Sanger 雙脫氧鏈終止法測序的基本原理。
? ? ? ? 雙脫氧鏈終止法測序的基本原理是:以待測DNA片段為模板,利用酶法合成與待測片段互補(bǔ)的DNA鏈。在正常的合成體系中分別加入4種3位缺少羥基的雙脫氧核苷酸底物,即ddATP、ddGTP、 ddCTP、 ddTTP, 制備出四套末端標(biāo)記的DNA片段。由于ddNTPs一旦摻入合成的DNA鏈|其鏈的合成即被終止,這樣得到一套長短不一的片段,而每套片段被打斷的位置卻位于同一堿基,4套片段分別打斷在A、T、C、G處。當(dāng)對(duì)這4個(gè)不同堿基產(chǎn)生的4套DNA片段進(jìn)行變性膠電泳分離時(shí),即可產(chǎn)生一個(gè)可以直接讀出DNA順序的梯狀區(qū)帶
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