相似的絲狀病毒。 在弗吉尼亞州雷斯頓。 彼得·賈林(Peter Jahrling)博士進(jìn)一步分離出了絲狀病毒，在三個(gè)月的時(shí)間內(nèi)，三分之一的猴子死亡，每天死亡2到3只。

? ? ? ? 事件發(fā)生時(shí)從178名動(dòng)物飼養(yǎng)員那里采集了血樣。其中有6個(gè)最終進(jìn)行了血清轉(zhuǎn)化，使用ELISA檢測(cè)為陽(yáng)性。 但是，它們沒(méi)有癥狀。? 1990年1月，Hazelton的一名動(dòng)物管理員在對(duì)感染的食蟹獼猴的肝臟進(jìn)行尸檢時(shí)割傷了自己。 在疾病控制和預(yù)防中心(CDC)的指導(dǎo)下，在整個(gè)潛伏期內(nèi)對(duì)動(dòng)物處理者進(jìn)行監(jiān)視。 當(dāng)動(dòng)物飼養(yǎng)員沒(méi)有生病時(shí)，可以得出結(jié)論，該病毒對(duì)人類的致病性很低。

研究

? ? ? ? 在食蟹獼猴中發(fā)現(xiàn)絲狀病毒后，疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行了追蹤感染的調(diào)查。 這些猴子是從菲律賓進(jìn)口的，菲律賓以前沒(méi)有SHFV或埃博拉病毒感染的記錄。 懷疑這些猴子在乘坐荷航航空公司的航班到達(dá)雷斯頓之前染上了兩種疾病。 貨物被追蹤到紐約市，得克薩斯州和墨西哥城，沒(méi)有一個(gè)產(chǎn)生感染病例。

? ? ? ? 到1990年1月，Hazelton實(shí)驗(yàn)室從先前的損失中恢復(fù)過(guò)來(lái)，并開(kāi)始從提供原始動(dòng)物的馬尼拉同一家企業(yè)再次進(jìn)口猴子。 進(jìn)口的猴子被感染并被安樂(lè)死。2月初，疾病預(yù)防控制中心在得克薩斯州愛(ài)麗絲市收到了該病的報(bào)告。? 3月，美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)檢疫處暫時(shí)禁止從世界任何地方將猴子進(jìn)口到美國(guó)。

? ? ? ? 在弗吉尼亞州雷斯頓宣布絲狀病毒疾病暴發(fā)后，進(jìn)行了一次血清調(diào)查以評(píng)估感染的流行程度。 在CDC接受的幾百個(gè)血清中，約有百分之十顯示出對(duì)埃博拉病毒抗原的反應(yīng)-盡管通常水平較低。與直覺(jué)相反，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性的大多數(shù)猴子來(lái)自印度尼西亞。

? ? ? ? 1990年5月，由Susan Fisher-Hoch，Steve Ostroff和Jerry Jennings領(lǐng)導(dǎo)的調(diào)查被發(fā)送到印度尼西亞。 在調(diào)查過(guò)程中，假設(shè)可能會(huì)發(fā)生交叉感染，因?yàn)橥ǔ⒁伤苹疾〉暮镒臃旁趲团苫\子中，這些籠子中最多可容納二十到三十只疑似患病的猴子。 到達(dá)后，他們被告知大多數(shù)猴子是從蘇門答臘島進(jìn)口的。 調(diào)查小組在兩種情況下均未發(fā)現(xiàn)病毒。

? ? ? ? 在印度尼西亞進(jìn)行調(diào)查之后，在佐治亞州迪卡爾布縣CDC校園的4級(jí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)了32只猴子：16只綠猴(Cecopithecus aethiops)和16只食蟹的獼猴。 在十六只綠猴和食蟹獼猴中，一半感染了雷斯頓病毒，另一半感染了埃博拉病毒。埃博拉病毒感染幾乎對(duì)所有猴子都是致命的。但是，大多數(shù)感染了雷斯頓病毒的猴子在一個(gè)月內(nèi)就康復(fù)了。 將幸存的猴子飼養(yǎng)兩年，以檢測(cè)出該病毒的任何痕跡，這次檢測(cè)以沒(méi)有發(fā)現(xiàn)病毒而告終。 但是，猴子仍然具有高水平的抗體。

