艾美捷CompTech人補體C3蛋白：

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名稱：?C3蛋白

編號：?A113

規(guī)格：?250 μg/vial

濃度：?1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書)

類型?冷凍液體

活動：?>值為70%，與正常人血清標準相比 (見分析證書) 。

純度：?>95%由SDS-PAGE

緩沖區(qū)：?10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數(shù)。?A280 nm在1.0 mg/mL時的=為1.03

分子量：?185000Da (2鏈)

防腐劑：?無，0.22μm過濾

存儲：?- 7 0oC或以下。避免凍融 (>每次解凍活性損失10%) 。

根源?正常的人類血清?(經(jīng)認證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測均為陰性) 。

預防措施?在處理人體血液制品時要采取常規(guī)的預防措施。

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一般說明

人類天然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽，包含兩條二硫鍵連接的鏈?。C3是補體激活的所有三種途徑的激活的核心(Law，S。K.A.和里德，K。

B.?M. (1995)).每個途徑的起始都產(chǎn)生與目標表面結合的蛋白水解酶復合物 (C3轉化酶?) 。這些酶在C3中切割一個肽鍵，釋放過敏性毒素C3a并激活C3b。在很短的一段時間?內?(~60μs) ，這種新生的C3b能夠與目標表面的羥基發(fā)生反應并共價偶聯(lián)。碳水化合?物是首選的目標，但蛋白質的羥基和氨基也會發(fā)生反應。這種用C3b標記目標表面的過?程被稱為調理作用。新生C3b的反應位點是硫酯(Tack?B。J.等人。 (1980);?Pangburn M.K.和穆勒-EberhardH。J. (1980) )，C3b通過共價酯鍵與目標相連?(如果C3b附著在?氨基上，則形成酰胺鍵) 。大多數(shù)在補體激活過程中被激活的C3永遠不會附著在表面?，因為它的硫酯與形成水的流體相C3b反應，而C3b被H和形成iC3b的因子迅速失活。表?面結合的C3b在所有三個途徑中對于有效激活C5和C5b-9復合物的形成都是必需的。表?面結合的C3b及其分解產(chǎn)物iC3b和C3d被淋巴細胞和吞噬細胞上的許多受體識別，這些?受體使用C3b配體刺激抗原呈遞給適應性免疫系統(tǒng)的細胞。最終的結果是目標特異性b?細胞和t細胞群體的擴大。

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物理特性和結構

分子量：18.5萬道爾頓， 由兩條二硫鍵連接的鏈組成。阿爾法鏈是110000道爾?頓?(包含C3a和C3d域) ，測試鏈是75000道爾頓。阿爾法鏈和阿爾法鏈是通過一個二硫?鍵連接起來的。C3的pI約為。5.9

C3被C3轉化酶切割后，C3a?(77個氨基酸片段，9083?Da) 從alpha鏈的n端釋?放出來，C3b?(176,000?Da) 變成

共價附著在活化劑表面的。C3和C3b的晶體衍生結構均已被描述(Gros，P。??(2008) )?，這些結果表明，在C3a-?C3b肽鍵被裂解后，C3的C3b部分發(fā)生了很大的構象變化。

天然的C3和C4在血漿中循環(huán)，通過分子內硫酯鍵連接其C3d或C4d結構域中的??甘氨酸和谷氨酰胺殘基。這些硫酯鍵容易受到氨、?甲胺、羥胺和聯(lián)胺等氨的親零攻擊?，所有這些胺都已被用于滅活補體

血清

CAS編號：80295-41-6

MDL編號?：??MFCD00130836

功能

C3對于有效的補體激活和隨后的抗原呈現(xiàn)給適應性免疫系統(tǒng)的細胞至關重要??(Lambris，J。D. (1988)).在識別目標補體后，被三種補體途徑中的一種激活，并在?目標表面形成酶?(C3轉化酶) 。這些酶 (C4b、C2a或C3b、Bb) 在阿爾法鏈的Arg?77后?切割C3，釋放過敏性毒素C3a并將C3b沉積在目標表面。雖然有一個非常弱的C3旁路系?統(tǒng)通過經(jīng)典和凝集素途徑運作?(C4b，C2a可以在沒有C3b的情況下激活C3b的102000)??，C3b是有效C5激活所必需的(Rawal?N。和潘伯恩M。K. (2003)).

純化的c3對凍融極為敏感，在每個凍融循環(huán)中損失510%的活性。它對諸如-20?等中間溫度也很敏感oC.它在中等溫度下停留的時間越長，失去的活性就越多。幾個?小時oC可以完全滅活它，即使它仍然被完全凍結。

測定

補體激活需要c3。因此，典型的C3功能檢測在缺乏C3的系統(tǒng)中使用細胞裂解端?點，除了來自被檢測的來源。有三種基本的檢測方法。1)抗體致敏的綿羊紅細胞 (EA?)?可用于使用c3耗盡的人血清的ch50型檢測。該方法的靈敏度約為50?ng?C3。2)?EA?和純化的成分C1、C4和C2可用于制造EAC142細胞，利用C3進行有效的C5激活和裂解??(Dodds，A。W.和Sim，R。B. (1997)).該方法的靈敏度約為5?ng?C3。3)另一種途徑?檢測方法可在5?mM?MgEGTA存在下使用兔紅細胞和c3耗盡的人血清。該方法的靈敏度?約為200?ng?C3。

對HBsAg、HTLV-I/II、STS以及HCV、HIV1和HIV-II抗體的認證檢測均為陰性。

參考文獻

Dodds, A.W. and Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN

019963539) Oxford University Press, Oxford.

Ghannam A, et al. (2008) Human C3 deficiency associated with impairments in dendritic cell differentiation, memory B cells, and regulatory T cells. J Immunol. 1;181(7):5158-

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