翻譯后修飾蛋白組分析
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過程。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯、乙酸酯、酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學(xué)和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關(guān)鍵作用,如細胞分化、蛋白質(zhì)降解、信號傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)過程、基因表達調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞硝基化、甲基化、乙?;⒅|(zhì)化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學(xué)以及疾病診斷和預(yù)防研究中至關(guān)重要。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)受許多因素影響,鑒定過程比較繁瑣。例如:大多數(shù)翻譯后修飾水平很低。因此,在鑒定之前必須對修飾蛋白進行富集。此外,修飾的穩(wěn)定性以及質(zhì)譜的檢測效率也是PTMs分析過程中的關(guān)鍵因素。百泰派克生物科技搭建有高級的分析平臺,可用于表征各種翻譯后修飾(PTM)。
蛋白質(zhì)氨基酸序列的特定位置可以與化學(xué)基團或者小分子量的蛋白共價結(jié)合從而發(fā)生蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,PTMs),相較于沒有發(fā)生修飾的蛋白,PTMs會導(dǎo)致特定序列分子量的增加。在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質(zhì)譜進行分析;通過質(zhì)譜分析,得到的是一系列肽段的分子質(zhì)量信息。對于某一個特定肽段而言,在沒有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下,其序列信息和分子量是確定的;

當(dāng)它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,由于序列信息和分子量是確定的,磷酸根的分子量也是確定的;在質(zhì)譜檢測過程中發(fā)現(xiàn)其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,假設(shè)這個肽段就發(fā)生了磷酸化修飾,再通過二級質(zhì)譜圖進行二次確認。
各類PTMs的常見功能
