分子生物學(xué)中使用的 3 個(gè)乙醇等級(jí)

乙醇在微生物學(xué)中有多種用途。它用于生物分子的純化和沉淀、組織學(xué)中的染色和復(fù)染標(biāo)本、包埋前的組織脫水和消毒。實(shí)驗(yàn)室常用的乙醇分為三個(gè)等級(jí)。

1) 95% (95.6%) 乙醇

這是您可以通過蒸餾獲得的最高濃度乙醇，因?yàn)?95.6% 的乙醇是一種共沸物，這意味著蒸汽狀態(tài)的乙醇與水的比例與液態(tài)相同。

2) 無水 (99–100%) 乙醇

一些對(duì)水的存在敏感的程序需要無水乙醇。生產(chǎn)濃度高于 95% 的乙醇的常用方法是使用添加劑來破壞共沸物的組成并允許進(jìn)一步蒸餾。因此，無水乙醇有時(shí)會(huì)含有微量的這些添加劑（如苯）。

3) 變性乙醇

工業(yè)乙醇（95% 或無水乙醇）含有添加劑（如甲醇和異丙醇）這是您最有可能在實(shí)驗(yàn)室中用于消毒的級(jí)別。

用于分子生物學(xué)的乙醇

沉淀核酸時(shí)不應(yīng)使用工業(yè)乙醇，因?yàn)槟承┨砑觿?huì)干擾下游應(yīng)用。 這有點(diǎn)難以預(yù)測(cè)，因?yàn)樘砑觿┮蛏a(chǎn)商而異，但最安全的做法是完全避免使用工業(yè)乙醇?？梢允褂?95% 或 100% 的非變性乙醇，但在處理熒光標(biāo)記的核酸時(shí)，我不使用無水乙醇，以避免殘留苯產(chǎn)生背景熒光。

消毒用乙醇

除了成本上的巨大差異外，使用哪種乙醇等級(jí)進(jìn)行消毒并不重要，因此大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都使用變性原液。重要的是最終乙醇濃度。濃度在 70% 到 90% 之間的乙醇是一種有效的消毒劑。因?yàn)?90% 的乙醇會(huì)凝固蛋白質(zhì)，而形成的蛋白質(zhì)層有效地使細(xì)胞處于休眠狀態(tài)。

然而，在 70% 的濃度下，乙醇需要更長(zhǎng)的時(shí)間才能蒸發(fā)，而這種更長(zhǎng)的接觸時(shí)間意味著它能夠更有效地穿透細(xì)胞。 70% 級(jí)的水對(duì)于使蛋白質(zhì)變性也很重要。而且 70% 的乙醇也往往更便宜且不易燃 。?