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三箱社交行為實驗測試方法“白皮書”,5分鐘領(lǐng)悟三箱社交行為實驗“奧妙”!

2022-06-04 06:29 作者:腦聲常談  | 我要投稿

實驗介紹

社會互動是眾多物種生物學(xué)的基本和適應(yīng)性組成部分。社會認可對于定義社會的網(wǎng)絡(luò)和關(guān)系的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性至關(guān)重要。對于動物,如老鼠,識別同種可能對維持社會等級和配偶選擇很重要。

各種神經(jīng)精神疾病的特征是社會行為和社會認知的破壞,包括抑郁癥、自閉癥譜系障礙、雙相情感障礙、強迫癥和精神分裂癥。對人類和動物模型(例如,果蠅、線蟲、小鼠)的研究已經(jīng)確定了參與社會行為調(diào)節(jié)的基因。為了評估動物模型的社交能力,已經(jīng)開發(fā)了幾種行為測試。使用動物模型和適當(dāng)?shù)纳鐣袨闇y試的綜合研究可能會導(dǎo)致改進社會精神病理學(xué)治療的發(fā)展。

三箱社交行為箱,上海欣軟定制

三箱社交行為測試已成功用于研究幾種近交和突變小鼠品系。該測試的主要原則是基于受試者小鼠在兩次實驗期間自由選擇在三個盒子的隔間中的任何一個中花費時間,包括與它不熟悉的一只或兩只老鼠的間接接觸。為了量化實驗小鼠的社會傾向,主要任務(wù)是測量 a:與新同種動物相處的時間和 b:對與熟悉同種動物的偏好。因此,該測試的實驗設(shè)計允許評估社會行為的兩個關(guān)鍵但可區(qū)分的方面,例如社會歸屬/動機,以及社會記憶和新穎性。在這種情況下,“社交性”被定義為與另一只老鼠共度時光的傾向,與單獨在相同但空蕩蕩的房間中花費的時間相比. “對社會新奇事物的偏好”被定義為花時間與以前從未遇到過的鼠標而不是熟悉的鼠標7的傾向。該測試提供了可靠的結(jié)果,然后必須通過替代社交測試進行仔細分析、解釋和支持/確認。除了特定的應(yīng)用,克勞利的社交能力測試可以作為突變小鼠一般行為篩選的重要組成部分。

實驗準則(白皮書、SOP流程)

  • 設(shè)備和房間設(shè)置

  1. 社交能力和社交新奇偏好測試裝置由一個長方形的三室盒子組成。每個腔室為 19 x 45 厘米,分隔墻由透明有機玻璃制成,中間部分開放,可自由進入每個腔室。

  2. 使用兩個相同的金屬絲杯狀容器,這些容器帶有可移動的蓋子,大到足以容納一只鼠標。這些被垂直放置在設(shè)備內(nèi),每個側(cè)室中都有一個,將包含天真的/不熟悉的鼠標。每個容器都由金屬線組成,以允許圓柱體內(nèi)部和外部之間的空氣交換,但足夠小以防止內(nèi)部動物與外部動物之間的直接物理相互作用。

  3. 行為測試應(yīng)在上午 9:00 至下午 6:00 之間進行。

  4. 一般房間照明為 650 勒克斯。

  5. 使用 VisuTrak動物行為程序(上海欣軟,中國)來監(jiān)控和記錄觀察和跟蹤參數(shù)。

  6. 每次試驗后,用 70% 乙醇(小鼠之間)清潔所有腔室,然后分別用 Clidox 1:5:1(籠子之間)清潔所有腔室,以防止嗅覺提示偏差并確保適當(dāng)消毒。

  7. 進行觀察的人必須距離儀器至少 2 米。

  • 動物準備

  1. 根據(jù)當(dāng)?shù)貏游锉Wo委員會指南和協(xié)議的標準和要求,在一個 12 小時光/暗循環(huán)(早上 7:00 開燈)的房間里每籠飼養(yǎng)三到五只老鼠,隨意獲取食物和水。

  2. 在第一次試驗開始前 30 分鐘將所有裝有老鼠的籠子轉(zhuǎn)移到行為室。

  3. 該實驗需要兩類小鼠,一類作為對照、幼稚或“不熟悉”的動物,另一類是測試對象。對于對照小鼠,使用具有相同背景(通常為 C57BL6)、年齡(通常為 8-12 周大)、性別和體重的小鼠,之前未與受試小鼠有任何接觸(不是同窩仔)。每個實驗需要兩只對照小鼠,試驗之間可以使用相同的對照小鼠。

  • 習(xí)慣(adaptation)

  1. 使用分隔的有機玻璃墻隔離左右隔間。

  2. 將空的電線容納杯放在左右室的中間(每個站點一個)。

  3. 將測試老鼠放在中間室的中心進行適應(yīng)。

  4. 習(xí)慣5分鐘。

VisuTrack動物行為分析軟件,上海欣軟

測試的社會關(guān)系方面

  1. 將其中一只對照小鼠 ("Stranger 1") 放在位于其中一個側(cè)室的電線收容杯內(nèi)。Stranger 1 在房間左側(cè)或右側(cè)的放置在試驗之間系統(tǒng)地改變。

  2. 移除隔間之間的墻壁,以允許測試小鼠自由訪問以探索三個腔室中的每一個。

  3. 立即開始監(jiān)控和記錄以下參數(shù):

  4. 持續(xù)時間:對象老鼠與容器杯外殼或不容納老鼠 Stranger 1 之間的直接(主動)接觸次數(shù),分別針對每個腔室。受試老鼠與收容杯之間的直接接觸,或受試者老鼠的身體在杯子周圍 3-5 厘米的區(qū)域內(nèi)伸展被視為主動接觸;

  5. 每個隔間中受試小鼠的其他行為數(shù)量,包括行走、自我修飾、超過 5 秒沒有任何身體運動(“凍結(jié)”),以及不尋常的行為,如跳躍、重復(fù)行為等;

  6. 每個隔間的進入次數(shù)。當(dāng)老鼠的頭和四只爪子進入房間時,就認為它在房間里。

  7. 測試的持續(xù)時間為 10 分鐘。

社會新奇/偏好測試部分

  1. 將第二只控制鼠標(“陌生人 2”)放在對面室(在第一節(jié)期間是空的)的相同電線容器內(nèi)。監(jiān)控 描述的相同參數(shù),區(qū)分在陌生人 1 與陌生人 2 存在的情況下主體老鼠之間的行為。

  2. 會議 II 的持續(xù)時間為 10 分鐘。

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