探索生命?分子間相互作用分析技術(shù)了解一下
文章開(kāi)篇想問(wèn)大家?guī)讉€(gè)問(wèn)題:生命的本質(zhì)是什么?你對(duì)自身了解么?維持生命活動(dòng)的機(jī)理又是怎樣的呢?
這可不是直擊靈魂的柏拉圖三連問(wèn)——我是誰(shuí)?從哪來(lái)?到哪去?
我們自然是在科學(xué)的角度解答這些問(wèn)題。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),生命活動(dòng)的基礎(chǔ)是生物分子間以及生物分子與其它分子間的相互作用。那分子間相互作用分析就是生命科學(xué)的基礎(chǔ)性技術(shù),當(dāng)然這僅僅是從分子水平上了解生命現(xiàn)象,闡明生命活動(dòng)的機(jī)理,發(fā)現(xiàn)生命的本質(zhì),并不代表生命整體,但這對(duì)于人類(lèi)認(rèn)識(shí)和改造自然、了解人類(lèi)自身、發(fā)現(xiàn)致病機(jī)制以及治療途徑,都具有非常重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。
01常見(jiàn)的分子間相互作用
配體與細(xì)胞表面受體:免疫檢測(cè)點(diǎn)、Car-T等
轉(zhuǎn)錄因子與核酸調(diào)控序列:?jiǎn)?dòng)子、增強(qiáng)子等
蛋白復(fù)合體亞基之間的組裝與調(diào)節(jié):Integrin、鐵納米籠等
酶分子與激活劑/抑制劑
蛋白與小分子化合物
蛋白與抗體
02常見(jiàn)的分子互作檢測(cè)技術(shù)

技術(shù)不足WB耗時(shí)費(fèi)力、操作繁瑣Elisa需要標(biāo)記酵母雙雜終點(diǎn)技術(shù)CoIP周期長(zhǎng)、繁瑣ChIP操作繁瑣,技術(shù)難度大EMSA耗時(shí)費(fèi)力,步驟繁瑣熒光共振能量偏移(FRET)檢測(cè)強(qiáng)親和力的相互作用
傳統(tǒng)用于鑒定生物大分子間相互作用的技術(shù),具體實(shí)驗(yàn)中常因目的蛋白表達(dá)量低、抗體靈敏度低等原因而檢測(cè)不出目的條帶,或者因?yàn)榭贵w的特異性不好,而無(wú)法判斷抗體是否與目的蛋白有結(jié)合,同時(shí)也極易出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性的結(jié)果。

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因此,我們不得不提一項(xiàng)極具優(yōu)勢(shì)的分子互作檢測(cè)技術(shù)——Biacore
03Biacore
Biacore是基于表面等離子體共振(SPR)技術(shù)來(lái)實(shí)時(shí)跟蹤生物分子間的相互作用,而不用任何標(biāo)記物的技術(shù),是被公認(rèn)的檢測(cè)分子互作的金標(biāo)準(zhǔn)。?

表面等離子共振(SPR)原理

Biacore-動(dòng)態(tài)、實(shí)時(shí)傳感圖
Biacore-優(yōu)勢(shì)
? 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),反映分子互作的動(dòng)態(tài)全過(guò)程
? 完全活性的分子互作分析
? 無(wú)需標(biāo)記,省時(shí)省力
? 芯片類(lèi)型豐富、齊全,應(yīng)對(duì)多樣的樣品種類(lèi)
? 多種研究策略,滿(mǎn)足不同領(lǐng)域的應(yīng)用
? 檢測(cè)靈敏度高、動(dòng)態(tài)范圍廣( mM~pM)
? 預(yù)設(shè)程序模板,全自動(dòng)進(jìn)樣分析,可靠、準(zhǔn)確
Biacore-應(yīng)用領(lǐng)域
? 功能基因組與蛋白質(zhì)組
? 腫瘤與癌癥
? 免疫學(xué)
? 神經(jīng)生物學(xué)
? 傳染性疾病
? 食品、環(huán)境安全監(jiān)測(cè)
? 細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)
? 蛋白質(zhì)構(gòu)效關(guān)系
? 新藥研發(fā)、質(zhì)控
? 疫苗、抗體藥物開(kāi)發(fā)
Biacore系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于蛋白-蛋白、蛋白-小肽、蛋白-DNA,蛋白-藥物、小肽-噬菌體、SPR-MS等各種生物分子之間相互作用。其應(yīng)用領(lǐng)域包含生命科學(xué)、食品安全、環(huán)境檢測(cè)、生物醫(yī)學(xué)、毒素和抗生素快速檢測(cè)、蛋白質(zhì)組學(xué)、藥物篩選及相關(guān)藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)時(shí)檢測(cè)、生物分子特殊肽段及相關(guān)偶合分子的檢測(cè)、病毒及致病分子/蛋白及受體研究、分子識(shí)別、免疫調(diào)節(jié)、免疫測(cè)定等,尤其適于在高校、科研院所進(jìn)行科學(xué)研究及教學(xué)實(shí)驗(yàn)使用。
關(guān)于更多Biacore介紹,可點(diǎn)擊?Biacore分子間相互作用在科研中的應(yīng)用最全匯總。
親和力是判定分子間相互作用重要的參數(shù),是了解分子識(shí)別及生物學(xué)過(guò)程、藥物的發(fā)現(xiàn)與篩選等的重要指標(biāo)。對(duì)于藥效的評(píng)價(jià)、生物大分子及其復(fù)合體的穩(wěn)定性等則需要從動(dòng)力學(xué)、熱力學(xué)和熱穩(wěn)定性等方面進(jìn)行全面的研究,它包括分子間的結(jié)合、結(jié)合的快慢、結(jié)合的強(qiáng)弱、結(jié)合的機(jī)理等方面。

普健生物提供BiacoreTM、MicroCalTM ITC和MicroCalTM DSC三大分子間相互作用分析系統(tǒng)。根據(jù)客戶(hù)不同需求提供各具特色分子間相互作用分析服務(wù),高效、快速、高靈敏度,性?xún)r(jià)比極高。
BiacoreTM系統(tǒng)
普健生物擁有BiacoreTM?X100(單通道)和BiacoreTM T200(4通道,384連續(xù)進(jìn)樣)兩大系統(tǒng),可以提供優(yōu)質(zhì)的動(dòng)力學(xué)檢測(cè)服務(wù)。
信息類(lèi)型:親和力、結(jié)合動(dòng)力學(xué)、定量、特異性結(jié)合活性、穩(wěn)定性和特異性
MicroCalTM ITC200
普健生物MicroCalTM?iTC200等溫滴定微量熱儀可從熱力學(xué)的角度研究生物大分子之間的相互作用,提供生物大分子相互作用的熱力學(xué)機(jī)理。
信息類(lèi)型:結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、摩爾結(jié)合焓、摩爾結(jié)合熵、摩爾恒壓熱容和動(dòng)力學(xué)參數(shù)(如酶活力、酶促反應(yīng)米氏常數(shù)和酶轉(zhuǎn)換數(shù))
MicroCalTM?DSC
差示熱量掃描儀(DSC)通過(guò)升高或降低溫度來(lái)誘導(dǎo)高分子的改變,從而測(cè)量分子相互作用的熱力學(xué)變化,是表征分子熱穩(wěn)定性的首選技術(shù)。普健生物MicroCal VP-Capillary DSC能為客戶(hù)快速準(zhǔn)確的鑒定出最穩(wěn)定的蛋白質(zhì)和生物藥物候選物。
信息類(lèi)型:熱穩(wěn)定性