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透射電鏡應(yīng)用簡介

2022-08-12 17:54 作者:笨笨熊愛吃肉  | 我要投稿

透射電鏡(TEM),全稱透射電子顯微鏡,用電磁場作透鏡,把經(jīng)加速和聚集的電子束投射到超薄切片的樣品上(通常70-90nm),電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產(chǎn)生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關(guān),因此可以形成明暗不同的影像,影像將在放大、聚焦后在成像器件上顯示出來。是一種高分辨率(0.1nm-0.2nm)、高放大倍數(shù)(0.2K-600K)的顯微鏡。是觀察和研究物質(zhì)超微結(jié)構(gòu)的強(qiáng)有力工具。透射電鏡在細(xì)胞生物學(xué)、組織學(xué)、病毒學(xué)、病理學(xué)、分子生物學(xué)、材料科學(xué)等諸多領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用??梢杂^測動(dòng)物植物細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、葉綠體、液泡、細(xì)胞內(nèi)生細(xì)菌等結(jié)構(gòu)及病理變化。可以觀測病毒顆粒、外泌體、病原微生物、各類細(xì)菌真菌、納米材料及納米顆粒、晶體結(jié)構(gòu)。


實(shí)驗(yàn)流程:包埋、制片、拍照;


取樣:

1、動(dòng)物組織標(biāo)本

1-3min內(nèi)取樣,取材前可提前準(zhǔn)備裝有電鏡固定液的培養(yǎng)皿,將小組織塊離體取下后立即投入培養(yǎng)皿內(nèi),用手術(shù)刀在培養(yǎng)皿的固定液中進(jìn)行切割成小塊,取樣組織體積控制在以下尺寸(1mm×1mm×1mm正方體、1mm×1mm×3mm長方體狀、1mm×2mm×3mm薄片狀)。固定液滲透能力有限,超出此范圍后組織會無法完全固定,后續(xù)實(shí)驗(yàn)無法完成,務(wù)必請重視此過程。

取材時(shí)盡量精確到需要觀察的目的部位(如觀察腎小球取腎皮質(zhì);觀察胰島取胰島豐富的胰尾;皮膚,腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進(jìn)行固定)。


取材時(shí)一定注意避免鑷子擠壓等機(jī)械損傷,刀片要鋒利避免挫傷組織。


組織取下后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫避光固定2h,再轉(zhuǎn)移至保存,冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。時(shí)樣本可保存1個(gè)月左右。


結(jié)果展示:



參考:

https://www.servicebio.cn/goodsdetail?id=1540



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