雷斯頓病毒風(fēng)波過(guò)后

? ? ? ? 在迪卡爾布縣(DeKalb County)的疾病預(yù)防控制中心(CDC)校園進(jìn)行測(cè)試后，兩只幸免于雷斯頓病毒感染的猴子被感染了大劑量的埃博拉病毒，以生產(chǎn)埃博拉疫苗。 兩只猴子中的一只擁有持續(xù)的免疫力，?第二只猴子死了。

? ? ? ?發(fā)生暴發(fā)的實(shí)體建筑物于1995年5月30日被拆除，并在其所在地建造了日托中心。

病毒爆發(fā)案例

? ? ? ? 1.1989年~1990年，菲律賓–在美國(guó)負(fù)責(zé)出口動(dòng)物的靈長(zhǎng)類動(dòng)物設(shè)施中，食蟹類獼猴的死亡率很高。設(shè)施中的三名工人產(chǎn)生了抗體，但沒(méi)有生病。

? ? ? ?2.1989年，美國(guó)弗吉尼亞州雷斯頓，RESTV被從菲律賓進(jìn)口的猴子引入弗吉尼亞州和賓夕法尼亞州的檢疫設(shè)施。

? ? ? ?3.1990年，美國(guó)弗吉尼亞州雷斯頓，RESTV被從菲律賓進(jìn)口的猴子引入弗吉尼亞州和德克薩斯州的檢疫設(shè)施。 有四個(gè)人產(chǎn)生了抗體，但沒(méi)有生病。

? ? ? ?4.1996年，美國(guó)得克薩斯州愛(ài)麗絲—得克薩斯州靈長(zhǎng)類動(dòng)物中心發(fā)生暴發(fā)，從菲律賓進(jìn)口了猴子。

? ? ???5.2008年，菲律賓馬尼拉——2008年12月11日，菲律賓馬尼拉以北稍稍農(nóng)場(chǎng)的豬只對(duì)該病毒呈陽(yáng)性反應(yīng)。 疾病預(yù)防控制中心和世界衛(wèi)生組織正在調(diào)查中。

?? ? ?6.2009年1月23日，菲律賓衛(wèi)生官員宣布，一名養(yǎng)豬場(chǎng)的工人已感染該病毒。 盡管該人無(wú)癥狀，并且感染的來(lái)源尚不確定，但這可能代表了豬到人間傳播雷斯頓病毒的第一例病例，這一事實(shí)可能會(huì)引起關(guān)注，因?yàn)樨i可能會(huì)向人類傳播更多致命的疾病 。 對(duì)該情況進(jìn)行了調(diào)查。最終發(fā)現(xiàn)六名工人對(duì)雷斯頓埃博拉病毒的抗體進(jìn)行了血清陽(yáng)性測(cè)試。 沒(méi)有人出現(xiàn)任何明顯的疾病癥狀。

? ? ? ?7.2015年，菲律賓馬尼拉——9月6日，衛(wèi)生署報(bào)告了靈長(zhǎng)類動(dòng)物在一個(gè)研究繁殖設(shè)施中爆發(fā)的雷斯頓埃博拉病毒。 測(cè)試了25名工人的病毒。 所有工人均對(duì)該病呈陰性反應(yīng)。

流行文化中的雷斯頓病毒

? ? ? ? 理查德·普雷斯頓(Richard Preston)1994年最暢銷的書(shū)《血疫》(The Hot Zone)使弗吉尼亞州雷斯頓的埃博拉病毒暴發(fā)戲劇化。2019年，《國(guó)家地理》播出了六集迷你劇，也名為《血疫》。

