實時熒光PCR光學原理圖
作者:廣東正發(fā)科技有限公司
信息摘要:實時熒光PCR光學原理圖,聚合酶鏈式反應 (PCR) 是最常用的方法之一強大的分子生物學技術。使用 PCR專用led光學系統(tǒng),DNA 或 cDNA 模板中的特定序列可以復制或“放大”數(shù)千到一百萬倍;廣東正發(fā)科技有限公司封裝器材提供PCR光學解決方案的專業(yè)供應商...
聚合酶鏈式反應 (PCR) 是最常用的方法之一強大的分子生物學技術。使用 PCR,DNA 或 cDNA 模板中的特定序列可以復制或“放大”數(shù)千到一百萬倍使用序列特異性寡核苷酸,熱穩(wěn)定性 DNA聚合酶和熱循環(huán)。在傳統(tǒng)(端點)
擴增產(chǎn)物的 PCR、檢測和定量序列在反應結束后進行最后一個 PCR 循環(huán),并涉及 PCR 后分析,例如如凝膠電泳和圖像分析。
實時定量 PCR,每次測量 PCR 產(chǎn)物循環(huán)。通過在反應的指數(shù)放大階段監(jiān)測反應,用戶可以確定目標的初始數(shù)量,精度很高。PCR理論上可以指數(shù)級擴增DNA,加倍每次擴增的目標分子數(shù)量
循環(huán)。當它最初被開發(fā)出來時,科學家們認為循環(huán)次數(shù)和 PCR 終產(chǎn)物量可用于計算遺傳的初始數(shù)量通過與已知標準比較的材料。講話需要穩(wěn)健的定量,開發(fā)了實時定量 PCR 技術和終點 PCR
主要用于擴增特定的 DNA 進行測序,克隆,并用于其他分子生物學技術。在實時 PCR 中,DNA 的量是在
每個循環(huán)通過熒光染料產(chǎn)生的產(chǎn)量增加熒光信號與數(shù)量成正比
產(chǎn)生的 PCR 產(chǎn)物分子(擴增子)。數(shù)據(jù)在反應收率的指數(shù)階段收集起始數(shù)量的定量信息
放大目標。實時 PCR 中使用的熒光報告分子包括雙鏈 DNA (dsDNA)-結合染料,或附著在 PCR 引物或探針上的染料分子在擴增過程中與 PCR 產(chǎn)物雜交。反應過程中熒光的變化由結合熱的儀器測量具有熒光染料掃描能力的循環(huán)。通過繪圖熒光對循環(huán)數(shù),實時熒光定量 PCR儀器生成一個放大圖,
表示
產(chǎn)品在整個過程中的積累PCR 反應(圖 1)。
實時熒光定量 PCR 的優(yōu)點包括:
能夠監(jiān)測 PCR 的進展
實時發(fā)生的反應
? 能夠精確測量數(shù)量
在每個循環(huán)的擴增子,這允許高度準確的數(shù)量量化樣品中的起始材料,增加的動態(tài)檢測范圍
? 擴增和檢測一次完成
試管,消除 PCR 后操作,在過去的幾年里,實時熒光定量 PCR 已成為
檢測和定量 DNA 的領先工具或 RNA。使用這些技術,您可以實現(xiàn)精確的在兩倍范圍內(nèi)準確檢測。廣東正發(fā)科技有限公司封裝器材生物醫(yī)療技術中心提供PCR光學解決方案的專業(yè)供應商