生物化學(xué)考研整理第十四章:DNA的生物合成
第十四章:DNA的生物合成
第一節(jié):DNA復(fù)制的基本特征
?半保留復(fù)制:指DNA復(fù)制進(jìn)行復(fù)制時(shí),雙螺旋結(jié)構(gòu)解開成兩條單鏈,各自作為模板合成與之互補(bǔ)的新鏈,在新合成的子代DNA雙鏈中一條來(lái)自于親代,另一條是完全重新合成的。
雙向復(fù)制:是指DNA復(fù)制時(shí),從起始點(diǎn)向兩個(gè)方向解鏈,形成兩個(gè)延伸方向相反的復(fù)制叉的復(fù)制方式
復(fù)制子:復(fù)制子是指從一個(gè)DNA復(fù)制起始點(diǎn)起始的DNA復(fù)制區(qū)域。復(fù)制子是獨(dú)立完成復(fù)制的功能單位。原核生物是單復(fù)制子完成的復(fù)制
復(fù)制叉:復(fù)制中的模板DNA形成兩個(gè)延伸方向相反的開鏈區(qū),稱為復(fù)制叉。指的是正在進(jìn)行復(fù)制的雙鏈DNA分子所形成的Y形區(qū)域。
半不連續(xù)復(fù)制:是指DNA復(fù)制時(shí),一條鏈合成的方向?yàn)?——3,與復(fù)制叉移動(dòng)方向一致,另一條鏈合成方向是3-5,與復(fù)制叉移動(dòng)方向相反,其合成是不連續(xù)的DNA的復(fù)制方式。
前導(dǎo)鏈:在DNA復(fù)制過(guò)程中,沿著解鏈方向生成的子鏈DNA的合成是連續(xù)進(jìn)行的,這股鏈稱為前導(dǎo)鏈另一股鏈因?yàn)閺?fù)制的方向與解鏈方向相反,不能連續(xù)延長(zhǎng),只能隨著模板鏈的解開,逐段的從5-3生成引物并復(fù)制子鏈,這一不連續(xù)復(fù)制稱為后隨鏈。
岡崎片段:沿著后隨鏈的模板鏈合成的新DNA片段稱為岡崎片段。
參與DNA復(fù)制的酶及其功能
(1)DNA聚合酶:以DNA為模板,4種dntp為底物,催化新鏈不斷延長(zhǎng),合成時(shí)需引物提供3’羥基,此外,還具有核酸外切酶活性
(2)解旋酶:是DNA堿基對(duì)之間的氫鍵解開
(3)拓?fù)洚悩?gòu)酶:有兩種1)拓?fù)洚悩?gòu)酶1:消除DNA的負(fù)超螺旋,使DNA分子變?yōu)樗沙跔顟B(tài)2)拓?fù)洚悩?gòu)酶11:引入負(fù)超螺旋,消除復(fù)制叉前進(jìn)帶來(lái)的扭曲張力
(4)單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB):保持模板處于單鏈狀態(tài),便于復(fù)制,與此同時(shí),還可防止單鏈DNA模板被核酸酶水解
(5)引物酶:為rna聚合酶,以DNA為模板,催化一般rna引物合成
(6)DNA連接酶:使DNA鏈的3;oh端與另一DNA鏈的5;p端連接,形成3;5;磷酸二酯鍵從而把兩相鄰的DNA連接成完整鏈。
DNA復(fù)制保真性的機(jī)制
DNA復(fù)制的保真性可由以下三種機(jī)制保證
1.子鏈DNA依照母鏈模板按堿基互補(bǔ)配對(duì)規(guī)律生成,保證了子代DNA與母鏈DNA在堿基序列上一一對(duì)應(yīng),這是最基本的機(jī)制
2.堿基選擇功能DNA聚合酶111能依據(jù)堿基的化學(xué)構(gòu)型表現(xiàn)不同的親和力,實(shí)現(xiàn)正確的堿基選擇
3.DNA聚合酶1,111,均具有3;——5;外切酶活性,有糾正錯(cuò)配的校正作用,此外,再經(jīng)錯(cuò)配修復(fù)機(jī)制,保證DNA復(fù)制的保真性。
第三節(jié):原核生物DNA復(fù)制過(guò)程
一:復(fù)制的起始
(一)DNA的解鏈:
(二)引物合成和引發(fā)體形成
二:DNA鏈的延長(zhǎng)
三:復(fù)制的終止
復(fù)制的終止過(guò)程包括切除引物,填補(bǔ)空缺和連接切口
逆轉(zhuǎn)錄:指以rna為模板。按照堿基配對(duì)原則,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,催化合成DNA的過(guò)程。