埃博拉病毒的VP40

? ? ? ? 埃博拉病毒是一種非節(jié)段的反義RNA病毒，它在人類中引起嚴(yán)重的、經(jīng)常是致命的出血熱，即埃博拉出血熱(EHF)。埃博拉病毒的基質(zhì)蛋白VP40是一種重要的結(jié)構(gòu)蛋白，在病毒在被感染細(xì)胞質(zhì)膜上的組裝和出芽過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。VP40蛋白通過(guò)與細(xì)胞膜結(jié)合，與糖蛋白的細(xì)胞質(zhì)尾部相互作用，并與核糖核蛋白復(fù)合物結(jié)合來(lái)發(fā)揮作用。

? ? ? ? VP40單體由兩個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成，N端寡聚結(jié)構(gòu)域和C端膜結(jié)合結(jié)構(gòu)域，通過(guò)柔性連接器連接。N端和C端域折疊成類似拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的β夾層結(jié)構(gòu)。在N端結(jié)構(gòu)域內(nèi)有兩個(gè)重疊的L-結(jié)構(gòu)域，序列PTAP和PEPY在殘基7-13處，這是有效出芽所必需的。L-結(jié)構(gòu)域被認(rèn)為通過(guò)與特定的宿主細(xì)胞蛋白(如TSG101和VPS-4)的相互作用來(lái)介導(dǎo)它們?cè)诔鲅窟^(guò)程中的功能。

? ? ? ? VP40協(xié)調(diào)埃博拉病毒生命周期中的許多功能。這包括——病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)控，形態(tài)發(fā)生，包裝和成熟病毒粒子出芽。

? ? ? ? VP40經(jīng)過(guò)中間組裝狀態(tài)(如八聚體)。人們注意到，埃博拉病毒編碼的蛋白質(zhì)(VP30、VP35和VP40)獨(dú)立地作為RNA沉默的抑制因子，這表明病毒在復(fù)制過(guò)程中積極抵抗細(xì)胞RNAi。

? ? ? ? 研究基質(zhì)蛋白VP40的理由主要是因?yàn)榘２├《镜母咚劳雎?，這是列為風(fēng)險(xiǎn)組4病原體，美國(guó)衛(wèi)生和公眾服務(wù)部選擇代理，NIH/NIAID類別優(yōu)先病原體，CDC類生物恐怖劑和生物制劑的出口控制澳大利亞集團(tuán)。

? ? ? ? 基質(zhì)蛋白VP40的表達(dá)足以在哺乳動(dòng)物宿主中產(chǎn)生病毒樣顆粒(沒(méi)有病毒遺傳物質(zhì))，從形態(tài)學(xué)角度來(lái)看，這些顆粒與活病毒非常難以區(qū)分。

? ? ? ? 埃博拉病毒治療方案中，VP40基質(zhì)蛋白作為可能的研究目標(biāo)，可能是一種治療選擇。

埃博拉病毒的棘突蛋白

? ? ?? 埃博拉病毒棘突蛋白(GP)是埃博拉病毒最重要的蛋白，它不僅僅是埃博拉病毒的主要抗原，而且具有細(xì)胞毒性，它積極參與埃博拉出血熱的病理過(guò)程，與起成形作用的VP40可以形成絲狀的病毒樣顆粒。

? ? ? ?埃博拉病毒棘突蛋白MPER區(qū)域有一個(gè)TACE切割位點(diǎn)，這個(gè)切割位點(diǎn)的蛋白酶是ADAM17，如果抑制ADAM17活性，或者將MPER的TACE切割位點(diǎn)刪除，則切割活性大大減弱。TACE切割位點(diǎn)加劇了埃博拉病毒棘突蛋白的細(xì)胞毒性。因此，在制作以埃博拉病毒棘突蛋白為包裝的治療型慢病毒基因載體，必須要考慮埃博拉病毒棘突蛋白TACE切割位點(diǎn)問(wèn)題。

? ? ? ? 雷斯頓病毒：多謝杜鵑大姐！