膜體系篩庫前，需對誘餌蛋白在酵母細胞中是否正確表達進行檢測，即功能驗證（functional assay），實驗中用到的對照AD載體為pOst1-NubI。如果誘餌蛋白在酵母細胞中正確表達，并定位到酵母細胞膜上，同時與誘餌蛋白融合的Cub-LexA-VP16結(jié)構(gòu)定位于細胞質(zhì)側(cè)，則其將與Ost1-NubI結(jié)構(gòu)域互作，從而形成完整的泛素，激活報告基因表達。

實驗設(shè)計

通過標(biāo)準(zhǔn)

?如果誘餌蛋白在該體系中正確表達，即構(gòu)建的BD載體適應(yīng)該體系，反應(yīng)1在SD-trp-leu-his和SD-trp-leu-his-ade培養(yǎng)基上的生長率應(yīng)達10%-100%。

?如果誘餌蛋白不存在自激活，反應(yīng)2在SD-trp-leu-his和SD-trp-leu-his-ade培養(yǎng)基上應(yīng)無顯著生長。

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