什么是胰蛋白酶

胰蛋白酶是一種消化酶，可分解許多脊椎動物消化系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)。它存在于胰液中。胰蛋白酶切割肽羧基末端的賴氨酸和精氨酸殘基。然而，當這兩種氨基酸后面跟著果仁糖時，它不會切割它們。胰蛋白酶的活性用于許多生物技術過程，胰蛋白酶的作用稱為胰蛋白酶消化或胰蛋白酶蛋白水解。胰蛋白酶的晶體結構如圖1所示。

圖1：胰蛋白酶

胰蛋白酶作用的最佳pH值為7.6-8.5。通常，在胰蛋白酶測定中使用酚紅來監(jiān)測上述pH范圍。酚紅在此pH范圍內(nèi)呈粉紅色。胰蛋白酶測定在干冰上進行。

胰蛋白酶如何在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用

質(zhì)膜上的蛋白質(zhì)負責多種功能，這些功能對于維持細胞的正常生理活動至關重要。一些質(zhì)膜蛋白（如鈣粘蛋白家族）是粘附蛋白，可作為錨，將細胞骨架蛋白連接到細胞外基質(zhì)。這有助于細胞粘附和細胞遷移。質(zhì)膜內(nèi)的粘附蛋白如圖2所示。

圖2：細胞粘附蛋白

在細胞培養(yǎng)物中，可以將胰蛋白酶添加到培養(yǎng)基中，通過消化粘附蛋白從培養(yǎng)皿表面釋放貼壁細胞。胰蛋白酶還通過消化粘附蛋白從聚集體中釋放細胞。EDTA也與胰蛋白酶一起添加到細胞培養(yǎng)物中，以螯合培養(yǎng)基中的二價離子。鈣和鎂離子可能抑制胰蛋白酶的作用。最終，胰蛋白酶有助于從細胞培養(yǎng)物中獲得單個細胞，促進細胞的下游處理。

結論

胰蛋白酶是一種消化肽的光解酶。胰蛋白酶廣泛用于細胞培養(yǎng)，以獲得單個細胞，因為胰蛋白酶消化粘附蛋白并將細胞釋放到培養(yǎng)基中。